H19调控的肿瘤相关巨噬细胞促进肝细胞肝癌侵袭转移的机制探
发布时间：2021-04-20 06:54
目的:探讨活化的肿瘤相关巨噬细胞（Tumor-associnated macrophages,TAMs）对肝细胞肝癌（hepatocellular carcinoma,HCC）侵袭转移和干性特征的影响,并进一步探讨其潜在的分子机制。方法:生物信息学分析64例HCC基因芯片信息,探讨局部分化抗原群68（Cluster of Differentiation 68,CD68）阳性（CD68+）TAMs的浸润和Long non-coding RNA H19（H19）的相关性及H19与miR193b和MAPK之间的相关性。随机选取64例经部分肝切除术治疗的HCC患者石蜡组织切片标本,同时收集患者的临床病理资料,利用免疫组织化学技术（Immunohistochemical,IHC）检测CD68和CD163、神经细胞型钙黏蛋白（N-cadherin）、上皮型钙黏蛋白（E-cadherin）和β-连接素（β-catenin）的表达,分析H19的表达和CD68,CD163及上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）相关蛋白表达的相关性,同时分析H19表达和...
【文章来源】：天津医科大学天津市 211工程院校
【文章页数】：91 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
中文摘要
Abstract
缩略语/符号说明
前言
研究现状、成果
研究目的、方法
一、 H19参与肿瘤相关巨噬细胞促进HCC侵袭转移
1.1 对象和方法
1.1.1 病例及标本来源
1.1.2 细胞系
1.1.3 免疫组织化学染色试剂
1.1.4 细胞培养试剂
1.1.5 细胞功能实验试剂
1.1.6 荧光实时定量PCR实验试剂
1.1.7 细胞成球实验试剂
1.1.8 流式细胞术实验试剂
1.1.9 质粒扩增、提取和转染实验
1.1.10 芯片检测试剂
1.1.11 人基因组U133基因芯片检测实验
1.1.12 免疫组化染色实验操作流程及结果判定
1.1.13 实时荧光定量PCR实验
1.1.14 平板克隆实验
1.1.15 AnnexinV凋亡实验
1.1.16 划痕修复实验
1.1.17 Transwell侵袭实验
1.1.18 流式细胞术
1.1.19 体外成球实验
1.1.20 质粒扩增、提取和转染实验
1.2 结果
1.2.1 生物信息学分析H19与TAMs浸润之间的相关性
1.2.2 在HCC组织中H19与TAMs浸润、EMT和临床病理指标之间的相关性
1.2.3 活化的TAMs对HCC细胞H19表达的影响
1.2.4 活化的TAMs对HCC细胞增殖和凋亡的影响
1.2.5 活活化的TAMs对HCC细胞侵袭转移的影响
1.2.6 活化的TAMs对HCC干性特征的影响
1.2.7 HCC细胞高表达H19后对其侵袭转移和干性的影响
1.3 讨论
1.4 小结
二、H19介导的TAMs促进HCC细胞侵袭转移的机制探讨
2.1 对象和方法
2.1.1 细胞系
2.1.2 细胞培养试剂
2.1.3 荧光实时定量PCR实验试剂
2.1.4 WesternBlot实验试剂
2.1.5 芯片检测试剂
2.1.6 荧光素酶报告基因实验试剂
2.1.7 人基因组U133基因芯片检测试验
2.1.8 实时荧光定量PCR实验
2.1.9 WesternBlot
2.1.10 荧光素酶报告基因实验
2.2 结果
2.2.1 生物信息学分析提示H19-miR193b-MAPK调节轴的存在
2.2.2 活化的TAMs对HCC中miR193b及其下游靶基因的影响……
2.2.3 H19高表达对HCC细胞miR193b及其下游靶基因的影响……
2.2.4 荧光素酶报告基因实验证实H19-miR193b-MAPK调节轴的存在
2.2.5 活化的TAMs对HCCEMT发生的影响
2.2.6 活化的TAMs对HCC干性基因转录的影响
2.3 讨论
2.4 小结
结论
参考文献
发表论文和参加科研情况说明
附录
综述
综述参考文献
致谢
个人简历
本文编号：3149201
【文章来源】：天津医科大学天津市 211工程院校
【文章页数】：91 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
中文摘要
Abstract
缩略语/符号说明
前言
研究现状、成果
研究目的、方法
一、 H19参与肿瘤相关巨噬细胞促进HCC侵袭转移
1.1 对象和方法
1.1.1 病例及标本来源
1.1.2 细胞系
1.1.3 免疫组织化学染色试剂
1.1.4 细胞培养试剂
1.1.5 细胞功能实验试剂
1.1.6 荧光实时定量PCR实验试剂
1.1.7 细胞成球实验试剂
1.1.8 流式细胞术实验试剂
1.1.9 质粒扩增、提取和转染实验
1.1.10 芯片检测试剂
1.1.11 人基因组U133基因芯片检测实验
1.1.12 免疫组化染色实验操作流程及结果判定
1.1.13 实时荧光定量PCR实验
1.1.14 平板克隆实验
1.1.15 AnnexinV凋亡实验
1.1.16 划痕修复实验
1.1.17 Transwell侵袭实验
1.1.18 流式细胞术
1.1.19 体外成球实验
1.1.20 质粒扩增、提取和转染实验
1.2 结果
1.2.1 生物信息学分析H19与TAMs浸润之间的相关性
1.2.2 在HCC组织中H19与TAMs浸润、EMT和临床病理指标之间的相关性
1.2.3 活化的TAMs对HCC细胞H19表达的影响
1.2.4 活化的TAMs对HCC细胞增殖和凋亡的影响
1.2.5 活活化的TAMs对HCC细胞侵袭转移的影响
1.2.6 活化的TAMs对HCC干性特征的影响
1.2.7 HCC细胞高表达H19后对其侵袭转移和干性的影响
1.3 讨论
1.4 小结
二、H19介导的TAMs促进HCC细胞侵袭转移的机制探讨
2.1 对象和方法
2.1.1 细胞系
2.1.2 细胞培养试剂
2.1.3 荧光实时定量PCR实验试剂
2.1.4 WesternBlot实验试剂
2.1.5 芯片检测试剂
2.1.6 荧光素酶报告基因实验试剂
2.1.7 人基因组U133基因芯片检测试验
2.1.8 实时荧光定量PCR实验
2.1.9 WesternBlot
2.1.10 荧光素酶报告基因实验
2.2 结果
2.2.1 生物信息学分析提示H19-miR193b-MAPK调节轴的存在
2.2.2 活化的TAMs对HCC中miR193b及其下游靶基因的影响……
2.2.3 H19高表达对HCC细胞miR193b及其下游靶基因的影响……
2.2.4 荧光素酶报告基因实验证实H19-miR193b-MAPK调节轴的存在
2.2.5 活化的TAMs对HCCEMT发生的影响
2.2.6 活化的TAMs对HCC干性基因转录的影响
2.3 讨论
2.4 小结
结论
参考文献
发表论文和参加科研情况说明
附录
综述
综述参考文献
致谢
个人简历
本文编号：3149201
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