脂质体纳米颗粒芯片技术检测的microRNA在胰腺癌诊断和预后中的作用

发布时间：2021-10-09 22:15

　　背景:由于缺乏可靠、灵敏的早期诊断生物标志物,多数胰腺癌（pancreatic cancer,PC）患者诊断时就处于不可切除状态而失去手术时机,这被认为是导致胰腺癌患者高死亡率的重要原因之一。目前越来越多的研究表明外泌体micro RNA（exosomal micro RNA,exmiR）对于恶性肿瘤的诊断及预后具有重要作用。相关文献及我们之前的研究表明,miR-21、miR-10b、miR-212-3p及miR-18a-5p在肿瘤中高表达,对于肿瘤的诊断及预后具有一定价值。目的:（1）分析比较exmiR-21、exmiR-10b、exmiR-212-3p及exmiR-18a-5p在不同分期胰腺癌组、健康对照组及胰腺良性疾病组血浆中的含量;（2）分析比较各exmiR单独及联合应用时在胰腺癌诊断中的价值,从中筛选出能用于胰腺癌诊断的exmiR。（3）分析比较exmiR表达水平与胰腺癌预后的关系,从中筛选出能够预测胰腺癌预后的exmiR。方法:（1）我们通过应用脂质体纳米颗粒（tethered cationic lipoplex nanoparticle,TCLN）芯片技术检测了不同分期的... 

【文章来源】：浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：60 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

TCLN生物芯片技术概述(WuY,KwakKJ,AgarwalK,etal.DetectionofextracellularRNAsincancerandviralinfectionviatetheredcationiclipoplexnanoparticlescontainingmolecularbeacons.AnalChem.2013;85(23):11265–11274.)

外泌体鉴定ABWestern-BlotC

浙江大学硕士学位论文正文结果14制备好的TCLN生物芯片包含具有识别exmiR-21，exmiR-10b，exmiR-212-3p和exmiR-18a-5p的分子信标。当血清作用于生物芯片时，分子信标可识别外泌体中的靶miRs，并通过TIRFM读取相互作用时的信号。下面（图3）选取了胰腺癌组和非胰腺癌组各4名受试者不同exmiRs的荧光强度分布图。可以直观地看出4种不同的exmiR在胰腺癌组的荧光强度要高于非胰腺癌组。图3全内反射荧光显微镜下各exmiR在不同组别中荧光强度分布3.4一组exmiRs表达水平分析基于之前的研究基础和对于大量文献的阅读，本研究选取并测量了一组人血浆外泌体microRNA,其中包含4种exmiRs，exmiR-21、exmiR-10b、exmiR-212-3p和exmiR-18a-5p。此次测量是基于TCLN生物芯片技术，测量了来自于36例健康人、36例胰腺癌患者及8例胰腺良性疾病患者的血浆样本。结果显示，与健康人相比，exmiR-21在胰腺癌患者（TNMⅠ-Ⅳ）中含量显著升高（p<0.0001）。TNM分期为Ⅰ期、Ⅱ期的胰腺癌患者以及Ⅲ期、Ⅳ期的患者相较于健康人exmiR-21的含量也显著升高（p=0.0115；p=0.0003）。相比之下，胰腺癌组和胰腺良性疾病组，胰腺良性疾病组和健康人组exmiR-21的含量无明显统计学差异（p=0.1280；p>0.9999）。胰腺癌组血浆exmiR-10b相较于健康人组显著升高（p=0.0025）。其中3.3荧光强度分布

【参考文献】：
期刊论文
[1]Stem cell-derived exosomes as a therapeutic tool for cardiovascular disease[J]. Etsu Suzuki,Daishi Fujita,Masao Takahashi,Shigeyoshi Oba,Hiroaki Nishimatsu.  World Journal of Stem Cells. 2016(09)
[2]Novel blood-based microRNA biomarker panel for early diagnosis of pancreatic cancer[J]. Ganepola AP Ganepola,John R Rutledge,Paritosh Suman,Anusak Yiengpruksawan,David H Chang.  World Journal of Gastrointestinal Oncology. 2014(01)



本文编号：3427097