低强度超声对HeLa肿瘤细胞凋亡的诱导作用及其机制
发布时间：2021-09-01 15:02
目的探讨低强度超声在诱导HeLa肿瘤细胞凋亡中的作用及其机制。方法将体外培养的HeLa肿瘤细胞根据超声干预强度分为阴性对照组 （切断电源后给予假的超声干预）和0.5、1.3、2.0 W/cm2超声干预组,分别通过MTT实验测定细胞活力、存活率,HE染色检测细胞形态,细胞凋亡实验检测细胞凋亡率,流式细胞术测定ROS含量及Western blot 实验检测caspase-12、survivin和内参蛋白β-actin的表达情况。多组间比较采用单因素方差分析,各个实验组与对照组比较采用Dunnet-t检验。结果与阴性对照组比较,0.5、1.3、2.0 W/ cm2超声干预组的HeLa肿瘤细胞活力[（99.23±1.56）﹪比 （80.52±1.72）﹪、（54.31±1.69）﹪（27.75±1.26）﹪]、细胞存活率[（99.91±1.51）﹪比 （76.69±1.92）﹪、（52.57±1.63）﹪、（29.81±1.22）﹪]、survivin蛋白表达 （51.19±0.21比43.46±0.34、25.28±0.29、18.32±0.3）均...
【文章来源】：中华细胞与干细胞杂志(电子版). 2020,10(05)
【文章页数】：6 页
【部分图文】：
光学显微镜下观察超声干预对细胞形态的影响（苏木精-伊红染色，×40)
图1 光学显微镜下观察超声干预对细胞形态的影响（苏木精-伊红染色，×40)表2 不同超声强度干预对Hela肿瘤细胞中caspase-12蛋白和survivin蛋白表达水平的影响 分组 实验重复次数 ROS含量 caspase-12蛋白 survivin蛋白 阴性对照组 3 11.21±0.45 13.05±0.21 51.19±0.21 0.5 W/cm2超声干预组 3 24.34±1.23a 20.23±0.19a 43.46±0.34a 1.3 W/cm2超声干预组 3 38.26±2.47a 33.17±0.32a 25.28±0.29a 2.0 W/cm2超声干预组 3 52.18±1.56a 41.52±0.21a 18.32±0.31a F值 365.400 8634.002 8034.149 P值 ＜ 0.001 ＜ 0.001 ＜ 0.001注:与阴性对照组比较,aP < 0.05
表2 不同超声强度干预对Hela肿瘤细胞中caspase-12蛋白和survivin蛋白表达水平的影响 分组 实验重复次数 ROS含量 caspase-12蛋白 survivin蛋白 阴性对照组 3 11.21±0.45 13.05±0.21 51.19±0.21 0.5 W/cm2超声干预组 3 24.34±1.23a 20.23±0.19a 43.46±0.34a 1.3 W/cm2超声干预组 3 38.26±2.47a 33.17±0.32a 25.28±0.29a 2.0 W/cm2超声干预组 3 52.18±1.56a 41.52±0.21a 18.32±0.31a F值 365.400 8634.002 8034.149 P值 ＜ 0.001 ＜ 0.001 ＜ 0.001注:与阴性对照组比较,aP < 0.05有报道显示,caspase-12、survivin等与凋亡相关的蛋白在细胞凋亡中发生了巨大的作用[13-14]。caspase蛋白与细胞凋亡密切相关,并且参与了细胞的生长、分化和凋亡的调节,caspase家族成员有很多,其中caspase-1、caspase-4和caspase-11不直接参与凋亡信号的转导,它们主要是参与白介素前体的活化;而caspase-2,caspase-8,caspase-9和caspase-10在细胞凋亡的起始阶段起作用,参与细胞凋亡执行的则是caspase-3,caspase-6和caspase-7,其中caspase-3和7具有相近的底物和抑制剂特异性。前期研究表示,超声诱导细胞后,caspase-12蛋白的表达随着超声强度的增大而增加,使得caspase-12蛋白得以稳定表达,caspase-12蛋白的激活间接激活了caspase-3蛋白的表达,从而使细胞发生凋亡[15-16]。survivin是凋亡抑制剂家族的一员,是细胞增殖及细胞动力学等生理功能的调节因子。它不仅参与抑制细胞凋亡、血管生成和应激反应,而且参与组织稳态和细胞再生能力。survivin具有高度的组织特异性,在结肠直肠癌和溃疡性结肠炎中均有高表达,是一种良好的诊断标志物[17-18]。此前有多项研究表明,survivin通常在正常细胞中含量较低,但在许多实体癌和血癌中含量较高,survivin在癌症中的表达会增强,与肿瘤侵袭转移增加有关。survivin作为线粒体相关凋亡的上游调控因子,表达survivin的内皮细胞可降低caspase-7。由于survivin的特性,通常将其作为一种通过促进细胞凋亡来治疗癌症的方法[19-20]。
本文编号：3377188
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光学显微镜下观察超声干预对细胞形态的影响（苏木精-伊红染色，×40)
图1 光学显微镜下观察超声干预对细胞形态的影响（苏木精-伊红染色，×40)表2 不同超声强度干预对Hela肿瘤细胞中caspase-12蛋白和survivin蛋白表达水平的影响 分组 实验重复次数 ROS含量 caspase-12蛋白 survivin蛋白 阴性对照组 3 11.21±0.45 13.05±0.21 51.19±0.21 0.5 W/cm2超声干预组 3 24.34±1.23a 20.23±0.19a 43.46±0.34a 1.3 W/cm2超声干预组 3 38.26±2.47a 33.17±0.32a 25.28±0.29a 2.0 W/cm2超声干预组 3 52.18±1.56a 41.52±0.21a 18.32±0.31a F值 365.400 8634.002 8034.149 P值 ＜ 0.001 ＜ 0.001 ＜ 0.001注:与阴性对照组比较,aP < 0.05
表2 不同超声强度干预对Hela肿瘤细胞中caspase-12蛋白和survivin蛋白表达水平的影响 分组 实验重复次数 ROS含量 caspase-12蛋白 survivin蛋白 阴性对照组 3 11.21±0.45 13.05±0.21 51.19±0.21 0.5 W/cm2超声干预组 3 24.34±1.23a 20.23±0.19a 43.46±0.34a 1.3 W/cm2超声干预组 3 38.26±2.47a 33.17±0.32a 25.28±0.29a 2.0 W/cm2超声干预组 3 52.18±1.56a 41.52±0.21a 18.32±0.31a F值 365.400 8634.002 8034.149 P值 ＜ 0.001 ＜ 0.001 ＜ 0.001注:与阴性对照组比较,aP < 0.05有报道显示,caspase-12、survivin等与凋亡相关的蛋白在细胞凋亡中发生了巨大的作用[13-14]。caspase蛋白与细胞凋亡密切相关,并且参与了细胞的生长、分化和凋亡的调节,caspase家族成员有很多,其中caspase-1、caspase-4和caspase-11不直接参与凋亡信号的转导,它们主要是参与白介素前体的活化;而caspase-2,caspase-8,caspase-9和caspase-10在细胞凋亡的起始阶段起作用,参与细胞凋亡执行的则是caspase-3,caspase-6和caspase-7,其中caspase-3和7具有相近的底物和抑制剂特异性。前期研究表示,超声诱导细胞后,caspase-12蛋白的表达随着超声强度的增大而增加,使得caspase-12蛋白得以稳定表达,caspase-12蛋白的激活间接激活了caspase-3蛋白的表达,从而使细胞发生凋亡[15-16]。survivin是凋亡抑制剂家族的一员,是细胞增殖及细胞动力学等生理功能的调节因子。它不仅参与抑制细胞凋亡、血管生成和应激反应,而且参与组织稳态和细胞再生能力。survivin具有高度的组织特异性,在结肠直肠癌和溃疡性结肠炎中均有高表达,是一种良好的诊断标志物[17-18]。此前有多项研究表明,survivin通常在正常细胞中含量较低,但在许多实体癌和血癌中含量较高,survivin在癌症中的表达会增强,与肿瘤侵袭转移增加有关。survivin作为线粒体相关凋亡的上游调控因子,表达survivin的内皮细胞可降低caspase-7。由于survivin的特性,通常将其作为一种通过促进细胞凋亡来治疗癌症的方法[19-20]。
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