黄芪多糖对肺癌细胞共培养体系中BMSCs增殖规律及TAFs相关分子表达的影响
发布时间：2021-06-28 18:42
目的通过建立肺癌Lewis细胞（Lewis Lung Cancer,LLC）与骨髓间充质干细胞（bone mesenchymal stem cells,BMSCs）共培养体系,研究肿瘤微环境下BMSCs的形态、增殖、周期及肿瘤相关成纤维细胞（Tumor-associated Fibroblasts,TAFs）蛋白表达的变化;分析并探讨黄芪多糖（Astragalus polysaccharides,APS）对肺癌微环境中BMSCs增殖规律的影响及保护作用。方法:1.采用CCK-8法于1296 h分别检测0200μg/m L APS对BMSCs、LLC细胞体外增殖的影响,筛选APS最佳有效浓度;利用苯酚-硫酸法检测672 h内BMSCs、LLC细胞对最佳浓度APS体外代谢的影响,筛选APS最佳药效时间;2.建立LLC细胞和BMSCs的共培养体系,实验分4组:正常BMSCs组、肺癌LLC组、共培养模型组及APS最佳药物浓度干预组,同时分别设立48 h换液、72 h换液及不换液3种不同处理方式;3.通过CCK-8法、流式细胞术分...
【文章来源】：甘肃中医药大学甘肃省
【文章页数】：66 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
肿瘤微环境组成
图 2. 技术路线图Figure 2. Technique route2.1细胞培养2.1.1细胞复苏-80℃冰箱中取出 BMSCs 及 LLC 细胞，投入 37℃水浴箱中水浴摇晃，至冻存液完全融化，75%酒精擦拭后送入超净工作台中，将管内冻存液直接转移至已预先装有DMEM/F12 完全培养基（含 10%胎牛血清及 100 U/mL 青霉素+100 U/mL 链霉素双抗）的培养瓶中，做好相应标记，5% CO2、37℃饱和湿度孵箱中培养，待细胞贴壁后换液。2.1.2细胞换液及传代BMSCs 及 LLC 细胞于 5% CO2、37℃饱和湿度孵箱培养，每 2～3 d 换液。细胞汇合度约达 80%时，0.25% 胰蛋白酶对其消化传代。传代前先将 DMEM/F12 完全培养基（含 10%胎牛血清、100 U/mL 青霉素+100 U/mL 链霉素）加入新培养瓶中，孵箱中取
黄芪多糖对肺癌细胞共培养体系中 BMSCs 增殖规律及 TAFs 相关分子表达的影响对肺癌微环境中BMSCs形态学的影响显微镜下观察，如图 7~9 所示，共培养第 6 天，48 h、72 h 换液及不MSCs 细胞为梭形，形态均一，排列有序；肺癌 LLC 细胞为梭形或圆；Co-BMSCs 组细胞形态不规则，排列紊乱，可见团簇状生长；APS-C梭形，分布较均匀，偶见细长或团簇状细胞。
【参考文献】：
期刊论文
[1]CAFs与肺腺癌患者临床病理特征及肿瘤浸润免疫细胞的相关性研究[J]. 成佳楠,龚志华,朱波. 免疫学杂志. 2015(03)
[2]双氢青蒿素对肺癌细胞株H1299增殖与放疗增敏的影响[J]. 廖奎,王志令,彭志平,李海玉,李娟. 中国免疫学杂志. 2015(02)
[3]TGF-β1激活的p38MAPK在TGF-β1上调人卵巢癌细胞PAI-1表达中的作用[J]. 潘霄羽,王燕,黄高翔,卢建,曲伸. 中国病理生理杂志. 2015(02)
[4]miRNA138体外抑制C2C12细胞纤维化研究[J]. 薛鸣丰,龚遂良,戴加平,陈刚,胡隽宇. 上海交通大学学报(医学版). 2015(01)
[5]增殖细胞核抗原与p55PIK结合调控乳腺癌细胞MCF7增殖的研究[J]. 杨熹,李海杰,李国东,傅寅佳,罗学来,龚建平,胡俊波. 肿瘤防治研究. 2015(01)
[6]17-AAG阻滞HCT-15细胞周期并诱导其凋亡[J]. 赵学荣,王建平,肖丽君,许倩,赵恩宏,郑鑫,郑华川,赵爽. 中国病理生理杂志. 2015(01)
[7]靶向下调SGTA抑制肝细胞肝癌细胞周期及细胞增殖[J]. 陈昱延,刘国梁,魏郦娴,蒋大伟,沈天怡,徐文浩,倪润洲. 南通大学学报(医学版). 2015(01)
[8]MST-312对人肝癌HepG2细胞辐射敏感性影响研究[J]. 王亚丽,孙超,张昕,谢漪,杨立娜,刘圆圆,赵邱越,甘露,张红. 中华肿瘤防治杂志. 2015(01)
[9]地黄多糖对过表达Notch1（NICD）大鼠骨髓间充质干细胞诱导分化及增殖的影响[J]. 付海燕,胡占升,杜红阳,李潮,包翠芬. 山东大学学报(医学版). 2015(01)
[10]FTY720对乳腺癌MCF-7细胞增殖及Bax/Bcl-2基因表达的影响[J]. 张淑芳,方芳,李琼书,靳丹虹,台桂香. 中国老年学杂志. 2015(01)
博士论文
[1]骨髓间质干细胞在肿瘤进展和肿瘤微环境中的作用及机制[D]. 朱伟.江苏大学 2010
硕士论文
[1]黄芩苷对支气管哮喘的药效学及其对苦味受体作用机制研究[D]. 杨超.河北医科大学 2013
[2]α-SMA和FBN-1在风湿性二尖瓣病变中的表达及意义[D]. 吴俊涛.新乡医学院 2012
本文编号：3254848
【文章来源】：甘肃中医药大学甘肃省
【文章页数】：66 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
肿瘤微环境组成
图 2. 技术路线图Figure 2. Technique route2.1细胞培养2.1.1细胞复苏-80℃冰箱中取出 BMSCs 及 LLC 细胞，投入 37℃水浴箱中水浴摇晃，至冻存液完全融化，75%酒精擦拭后送入超净工作台中，将管内冻存液直接转移至已预先装有DMEM/F12 完全培养基（含 10%胎牛血清及 100 U/mL 青霉素+100 U/mL 链霉素双抗）的培养瓶中，做好相应标记，5% CO2、37℃饱和湿度孵箱中培养，待细胞贴壁后换液。2.1.2细胞换液及传代BMSCs 及 LLC 细胞于 5% CO2、37℃饱和湿度孵箱培养，每 2～3 d 换液。细胞汇合度约达 80%时，0.25% 胰蛋白酶对其消化传代。传代前先将 DMEM/F12 完全培养基（含 10%胎牛血清、100 U/mL 青霉素+100 U/mL 链霉素）加入新培养瓶中，孵箱中取
黄芪多糖对肺癌细胞共培养体系中 BMSCs 增殖规律及 TAFs 相关分子表达的影响对肺癌微环境中BMSCs形态学的影响显微镜下观察，如图 7~9 所示，共培养第 6 天，48 h、72 h 换液及不MSCs 细胞为梭形，形态均一，排列有序；肺癌 LLC 细胞为梭形或圆；Co-BMSCs 组细胞形态不规则，排列紊乱，可见团簇状生长；APS-C梭形，分布较均匀，偶见细长或团簇状细胞。
【参考文献】：
期刊论文
[1]CAFs与肺腺癌患者临床病理特征及肿瘤浸润免疫细胞的相关性研究[J]. 成佳楠,龚志华,朱波. 免疫学杂志. 2015(03)
[2]双氢青蒿素对肺癌细胞株H1299增殖与放疗增敏的影响[J]. 廖奎,王志令,彭志平,李海玉,李娟. 中国免疫学杂志. 2015(02)
[3]TGF-β1激活的p38MAPK在TGF-β1上调人卵巢癌细胞PAI-1表达中的作用[J]. 潘霄羽,王燕,黄高翔,卢建,曲伸. 中国病理生理杂志. 2015(02)
[4]miRNA138体外抑制C2C12细胞纤维化研究[J]. 薛鸣丰,龚遂良,戴加平,陈刚,胡隽宇. 上海交通大学学报(医学版). 2015(01)
[5]增殖细胞核抗原与p55PIK结合调控乳腺癌细胞MCF7增殖的研究[J]. 杨熹,李海杰,李国东,傅寅佳,罗学来,龚建平,胡俊波. 肿瘤防治研究. 2015(01)
[6]17-AAG阻滞HCT-15细胞周期并诱导其凋亡[J]. 赵学荣,王建平,肖丽君,许倩,赵恩宏,郑鑫,郑华川,赵爽. 中国病理生理杂志. 2015(01)
[7]靶向下调SGTA抑制肝细胞肝癌细胞周期及细胞增殖[J]. 陈昱延,刘国梁,魏郦娴,蒋大伟,沈天怡,徐文浩,倪润洲. 南通大学学报(医学版). 2015(01)
[8]MST-312对人肝癌HepG2细胞辐射敏感性影响研究[J]. 王亚丽,孙超,张昕,谢漪,杨立娜,刘圆圆,赵邱越,甘露,张红. 中华肿瘤防治杂志. 2015(01)
[9]地黄多糖对过表达Notch1（NICD）大鼠骨髓间充质干细胞诱导分化及增殖的影响[J]. 付海燕,胡占升,杜红阳,李潮,包翠芬. 山东大学学报(医学版). 2015(01)
[10]FTY720对乳腺癌MCF-7细胞增殖及Bax/Bcl-2基因表达的影响[J]. 张淑芳,方芳,李琼书,靳丹虹,台桂香. 中国老年学杂志. 2015(01)
博士论文
[1]骨髓间质干细胞在肿瘤进展和肿瘤微环境中的作用及机制[D]. 朱伟.江苏大学 2010
硕士论文
[1]黄芩苷对支气管哮喘的药效学及其对苦味受体作用机制研究[D]. 杨超.河北医科大学 2013
[2]α-SMA和FBN-1在风湿性二尖瓣病变中的表达及意义[D]. 吴俊涛.新乡医学院 2012
本文编号：3254848
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