Musashi1基因表达对人结肠癌HCT116细胞放射增敏作用及其机制的实验研究

发布时间：2017-05-01 19:13

  本文关键词：Musashi1基因表达对人结肠癌HCT116细胞放射增敏作用及其机制的实验研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:本研究以人结肠癌HCT116细胞株为模型,运用RNA干扰技术,建立Musashi1(Msi1)稳定低表达的HCT116细胞株,并接受放射线外照射,研究沉默Msi1对人结肠癌HCT116细胞株放射敏感性的影响,并初步探讨其机制,为临床治疗提供理论依据。方法:1应用慢病毒载体,建立Msi1低表达的稳转细胞株(HCT116-Musashi1)及阴性对照组细胞株(HCT116-negative control)。2通过克隆实验,测定沉默Msi1基因对HCT116细胞的放射敏感性的作用。3采用MTS法检测,沉默组(Silence组)、空白组(Control组)、阴性对照组(NC组)细胞接受8Gy照射后的24h、48h、72h各组细胞的增殖活性及增殖抑制率。4采用流式细胞技术检测8Gy照射后的24h、48h、72h,沉默组(Silence组)、空白组(Control组)、阴性对照组(NC组)的细胞凋亡比例,以及12Gy照射后48h三组细胞周期分布的变化。结果:1通过克隆形成实验,根据单击多靶模型拟合出生存曲线,Silence组的细胞放射敏感性明显高于NC组和Control组,而NC组与Control组之间放射敏感性未见明显差异。2细胞增殖实验研究显示,与未照射组相比,8Gy剂量组中Silence组,NC组,Control组在照射后24h、48h、72h,细胞增殖速率均减低,但Silence组细胞在各时间点的增殖活性均明显低于NC组和Control组(P0.001),而NC组和Control组之间未见明显统计学差异(P0.05)。随着时间增加,各组增殖抑制率逐步增加(P0.001),呈现时间依赖性,而Silence组的抑制率始终高于另外两组(P0.05),NC组和Control组之间未见明显统计学差异(P0.05)。3细胞凋亡实验表明,8Gy照射后24h、48h、72h,Silence组凋亡比例始终高于NC组和Control组,差异有统计学意义(P0.001),而NC组和Control组之间未见明显统计学差异(P0.05),并且随着时间增加,三组细胞凋亡比例均增加(P0.001),其中Silence组在各时间点凋亡比例增加的程度始终高于另外两组。4细胞周期实验表明,12Gy照射后48h时,Silence组细胞周期中G_2/M期比例较Control组和NC组显著下降,差异有统计学意义(P0.001)。结论:1降低Musashi1的表达对结肠癌HCT116细胞具有放射增敏作用;2降低Musashi1的表达可能通过促进凋亡,解除G_2/M期阻滞,发挥放射增敏作用。
【关键词】：结肠癌 RNA干扰 Musashi1 放射敏感性 凋亡
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R735.35
【目录】：

• 中文摘要4-6
• ABSTRACT6-8
• 英文缩写8-9
• 前言9-11
• 材料与方法11-22
• 结果22-23
• 附图23-29
• 附表29-31
• 讨论31-35
• 结论35-36
• 参考文献36-41
• 综述 RNA结合蛋白Musashi1在结直肠癌中的研究进展41-52
• 参考文献47-52
• 致谢52-53
• 个人简历53

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前8条

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  本文关键词：Musashi1基因表达对人结肠癌HCT116细胞放射增敏作用及其机制的实验研究，由笔耕文化传播整理发布。

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本文编号：339502