MAEL在癌症中的作用及其分子机制

发布时间：2021-12-17 08:13

　　研究背景:癌-睾丸抗原基因（cancer-testis antigen gene）,又名癌-生殖系基因（cancer-germlinegene）,是一类可在多种肿瘤组织中表达,而在睾丸组织和卵巢组织的生殖系细胞以外的其它正常组织和细胞中几乎不表达的基因。MAEL基因最先是从P转座子诱导产生的雌性不育果蝇突变体Maelstrom中克隆的[1],因而被命名为Maelstrom（简称为MAEL）。以往有关MAEL基因的研究都局限于其在生殖细胞中的功能分析,本研究室于2010年首次报道MAEL基因是一个癌-睾丸抗原基因。随后,其他研究者报道了MAEL在肝癌、结肠癌和膀胱癌中的作用和分子机制。然而,MAEL在乳腺癌和胃癌的作用及其分子机制还不清楚。研究目的:本研究目的是系统探讨AEL基因在乳腺癌和胃癌中的作用及其分子机制,为这两类癌症的治疗、诊断和预后判断提供新的理论依据和潜在的治疗靶点。研究方法:采用免疫组织化学分析、Western blot和Realtime PCR技术检测在乳腺癌、胃癌等癌组织和细胞系中MAEL基因表达水平。采用生物信息学软件分析癌症数据库中转录组、基因组和临床资料数据,用... 

【文章来源】：湖南师范大学湖南省 211工程院校

【文章页数】：102 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图２－２免疫组化分析结果

挑选阳性单克隆从而得到稳定过表达的■说稳定细胞株。ＭＴＴ细胞增殖实??验以及克隆形成实验结果表明，在正常乳腺细胞系ＨＢＬ－１００中过表达侧况基因，??促进细胞增殖（图２－３Ａ）和增强细胞克隆形成能力（图２－３Ｂ）。??〇：；：?＿?＾纖顯顯??ｍ：；ｊ．ｕ?，－＿Ｌ?參鲁＿？??Ｃｏｎｔｒｏｌ?ＭＡＥＬ?Ｉ??图２－３在正常乳腺细胞株ＨＢＬ－１００中过表达ＭＡＥＬ基因促进细胞增殖和克隆形成??（Ａ）过表达ＭＡＥＬ对细胞增殖能力的影响；（Ｂ）过表达ＭＡＥＬ对细胞克隆形成能力的影??响；Ｃｏｎｔｒｏｌ：对照病毒，ＭＡＥＬ：ＭＡＥＬ过表达病毒。??２．?３．?３似没基因敲入小鼠模型的构建??２．?３．?３．?１?Ｒｏｓａ２６位点Ｌｏｘｐ－你￡＾？基因ｋｎｏｃｋ－ｉｎ小鼠打革巴载体构建??从质粒中获得Ｍｙｃ－趟况基因片段，将Ｍｙｃ－淑况ｃＤＮＡ经Ｎｏｔｌｌ?＆?Ｓａｉｌ酶切??克隆至Ｇａｔｅ?（ｎｅｏ）质粒的Ｎｏｔｌｌ?＆?Ｓａｉｌ位点，获得Ｇａｔｅ－ｙＭ￡Ｚ质粒，质粒经??测序验证后，用该质粒和Ｒｏｓａ－ＤＥＳＴ，通过ＬＲ重组方式，获得打靶载体??Ｒｏｓａ－Ｍｙｃ－ＭＡＥＬ质粒（图２－４Ａ），载体序列位置（表２－１）．用Ｘｈｏ?Ｉ线性化后用于??ＥＳ细胞打靶（图２－４Ｂ），打靶策略（图２－５）。??＿?２０??

?ＰＧＫ－ｎｅｏ－ｐｏｌｙＡ?ＤＴＡ??图２－５?Ｍｙｃ－ＭＥＬ基因ｋｎｏｃｋｉｎ的打靶策略，重组同源臂长度分别是１０８７ｂｐ和４２５９ｂｐ??表２－１?Ｍｙｃ－Ｍａｅｌ基因的打祀载体序列位置??Ｒｏｓａ２６－Ｍｙｃ－Ｍａｅｌ?（１４５７２ｂｐ）??ｓｔａｒｔ?ｅｎｄ?ｎａｍｅ／ｄｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎ??３?１０８９?５，ａｒｍ?（１０８７）??１２７２?３９７１?Ｌｏ


本文编号：3539726