RAD21促进乳腺癌增殖和转移的作用机制研究
发布时间：2021-08-20 22:58
研究背景:乳腺癌是世界范围内常见的女性恶性肿瘤之一,位居我国女性恶性肿瘤发病率首位,已成为女性健康的重大威胁。在乳腺癌的死亡病例中,约90%源于乳腺癌的转移。因此,鉴定驱动乳腺癌增殖和转移的关键分子网络将有助于我们深入理解乳腺癌发生发展的分子机制,为乳腺癌筛查和治疗靶点的选择提供科学依据。黏连蛋白（Cohesin）是一种进化上保守的多亚基复合物,能够维持姐妹染色单体黏附,参与同源重组DNA修复,调节基因组的稳定性。近年来发现Cohesin在多种癌症中表达失调。RAD21作为Cohesin的核心亚基,能够调节Cohesin与染色质的结合或解离。越来越多的研究证实RAD21基因可能是导致乳腺癌的驱动基因之一,Rad21既可以介导染色质高级结构形成,也可以作为转录辅因子参与调控MFC、CD44、HOXA 7和TGFB1等多个肿瘤相关的关键基因表达,进而促进肿瘤的发生、发展。作为Hippo信号通路重要的下游效应分子,转录共激活因子YAP（Yes-associated protein）在调控肿瘤细胞的增殖、转移和化疗耐药等方面具有重要作用。然而关于“YAP在乳腺癌发生中的作用”是富有争议的,既有...
【文章来源】：山东大学山东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：84 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１?Ｃｏｈｅｓｉｎ各亚基在ＴＣＧＡ浸润性乳腺癌中的表达情况??２．?ＲＡＤ２１患
ｏｎ（ｓ）?ｉｎ?Ｑｕｅｒｙ?Ｇｅｎｅ（ｓ）?１３７４?７６５?１６７．９３３３３３３??图２?ＲＡＤ２１商表达的乳腺癌患者预后差??３．?ＲＡＤ２１在乳腺癌组织中的表达情况??我们对收集到的８例乳腺癌患者肿瘤组织病理切片进行了?ＲＡＤ２１免疫组化??分析，初步结果表明ＲＡＤ２１在乳腺癌组织的细胞核中高表达，而在癌旁组织中??表达较低。??Ｐａｒａｃａｎｃｅｒｏｕｓ?ｔｉｓｓｕｅ?Ｂｒｅａｓｔ?ｃａｎｃｅｒ?ｔｉｓｓｕｅ??．??．ｖ．?．??，繼變??？－Ｍ??图３?ＲＡＤ２１在乳腺癌组织中高表达??４．?ＲＡＤ２１在乳腺癌细胞系中的表达情况??通过Ｗｅｓｔｅｒｎ?Ｂｌｏｔｔｉｎｇ我们检测了?Ｃｏｈｅｓｉｎ不同组分在多种的乳腺癌细胞中??的表达情况。如图４所示，Ｃｏｈｅｓｉｎ组分ＲＡＤ２１、ＳＴＡＧ２和ＳＭＣ１Ａ在乳腺癌细??４２??
－１０Ａ，其中ＲＡＤ２１在不同乳腺癌细??胞系中的变化最明显。与正常的乳腺细胞系ＭＣＦ－１０Ａ相比，ＲＡＤ２１在乳腺癌??细胞中的表达较高；与上皮样乳腺癌细胞系ＭＣＦ－７、Ｔ４７Ｄ相比，ＲＡＤ２１在三??阴性乳腺癌细胞ＭＤＡ－ＭＢ－２３１、ＭＤＡ－ＭＢ－４６８、ＢＴ５４９中表达较高。??＾?，??／?／?／?￡??—ｍｒｎｒｎｍ?ｍａｍ?ｍｔｍｍ?ＲＡＤ２１??細？＿？?ＳＴＡＧ２??？?—＾?■?一?－?一?ＳＭＣ１Ａ??ｒｎｔｍｍｍｍ?ａ－ｔｕｂｕｌｉｎ??图４?ＲＡＤ２１在正常乳腺细胞和乳腺癌细胞系中的表达情况??二．ＲＡＤ２１对乳腺癌细胞增殖能力的影响??１．利用ｓｉＲＮＡｓ探宄ＲＡＤ２１对细胞增殖能力的影响??１．１靶向／Ｌ４Ｄ２Ｊ基因的ｓｉＲＮＡｓ??根据Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ公司提供的革Ｅ向ＲＡＤ２１的ｓｉＲＮＡｓ小干扰序列，我们选??择了其中的?ＲＡＤ２１－５７９８、ＲＡＤ２１－５８０２、ＲＡＤ２１－５８０３?三个序列。在?ＭＤＡ－ＭＢ－??２３１细胞分别转染这三个小干扰序列，通过ＲＴ－ｑＰＣＲ对ＲＡＤ２１的干扰效果进行??了检测。我们发现ｓｉＲＡＤ２１－５８０３干扰效率最高，敲低效率约９８％。在ＭＤＡ－ＭＢ－??２３１和ＭＣＦ７细胞中的Ｗｅｓｔｅｒｎ?Ｂｌｏｔｔｉｎｇ实验同样证明了?ｓｉＲＡＤ２１－５８０３能有效抑??制兄４Ｄ２７基因的表达。在后续实验中我们都使用了该ｓｉＲＮＡ。??Ａ?＊…?Ｂ??｜?１５１???＇二??－?＋?－?＋?ｓｉ－ＲＡＤ２１??要?—?■?＊？？?？????—??Ｉ?圍?１０．??｜?ｇ?ｍｍｍ?ｍｍｍｍ?＾
【参考文献】：
期刊论文
[1]2015年中国恶性肿瘤流行情况分析[J]. 郑荣寿,孙可欣,张思维,曾红梅,邹小农,陈茹,顾秀瑛,魏文强,赫捷. 中华肿瘤杂志. 2019 (01)
[2]三阴性乳腺癌化疗进展[J]. 倪晨,李婷,吴振华,胡夕春. 中国癌症杂志. 2014(04)
[3]细胞自噬与肿瘤[J]. 李玲,徐小洁,叶棋浓. 中国生物化学与分子生物学报. 2013(11)
[4]细胞自噬与肿瘤发生的关系[J]. 王宠,张萍,朱卫国. 中国生物化学与分子生物学报. 2010(11)
[5]乳腺癌基因分型的研究进展[J]. 刘宁,冯子毅,韦伟,胡慧. 中国普通外科杂志. 2010(05)
本文编号：3354366
【文章来源】：山东大学山东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：84 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１?Ｃｏｈｅｓｉｎ各亚基在ＴＣＧＡ浸润性乳腺癌中的表达情况??２．?ＲＡＤ２１患
ｏｎ（ｓ）?ｉｎ?Ｑｕｅｒｙ?Ｇｅｎｅ（ｓ）?１３７４?７６５?１６７．９３３３３３３??图２?ＲＡＤ２１商表达的乳腺癌患者预后差??３．?ＲＡＤ２１在乳腺癌组织中的表达情况??我们对收集到的８例乳腺癌患者肿瘤组织病理切片进行了?ＲＡＤ２１免疫组化??分析，初步结果表明ＲＡＤ２１在乳腺癌组织的细胞核中高表达，而在癌旁组织中??表达较低。??Ｐａｒａｃａｎｃｅｒｏｕｓ?ｔｉｓｓｕｅ?Ｂｒｅａｓｔ?ｃａｎｃｅｒ?ｔｉｓｓｕｅ??．??．ｖ．?．??，繼變??？－Ｍ??图３?ＲＡＤ２１在乳腺癌组织中高表达??４．?ＲＡＤ２１在乳腺癌细胞系中的表达情况??通过Ｗｅｓｔｅｒｎ?Ｂｌｏｔｔｉｎｇ我们检测了?Ｃｏｈｅｓｉｎ不同组分在多种的乳腺癌细胞中??的表达情况。如图４所示，Ｃｏｈｅｓｉｎ组分ＲＡＤ２１、ＳＴＡＧ２和ＳＭＣ１Ａ在乳腺癌细??４２??
－１０Ａ，其中ＲＡＤ２１在不同乳腺癌细??胞系中的变化最明显。与正常的乳腺细胞系ＭＣＦ－１０Ａ相比，ＲＡＤ２１在乳腺癌??细胞中的表达较高；与上皮样乳腺癌细胞系ＭＣＦ－７、Ｔ４７Ｄ相比，ＲＡＤ２１在三??阴性乳腺癌细胞ＭＤＡ－ＭＢ－２３１、ＭＤＡ－ＭＢ－４６８、ＢＴ５４９中表达较高。??＾?，??／?／?／?￡??—ｍｒｎｒｎｍ?ｍａｍ?ｍｔｍｍ?ＲＡＤ２１??細？＿？?ＳＴＡＧ２??？?—＾?■?一?－?一?ＳＭＣ１Ａ??ｒｎｔｍｍｍｍ?ａ－ｔｕｂｕｌｉｎ??图４?ＲＡＤ２１在正常乳腺细胞和乳腺癌细胞系中的表达情况??二．ＲＡＤ２１对乳腺癌细胞增殖能力的影响??１．利用ｓｉＲＮＡｓ探宄ＲＡＤ２１对细胞增殖能力的影响??１．１靶向／Ｌ４Ｄ２Ｊ基因的ｓｉＲＮＡｓ??根据Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ公司提供的革Ｅ向ＲＡＤ２１的ｓｉＲＮＡｓ小干扰序列，我们选??择了其中的?ＲＡＤ２１－５７９８、ＲＡＤ２１－５８０２、ＲＡＤ２１－５８０３?三个序列。在?ＭＤＡ－ＭＢ－??２３１细胞分别转染这三个小干扰序列，通过ＲＴ－ｑＰＣＲ对ＲＡＤ２１的干扰效果进行??了检测。我们发现ｓｉＲＡＤ２１－５８０３干扰效率最高，敲低效率约９８％。在ＭＤＡ－ＭＢ－??２３１和ＭＣＦ７细胞中的Ｗｅｓｔｅｒｎ?Ｂｌｏｔｔｉｎｇ实验同样证明了?ｓｉＲＡＤ２１－５８０３能有效抑??制兄４Ｄ２７基因的表达。在后续实验中我们都使用了该ｓｉＲＮＡ。??Ａ?＊…?Ｂ??｜?１５１???＇二??－?＋?－?＋?ｓｉ－ＲＡＤ２１??要?—?■?＊？？?？????—??Ｉ?圍?１０．??｜?ｇ?ｍｍｍ?ｍｍｍｍ?＾
【参考文献】：
期刊论文
[1]2015年中国恶性肿瘤流行情况分析[J]. 郑荣寿,孙可欣,张思维,曾红梅,邹小农,陈茹,顾秀瑛,魏文强,赫捷. 中华肿瘤杂志. 2019 (01)
[2]三阴性乳腺癌化疗进展[J]. 倪晨,李婷,吴振华,胡夕春. 中国癌症杂志. 2014(04)
[3]细胞自噬与肿瘤[J]. 李玲,徐小洁,叶棋浓. 中国生物化学与分子生物学报. 2013(11)
[4]细胞自噬与肿瘤发生的关系[J]. 王宠,张萍,朱卫国. 中国生物化学与分子生物学报. 2010(11)
[5]乳腺癌基因分型的研究进展[J]. 刘宁,冯子毅,韦伟,胡慧. 中国普通外科杂志. 2010(05)
本文编号：3354366
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/zlx/3354366.html
