eEF1A1低表达对肝癌细胞凋亡、增殖与迁移的影响及eEF1A1/A2与ANXA7间的相互作用

发布时间：2021-11-19 08:50

　　[目的]研究shRNA抑制eEF1A1表达对肝癌Hca-P细胞凋亡、增殖、迁移的影响,并通过分别下调eEF1A1和ANXA7的表达,探讨肝癌Hca-P细胞中eEF1A1、eEF1A2与ANXA7表达的相关性及潜在的相互作用。[方法]构建靶向eEF1A1基因的shRNA质粒表达载体,瞬时转染至小鼠肝癌Hca-P细胞中,设无处理组（CON）、eEF1A1-shRNA组（eEF1A1-shRNA）、转染pGPU/GFP/Neo-NC的阴性对照组（NC）三组细胞进行实验。采用实时荧光定量PCR和Westernblot技术检测eEF1A1的抑制效果,并分别检测各组eEF1A2、ANXA7在mRNA和蛋白水平的表达。CCK-8法、流式细胞仪、Transwell小室分别检测对细胞增殖、凋亡、迁移的影响。此外,复苏已稳定低表达ANXA7的Hca-P细胞,通过实时荧光定量PCR和Westernblot技术检测无处理组（CON）、ANXA7-shRNA转染组（ANXA7-shRNA）、阴性对照组（NC）三组Hca-P细胞中eEF1A1、eEF1A2在mRNA和蛋白水平的表达。[结果]eEF1A1靶向shR... 

【文章来源】：肿瘤学杂志. 2018,24(08)

【文章页数】：9 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 一般材料
    1.2 方法
        1.2.1 sh RNA合成
        1.2.2 细胞培养及转染
        1.2.3 实时荧光定量PCR检测m RNA表达
        1.2.4 Western Blot检测蛋白表达
        1.2.5 流式细胞仪检测细胞凋亡
        1.2.6 CCK8法检测细胞增殖
        1.2.7 Transwell小室检测细胞迁移能力
    1.3 统计学处理
2 结果
    2.1 转染p GPU6/GFP/Neo-e EF1A1-sh RNA和p G-PU/GFP/Neo-NC的效率鉴定
    2.2 e EF1A1-sh RNA对肝癌Hca-P细胞e EF1A1表达的影响
    2.3 下调肝癌Hca-P细胞e EF1A1的表达对e EF1A2与ANXA7表达的影响
    2.4 下调肝癌Hca-P细胞ANXA7的表达对e EF1A1、e EF1A2表达的影响
    2.5 下调e EF1A1的表达诱导肝癌Hca-P细胞凋亡
    2.6 下调e EF1A1的表达抑制肝癌Hca-P细胞增殖
    2.7 下调e EF1A1的表达抑制肝癌Hca-P细胞迁移
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]Eukaryotic elongation factor-1α 2 knockdown inhibits hepatocarcinogenesis by suppressing PI3K/Akt/NF-κB signaling[J]. Fu-Nan Qiu,Yi Huang,Dun-Yan Chen,Feng Li,Yan-An Wu,Wen-Bing Wu,Xiao-Li Huang.  World Journal of Gastroenterology. 2016(16)
[2]siRNA抑制真核翻译延长因子1A1表达对结肠癌细胞凋亡和药物敏感性的影响[J]. 苏启表,韦桂宁,刘洪俊,李辰生,廖丽贞,赵杰,李国标,李卫东.  中国临床药理学杂志. 2015(17)
[3]膜联蛋白A7表达抑制对HepG-2细胞中galectin-3及PKC表达的影响[J]. 田焕娜,王小杰,梁秀军,陈龙,刘兰芳,李欣.  中国组织化学与细胞化学杂志. 2015(02)
[4]RNA干扰真核翻译延长因子1A1抑制肝癌Hep3B细胞的增殖[J]. 晏琛,刘秀霞,戈进,温崇煜,余新,邵江华.  肿瘤. 2014(11)
[5]膜联蛋白A7低表达对人肝癌HepG2细胞增殖的影响[J]. 王小杰,李欣.  解剖学报. 2013 (05)
[6]eEF1A1回复表达对敲除eEF1A1基因的Jurkat细胞增殖、凋亡的影响及机制研究[J]. 黄毅,胡建达,伍严安,郑静,齐元麟,陈英玉,黄肖利.  中国实验血液学杂志. 2013(02)
[7]采用定量蛋白质组学技术筛选小鼠肝癌淋巴道转移相关蛋白[J]. 孙成荣,唐建武,孙明忠,刘淑清,张宏颖,王波,宋波,张亚楠,张竹清,赵志英.  生物化学与生物物理进展. 2007(08)



本文编号：3504703