缺氧诱导因子-1α调控乳腺癌血管生成的活体、纵向、多模态影像学研究

发布时间：2021-04-24 04:48

　　目的:建立缺氧诱导的绿色荧光蛋白表达乳腺癌细胞模型,以作为HIF-1α活体成像报告系统。方法:选取5HRE/GFP质粒,转染小鼠乳腺癌细胞Ca761,加药物筛选,通过极限稀释法获取单克隆细胞株,加100μM CoCl2模拟缺氧条件处理24h,荧光显微镜下选取荧光最强的细胞株,扩大培养并冻存。缺氧预处理后,荧光显微镜观察传代细胞的绿色荧光,同时用Western Blot方法检测细胞内HIF-1 α的表达,以验证细胞内绿色荧光蛋白和HIF-1 α的表达。将2×106个细胞（0.1ml）接种于615系小鼠皮下,观察细胞成瘤情况,并使用荧光成像平台观察移植瘤的荧光信号。结果:经质粒转染及药物筛选后的细胞命名为Ca761-gre-gfp,该细胞经模拟缺氧预处理后能够在荧光显微镜下观察到绿色荧光,且Western Blot能够检测到HIF-1α蛋白的表达,而无模拟缺氧预处理的细胞则无上述荧光信号及蛋白表达。Ca761-gre-gfp接种615系小鼠皮下后,可见肿瘤生长,并且肿瘤内可观察到荧光信号。结论:成功建立了缺氧诱导的绿色荧光蛋白表达的乳腺癌细胞模型,可以作为HIF-1 α活体成像报告系统,适... 

【文章来源】：北京协和医学院北京市 211工程院校 985工程院校

【文章页数】：79 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
前言
    参考文献
第一部分 缺氧诱导的绿色荧光蛋白表达的乳腺癌细胞模型的建立
    摘要
    Abstract
    实验材料
    实验方法
    实验结果
    讨论
    结论
    参考文献
第二部分 乳腺癌血管生成及HIF-1α活性的多模态成像研究
    摘要
    Abstract
    实验材料
    实验方法
    实验结果
    讨论
    结论
    参考文献
综述 缺氧诱导因子1-α与乳腺癌的研究进展
    参考文献
缩略词中英对照表
个人简历
致谢



本文编号：3156708