Ⅲ期胃癌CEA、CK19的检测及临床意义
发布时间：2021-12-22 14:51
研究目的:通过多种方法检测Ⅲ期胃癌患者血清及腹腔冲洗液中CEA及CK19的阳性表达情况,利用相关统计学分析,以寻找能够提高腹腔脱落癌细胞阳性检出率的方法。材料和方法:选择吉林大学第一医院胃结直肠外科2015年10月至2016年10月期间经术后病理确诊为Ⅲ期的腹腔镜胃癌根治性手术患者112例为实验组,选取胃溃疡或胃良性肿瘤的患者25例为对照组。收集患者术前血清CEA、CK19等指标;收集第1次（对照组及实验组术前,如原有腹水则直接吸出）、第2次（实验组关腹前）腹腔冲洗液,每次约300-500ml。其中第1次所取腹腔冲洗液约200ml行qRT-PCR检测CEAmRNA及CK19mRNA表达情况,剩余采集的腹腔冲洗液用作传统脱落细胞学、肿瘤标志物及免疫组化等方法的检测;第2次所取全部腹腔冲洗液行qRT-PCR方法的检测。收集患者手术标本病理信息等。结果:本研究中对照组25例非胃癌患者传统脱落细胞学检查结果均为阴性,腹腔冲洗液CEA免疫组化检查结果阳性率为12%（3/25）;实验组112例胃癌患者第1次腹腔冲洗液传统脱落细胞学检查阳性率为14.29%（16/112）,CEA免疫组化阳性率42....
【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：50 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
RNA电泳-质量鉴定
Human CEACAM5-F TTTCTCCCTATGTGGTCGCTCCAGHuman CEACAM5-R AGCAGATTTTTATTGAACTTGTGCHuman KRT19-F GCTGAGCATGAAAGCTGCCTHuman KRT19-R CCTGATTCTGCCGCTCACTA3.4.5.5.2 引物的灵敏性及特异性验证（1）选取 AGS 胃癌细胞株作为阳性对照，GAPDH 作为内参基因，并设置 NTC（ddH2O为模板）阴性对照。（2）根据扩增产物的扩增曲线、CT 值、熔解曲线分析扩增效率，对反应条件进行优化，优化退火温度和时间，优化变性与预变性条件，优化延伸时间，确定荧光采集的时间。（3）扩增曲线分析，如扩增动力曲线呈 S 型，且有明显的指数扩增期，有平台期，表明待检基因获得满意的扩增。
图 3.3 熔解曲线（5）电泳鉴定分析，如溶胶上无杂带，清晰透亮。则也进一步证明产物特异性较好。图 3.4 PCR 产物电泳鉴定3.4.5.5.3 待测样本的 qRT-PCR 过程，构建 20ul 反应体系，将模板、引物等
【参考文献】：
期刊论文
[1]CK20、CEA免疫组化检测淋巴结微转移对胃癌病理分期的影响[J]. 张涌泉,苏赓,丛峰云. 医学临床研究. 2015 (08)
[2]胃癌腹膜转移临床诊疗的新进展[J]. 倪震天,刘文韬,杨秋蒙,燕敏,朱正纲. 世界华人消化杂志. 2015(18)
[3]细胞减灭术加腹腔热灌注化疗治疗腹膜表面肿瘤的专家共识[J]. 李雁,周云峰,梁寒,王华庆,郝继辉,朱正纲,万德森,钦伦秀,崔书中,季加孚,徐惠绵,魏少忠,许洪斌,锁涛,杨树军,谢丛华,杨肖军,杨国樑. 中国肿瘤临床. 2015(04)
[4]胃癌:诊断和治疗方案的选择[J]. John C.Layke,Peter P.Lopez,本刊编辑部. 中国全科医学. 2015(03)
[5]2002～2011年中国恶性肿瘤死亡率水平及变化趋势[J]. 贾士杰,范慧敏,刘伟,谢敏,林路平,艾香英,罗纯,高倩. 中国肿瘤. 2014(12)
[6]我国胃癌防治研究三十年回顾[J]. 季加孚. 中国肿瘤临床. 2013(22)
[7]肿瘤细胞减灭术联合腹腔热灌注化疗治疗结直肠癌腹膜转移癌[J]. 崔书中,王佳泓,张相良. 中国肿瘤临床. 2012(22)
[8]Malignant ascites: A review of prognostic factors, pathophysiology and therapeutic measures[J]. Suma L Sangisetty,Thomas J Miner. World Journal of Gastrointestinal Surgery. 2012(04)
[9]胃癌转移规律研究新进展[J]. 徐惠绵,徐岩. 中国实用外科杂志. 2011(08)
[10]多排CT对胃癌腹膜转移术前预测的单中心大宗病例研究[J]. 严超,朱正纲,燕敏,陈克敏,陈军,项明,陈明敏,刘炳亚,尹浩然,林言箴. 中华胃肠外科杂志. 2010 (02)
硕士论文
[1]胃癌腹腔脱落细胞的研究[D]. 王伟.吉林大学 2016
[2]进展期胃癌腹腔镜根治手术的临床资料回顾分析[D]. 李守震.吉林大学 2014
本文编号：3546580
【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：50 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
RNA电泳-质量鉴定
Human CEACAM5-F TTTCTCCCTATGTGGTCGCTCCAGHuman CEACAM5-R AGCAGATTTTTATTGAACTTGTGCHuman KRT19-F GCTGAGCATGAAAGCTGCCTHuman KRT19-R CCTGATTCTGCCGCTCACTA3.4.5.5.2 引物的灵敏性及特异性验证（1）选取 AGS 胃癌细胞株作为阳性对照，GAPDH 作为内参基因，并设置 NTC（ddH2O为模板）阴性对照。（2）根据扩增产物的扩增曲线、CT 值、熔解曲线分析扩增效率，对反应条件进行优化，优化退火温度和时间，优化变性与预变性条件，优化延伸时间，确定荧光采集的时间。（3）扩增曲线分析，如扩增动力曲线呈 S 型，且有明显的指数扩增期，有平台期，表明待检基因获得满意的扩增。
图 3.3 熔解曲线（5）电泳鉴定分析，如溶胶上无杂带，清晰透亮。则也进一步证明产物特异性较好。图 3.4 PCR 产物电泳鉴定3.4.5.5.3 待测样本的 qRT-PCR 过程，构建 20ul 反应体系，将模板、引物等
【参考文献】：
期刊论文
[1]CK20、CEA免疫组化检测淋巴结微转移对胃癌病理分期的影响[J]. 张涌泉,苏赓,丛峰云. 医学临床研究. 2015 (08)
[2]胃癌腹膜转移临床诊疗的新进展[J]. 倪震天,刘文韬,杨秋蒙,燕敏,朱正纲. 世界华人消化杂志. 2015(18)
[3]细胞减灭术加腹腔热灌注化疗治疗腹膜表面肿瘤的专家共识[J]. 李雁,周云峰,梁寒,王华庆,郝继辉,朱正纲,万德森,钦伦秀,崔书中,季加孚,徐惠绵,魏少忠,许洪斌,锁涛,杨树军,谢丛华,杨肖军,杨国樑. 中国肿瘤临床. 2015(04)
[4]胃癌:诊断和治疗方案的选择[J]. John C.Layke,Peter P.Lopez,本刊编辑部. 中国全科医学. 2015(03)
[5]2002～2011年中国恶性肿瘤死亡率水平及变化趋势[J]. 贾士杰,范慧敏,刘伟,谢敏,林路平,艾香英,罗纯,高倩. 中国肿瘤. 2014(12)
[6]我国胃癌防治研究三十年回顾[J]. 季加孚. 中国肿瘤临床. 2013(22)
[7]肿瘤细胞减灭术联合腹腔热灌注化疗治疗结直肠癌腹膜转移癌[J]. 崔书中,王佳泓,张相良. 中国肿瘤临床. 2012(22)
[8]Malignant ascites: A review of prognostic factors, pathophysiology and therapeutic measures[J]. Suma L Sangisetty,Thomas J Miner. World Journal of Gastrointestinal Surgery. 2012(04)
[9]胃癌转移规律研究新进展[J]. 徐惠绵,徐岩. 中国实用外科杂志. 2011(08)
[10]多排CT对胃癌腹膜转移术前预测的单中心大宗病例研究[J]. 严超,朱正纲,燕敏,陈克敏,陈军,项明,陈明敏,刘炳亚,尹浩然,林言箴. 中华胃肠外科杂志. 2010 (02)
硕士论文
[1]胃癌腹腔脱落细胞的研究[D]. 王伟.吉林大学 2016
[2]进展期胃癌腹腔镜根治手术的临床资料回顾分析[D]. 李守震.吉林大学 2014
本文编号：3546580
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/zlx/3546580.html
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