蛋白酶体抑制剂MG132通过FOXO3a/Puma通路对急性T淋巴细胞白血病细胞增殖凋亡的影响

发布时间：2021-04-20 05:09

　　【目的】研究蛋白酶体抑制剂MG132对急性T淋巴细胞白血病（T-ALL）细胞株的作用及其机制。【方法】将不同浓度的MG132作用于T-ALL细胞株CCRF-CEM,MTS技术检测细胞增殖、流式细胞技术检测细胞凋亡。用q RT-PCR、Western blotting分别从RNA及蛋白水平检测FOXO3a及其下游Puma的表达。利用慢病毒干扰技术构建FOXO3a-sh RNA稳定细胞株,再次验证MG132对其作用。【结果】MG132对CCRF-CEM细胞起抑制增殖、促进凋亡作用,而对健康人外周血单个核细胞增殖抑制作用较弱。MG132作用于CCRF-CEM细胞后:FOXO3a的m RNA表达水平无明显改变,Puma的m RNA表达明显上升;细胞中FOXO3a及Puma蛋白表达量增加;其中胞核中FOXO3a蛋白表达量上升明显,胞浆中亦略有上升。FOXO3a sh RNA干扰后:CCRF-CEM细胞的FOXO3a及Puma蛋白表达均下降;MG132的细胞增殖抑制作用减弱。【结论】MG132能够抑制T-ALL细胞株CCRF-CEM增殖,诱导其凋亡,其机制与抑制泛素-蛋白酶体对FOXO3a的降解、... 

【文章来源】：中山大学学报(医学科学版). 2017,38(02)北大核心CSCD

【文章页数】：6 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料、试剂与仪器
    1.2 方法
        1.2.1 细胞活性检测
        1.2.2 凋亡检测
        1.2.3 RNA的提取
        1.2.4 Western blot
        1.2.5 慢病毒感染
    1.3 统计学分析
2 结果
    2.1 MG132抑制CCRF-CEM细胞的增殖
    2.2 MG132促进CCRF-CEM细胞凋亡
    2.3 MG132处理CCRF-CEM细胞后FOXO3a及Puma m RNA的变化
    2.4 MG132对CCRF-CEM细胞FOXO3a、Puma蛋白表达的影响
    2.5 敲低FOXO3a后,FOXO3a及Puma的表达减低
    2.6 FOXO3a敲低的细胞对MG132敏感性下降
3 讨论



本文编号：3149039