MiR-23b-3p靶向调控EBF3影响食管癌生长的机制研究
发布时间：2021-11-14 04:52
研究背景食管癌（Esophageal Cancer）是消化道最常见的恶性肿瘤之一,其全球发病率和死亡率分别占第8位和第6位;主要有腺癌（Esophageal Adenocarcinoma,EAC）和鳞状细胞癌（Esophageal Squamous Cell Carcinoma,ESCC）两种病理组织类型。在我国,ESCC占到90%以上,手术+放化疗综合治疗后的5年生存率仍非常低。因此,深入阐明食管癌发生发展的分子机制,对早期诊断、发现新的治疗靶点,改善预后具有重要意义。MicroRNA（miRNAs）是一类真核生物内源性非编码小分子RNAs,能负性调控下游靶基因,参与多种肿瘤的发生发展。MiR-23b-3p在胃癌、结直肠癌、软骨肉瘤、甲状腺滤泡癌、乳腺癌、神经胶质瘤、急性髓系白血病等多种肿瘤中表达异常,是非小细胞肺癌的非侵入性预后标志物,与大肠癌耐药密切相关。但miR-23b-3p在食管癌中的表达与作用机制未见报道。研究目的探讨miR-23b-3p及其靶基因早期B细胞因子3（early B-cellfactor 3,EBF3）在食管癌发生发展中的作用及其相关机制。研究方法1.实时荧光...
【文章来源】：南方医科大学广东省
【文章页数】：117 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１－２ＭＴＴ法检测细胞增殖
Ａ?Ｂ??图１－２ＭＴＴ法检测细胞增殖。ＴＥ１?（Ａ图）和ＴＥ１０?（Ｂ图）细胞株转染ａｎｔｉ－ｍｉＲ－ＮＣ??和ａｎｔｉ－ｍｉＲ－２３ｂ－３ｐ后在第２４ｈ，４８ｈ，?７２ｈ检测细胞增殖情况（与对照组相比，＊Ｐ＜０．０５，??＊＊Ｐ＜０．０１）??Ｆｉｇｕｒｅｌ－２?ＭＴＴ?ａｓｓａｙ?ｗａｓ?ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ?ｆｏｒ?ｃｅｌｌ?ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ．?ＴＥ１?（ＦｉｇｕｒｅＡ）?ａｎｄ?ＴＥ１０??（ＦｉｇｕｒｅＢ）?ｃｅｌｌｓ?ｔｒａｎｓｆｅｃｔｅｄ?ｗｉｔｈ?ａｎｔｉ－ｍｉＲ－ＮＣ?ｏｒ?ａｎｔｉ－ｍｉＲ－２３ｂ－３ｐ?ｗｅｒｅ?ｈａｒｖｅｓｔｅｄ?ａｎｄ?ｃｏｕｎｔｅｄ??ａｆｔｅｒ?２４ｈ，?４８ｈ．?７２ｈ?（Ｃｏｍｐａｒｅｄ?ｗｉｔｈ?ｔｈｅ?ｃｏｎｔｒｏｌ?ｇｒｏｕｐ，?＊Ｐ?＜?０．０５，?＊＊Ｐ?＜?０．０１）??３．１．３下调ｍｉＲ－２３ｂ－３ｐ表达能抑制ＥＳＣＣ细胞侵袭和转移??ＭＴＴ实验证实抑制ｍｉＲ－２３ｂ－３ｐ表达能显著抑制ＥＳＣＣ细胞增殖，那么??ｍｉＲ－２３ｂ－３ｐ能影响ＥＳＣＣ细胞的体外侵袭和迁移能力吗？?Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ实验结果显??示，在转染ｍｉＲ－２３ｂ－３ｐ抑制剂后，ＴＥ１和ＴＥ１０细胞株中发生侵袭和迁移的细??胞数量明显少于转染ａｎｔｉ－ｍｉＲ－ＮＣ的对照组，差异具有统计学意义（图１－３?Ａ、??Ｂ，图１－４?Ａ、Ｂ），说明肿瘤细胞的侵袭转移能力受到了抑制。结合ＭＴＴ实验??结果
?ＴＥ１０??Ｂ??图１－３下调ｍｉＲ－２３ｂ－３ｐ表达对细胞侵袭能力的影响。ＴＥ１和ＴＥ１０细胞株转染??ａｎｔｉ－ｍｉＲ－ＮＣ和ａｎｔｉ－ｍｉＲ－２３ｂ－３ｐ?２４ｈ后，进行Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ小室侵袭实验。随机挑选５个视野，??放大１００倍进行观察，并对发生侵袭转移的细胞进行计数。Ａ图所示为镜下观，Ｂ图所示??为发生侵袭转移的细胞计数（与对照组相比，叩＜０．０５，?＊＊Ｐ＜?０．０１）??Ｆｉｇｕｒｅｌ－３?Ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?ｄｏｗｎ－ｒｅｇｕｌａｔｅｄ?ｍｉＲ－２３ｂ－３ｐ?ｏｎ?ｃｅｌｌ?ｉｎｖａｓｉｏｎ．?Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ?ｉｎｖａｓｉｏｎ?ａｓｓａｙ??ｗａｓ?ｃａｒｒｉｅｄ?ｏｕｔ?ｉｎ?ＥＳＣＣ?ｃｅｌｌ?ｌｉｎｅｓ?ｔｒａｎｓｆｅｃｔｅｄ?ｗｉｔｈ?ａｎｔｉ－ｍｉＲ－ＮＣ?ａｎｄ?ａｎｔｉ－ｉｎｉＲ－２３ｂ－３ｐ．?Ｃｅｌｌｓ?ｉｎ??ｆｉｖｅ?ｒａｎｄｏｍ?ｆｉｅｌｄｓ?ｏｆ?ｖｉｅｗ?ａｔ?１０〇ｘ?ｍａｇｎｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｗｅｒｅ?ｏｂｓｅｒｖｅｄ?ａｎｄ?ｔｈｅ?ｍｉｇｒａｔｅｄ?ｃｅｌｌｓ?ｗｅｒｅ??ｃｏｕｎｔｅｄ．?（Ｃｏｍｐａｒｅｄ?ｗｉｔｈ?ｔｈｅ?ｃｏｎｔｒｏｌ?ｇｒｏｕｐ，?＊Ｐ＜０．０５，?＊＊Ｐ?＜０．０１）??１４??
【参考文献】：
期刊论文
[1]Genomic characterization of esophageal squamous cell carcinoma: Insights from next-generation sequencing[J]. Yasushi Sasaki,Miyuki Tamura,Ryota Koyama,Takafumi Nakagaki,Yasushi Adachi,Takashi Tokino. World Journal of Gastroenterology. 2016(07)
[2]微小RNA-21通过调控上皮-间充质转化对胆管癌细胞侵袭与转移的影响[J]. 刘振,黄强,刘臣海,林先盛,谢放,朱成林,邵峰. 中华实验外科杂志. 2014 (11)
[3]唾液与血浆微小RNA-21对早期食管癌的诊断价值[J]. 叶敏华,叶鹏辉,张伟珠,饶珈琦,谢子钧. 南方医科大学学报. 2014(06)
[4]唾液中miRNA-144可作为早期诊断食道癌的基因标志物[J]. 吴伟东,侯文进,吴哲凡,王跃军,易永盛,林苇嘉. 南方医科大学学报. 2013(12)
[5]肺癌A549细胞上皮-间质转化及其对微小RNA表达的影响[J]. 王海兵,张慧君,苏晋梅,周文勇,王和勇,陈晓峰. 中华肿瘤杂志. 2011 (08)
[6]MicroRNAs, development of Barrett’s esophagus, and progression to esophageal adenocarcinoma[J]. Cameron M Smith,David I Watson,Michael Z Michael,Damian J Hussey. World Journal of Gastroenterology. 2010(05)
[7]早期B细胞因子3在肝癌中的表达及对HepG2细胞株作用的研究[J]. 王跃国,鞠少卿,王惠民. 中华微生物学和免疫学杂志. 2009 (09)
本文编号：3493998
【文章来源】：南方医科大学广东省
【文章页数】：117 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１－２ＭＴＴ法检测细胞增殖
Ａ?Ｂ??图１－２ＭＴＴ法检测细胞增殖。ＴＥ１?（Ａ图）和ＴＥ１０?（Ｂ图）细胞株转染ａｎｔｉ－ｍｉＲ－ＮＣ??和ａｎｔｉ－ｍｉＲ－２３ｂ－３ｐ后在第２４ｈ，４８ｈ，?７２ｈ检测细胞增殖情况（与对照组相比，＊Ｐ＜０．０５，??＊＊Ｐ＜０．０１）??Ｆｉｇｕｒｅｌ－２?ＭＴＴ?ａｓｓａｙ?ｗａｓ?ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ?ｆｏｒ?ｃｅｌｌ?ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ．?ＴＥ１?（ＦｉｇｕｒｅＡ）?ａｎｄ?ＴＥ１０??（ＦｉｇｕｒｅＢ）?ｃｅｌｌｓ?ｔｒａｎｓｆｅｃｔｅｄ?ｗｉｔｈ?ａｎｔｉ－ｍｉＲ－ＮＣ?ｏｒ?ａｎｔｉ－ｍｉＲ－２３ｂ－３ｐ?ｗｅｒｅ?ｈａｒｖｅｓｔｅｄ?ａｎｄ?ｃｏｕｎｔｅｄ??ａｆｔｅｒ?２４ｈ，?４８ｈ．?７２ｈ?（Ｃｏｍｐａｒｅｄ?ｗｉｔｈ?ｔｈｅ?ｃｏｎｔｒｏｌ?ｇｒｏｕｐ，?＊Ｐ?＜?０．０５，?＊＊Ｐ?＜?０．０１）??３．１．３下调ｍｉＲ－２３ｂ－３ｐ表达能抑制ＥＳＣＣ细胞侵袭和转移??ＭＴＴ实验证实抑制ｍｉＲ－２３ｂ－３ｐ表达能显著抑制ＥＳＣＣ细胞增殖，那么??ｍｉＲ－２３ｂ－３ｐ能影响ＥＳＣＣ细胞的体外侵袭和迁移能力吗？?Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ实验结果显??示，在转染ｍｉＲ－２３ｂ－３ｐ抑制剂后，ＴＥ１和ＴＥ１０细胞株中发生侵袭和迁移的细??胞数量明显少于转染ａｎｔｉ－ｍｉＲ－ＮＣ的对照组，差异具有统计学意义（图１－３?Ａ、??Ｂ，图１－４?Ａ、Ｂ），说明肿瘤细胞的侵袭转移能力受到了抑制。结合ＭＴＴ实验??结果
?ＴＥ１０??Ｂ??图１－３下调ｍｉＲ－２３ｂ－３ｐ表达对细胞侵袭能力的影响。ＴＥ１和ＴＥ１０细胞株转染??ａｎｔｉ－ｍｉＲ－ＮＣ和ａｎｔｉ－ｍｉＲ－２３ｂ－３ｐ?２４ｈ后，进行Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ小室侵袭实验。随机挑选５个视野，??放大１００倍进行观察，并对发生侵袭转移的细胞进行计数。Ａ图所示为镜下观，Ｂ图所示??为发生侵袭转移的细胞计数（与对照组相比，叩＜０．０５，?＊＊Ｐ＜?０．０１）??Ｆｉｇｕｒｅｌ－３?Ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?ｄｏｗｎ－ｒｅｇｕｌａｔｅｄ?ｍｉＲ－２３ｂ－３ｐ?ｏｎ?ｃｅｌｌ?ｉｎｖａｓｉｏｎ．?Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ?ｉｎｖａｓｉｏｎ?ａｓｓａｙ??ｗａｓ?ｃａｒｒｉｅｄ?ｏｕｔ?ｉｎ?ＥＳＣＣ?ｃｅｌｌ?ｌｉｎｅｓ?ｔｒａｎｓｆｅｃｔｅｄ?ｗｉｔｈ?ａｎｔｉ－ｍｉＲ－ＮＣ?ａｎｄ?ａｎｔｉ－ｉｎｉＲ－２３ｂ－３ｐ．?Ｃｅｌｌｓ?ｉｎ??ｆｉｖｅ?ｒａｎｄｏｍ?ｆｉｅｌｄｓ?ｏｆ?ｖｉｅｗ?ａｔ?１０〇ｘ?ｍａｇｎｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｗｅｒｅ?ｏｂｓｅｒｖｅｄ?ａｎｄ?ｔｈｅ?ｍｉｇｒａｔｅｄ?ｃｅｌｌｓ?ｗｅｒｅ??ｃｏｕｎｔｅｄ．?（Ｃｏｍｐａｒｅｄ?ｗｉｔｈ?ｔｈｅ?ｃｏｎｔｒｏｌ?ｇｒｏｕｐ，?＊Ｐ＜０．０５，?＊＊Ｐ?＜０．０１）??１４??
【参考文献】：
期刊论文
[1]Genomic characterization of esophageal squamous cell carcinoma: Insights from next-generation sequencing[J]. Yasushi Sasaki,Miyuki Tamura,Ryota Koyama,Takafumi Nakagaki,Yasushi Adachi,Takashi Tokino. World Journal of Gastroenterology. 2016(07)
[2]微小RNA-21通过调控上皮-间充质转化对胆管癌细胞侵袭与转移的影响[J]. 刘振,黄强,刘臣海,林先盛,谢放,朱成林,邵峰. 中华实验外科杂志. 2014 (11)
[3]唾液与血浆微小RNA-21对早期食管癌的诊断价值[J]. 叶敏华,叶鹏辉,张伟珠,饶珈琦,谢子钧. 南方医科大学学报. 2014(06)
[4]唾液中miRNA-144可作为早期诊断食道癌的基因标志物[J]. 吴伟东,侯文进,吴哲凡,王跃军,易永盛,林苇嘉. 南方医科大学学报. 2013(12)
[5]肺癌A549细胞上皮-间质转化及其对微小RNA表达的影响[J]. 王海兵,张慧君,苏晋梅,周文勇,王和勇,陈晓峰. 中华肿瘤杂志. 2011 (08)
[6]MicroRNAs, development of Barrett’s esophagus, and progression to esophageal adenocarcinoma[J]. Cameron M Smith,David I Watson,Michael Z Michael,Damian J Hussey. World Journal of Gastroenterology. 2010(05)
[7]早期B细胞因子3在肝癌中的表达及对HepG2细胞株作用的研究[J]. 王跃国,鞠少卿,王惠民. 中华微生物学和免疫学杂志. 2009 (09)
本文编号：3493998
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