MSI2在胰腺癌上皮细胞间质转化中的作用
发布时间:2021-12-31 20:28
目的:探讨Musashi2(MSI2)在胰腺癌上皮细胞间质转化(Epithelial mesenchymal transition,EMT)中的作用及其相关分子机制。研究方法:收集从2012年8月至2016年5月期间于中国医科大学附属第一医院行手术治疗并具有完整临床病理学参数及术后随访资料的胰腺癌标本43例,其中男性27例,女性16例,年龄29-80岁(中位数58岁),术后病理均证实为胰腺导管腺癌。采用免疫组化检测胰腺癌组织中MSI2,ZEB1及ZO-1的表达强弱,统计分析三者在胰腺癌组织水平上的表达强弱及其与临床病理学参数之间的关系。统计分析MSI2,ZEB1及ZO-1胰腺癌组织水平上的相关关系。应用CRISPR-Cas9技术于Capan-2,SW1990胰腺癌细胞系中构建MSI2稳转沉默细胞系。应用免疫印迹法和免疫沉淀方法探讨在胰腺癌细胞水平上MSI2与EMT关键蛋白之间的表达相关关系。应用卡方检验,Wilcoxon秩检验,Pearson相关系数法,Kaplan-Meier单因素分析,Log-Rank检验等统计学方法进行统计学分析。结果:免疫组化结果显示MSI2及ZEB1主要在细胞...
【文章来源】:中国医科大学辽宁省
【文章页数】:32 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
倍显微镜下胰腺癌组织免疫组化结果提示MSI2(AD)主要为核表达与胞浆表达,ZEB1(BE)
中国医科大学硕士学位论文73.2MSI2,ZEB1和ZO-1蛋白表达与胰腺癌术后预后的关系用Kaplan-Merier单因素生存分析发现,胰腺癌患者中MSI2高表达较低表达者生存预后差(中位生存时间371d:800d;2=7.750,p=0.005)(图2A),ZO-1高表达较低表达预后好(中位生存时间800d:371d;2=9.520,p=0.002)(图2C),而ZEB1与胰腺癌预后无明显相关关系(2=2.758,p=0.097),但p值具有临界统计学意义(图2B)。MSI2及ZEB1均高表达的胰腺癌患者较均低表达者预后差(中位生存时间371d:645d;2=7.212,p=0.007)(图2D)。MSI2高表达且ZO-1低表达胰腺癌患者较MSI2低表达且ZO-1高表达者预后差(中位生存时间371d:698d;2=10.610,p=0.001)(图2E)。以上结果提示MSI2、ZEB1和ZO-1共同影响胰腺癌患者预后。图2胰腺癌组织中不同蛋白表达情况与患者预后的Kaplan-Meier生存曲线,A为*MSI2,B为ZEB1,C为*ZO-1,D为*MSI2/ZEB1,E为*MSI2/ZO-1。*p<0.05
中国医科大学硕士学位论文83.3MSI2,ZEB1及ZO1在胰腺癌细胞水平中的表达相关关系用Capan-2、SW1990胰腺癌细胞构建MSI2沉默稳转细胞系,WB验证沉默效率。在蛋白水平,shMSI2组MSI2蛋白表达水平明显低于对照组,同时在胰腺癌MSI2沉默的Capan-2和SW1990细胞中ZEB1的表达量明显减少,ZO-1表达量明显增高,N-Ca,MMP9,Cav-1未见明显变化(图3AB)。免疫共沉淀提示在胰腺癌Capan-2及SW1990细胞系中ZEB1和MSI2存在蛋白相互结合(图3CD),提示MSI2和胰腺癌细胞例EMT关键蛋白作用密切相关。图3蛋白印迹法检测胰腺癌Capan-2(A)及SW1990(B)稳转沉默ShMSI2细胞与对照组细胞中MSI2,ZEB1与ZO-1蛋白水平表达量变化。免疫共沉淀法检测Capan-2(C)及SW1990(D)中MSI2与ZEB1在蛋白水平的相互结合,MSI2为沉淀蛋白,Input与IgG分别为阳性与阴性对照。
【参考文献】:
期刊论文
[1]2015年中国恶性肿瘤流行情况分析[J]. 郑荣寿,孙可欣,张思维,曾红梅,邹小农,陈茹,顾秀瑛,魏文强,赫捷. 中华肿瘤杂志. 2019 (01)
本文编号:3560920
【文章来源】:中国医科大学辽宁省
【文章页数】:32 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
倍显微镜下胰腺癌组织免疫组化结果提示MSI2(AD)主要为核表达与胞浆表达,ZEB1(BE)
中国医科大学硕士学位论文73.2MSI2,ZEB1和ZO-1蛋白表达与胰腺癌术后预后的关系用Kaplan-Merier单因素生存分析发现,胰腺癌患者中MSI2高表达较低表达者生存预后差(中位生存时间371d:800d;2=7.750,p=0.005)(图2A),ZO-1高表达较低表达预后好(中位生存时间800d:371d;2=9.520,p=0.002)(图2C),而ZEB1与胰腺癌预后无明显相关关系(2=2.758,p=0.097),但p值具有临界统计学意义(图2B)。MSI2及ZEB1均高表达的胰腺癌患者较均低表达者预后差(中位生存时间371d:645d;2=7.212,p=0.007)(图2D)。MSI2高表达且ZO-1低表达胰腺癌患者较MSI2低表达且ZO-1高表达者预后差(中位生存时间371d:698d;2=10.610,p=0.001)(图2E)。以上结果提示MSI2、ZEB1和ZO-1共同影响胰腺癌患者预后。图2胰腺癌组织中不同蛋白表达情况与患者预后的Kaplan-Meier生存曲线,A为*MSI2,B为ZEB1,C为*ZO-1,D为*MSI2/ZEB1,E为*MSI2/ZO-1。*p<0.05
中国医科大学硕士学位论文83.3MSI2,ZEB1及ZO1在胰腺癌细胞水平中的表达相关关系用Capan-2、SW1990胰腺癌细胞构建MSI2沉默稳转细胞系,WB验证沉默效率。在蛋白水平,shMSI2组MSI2蛋白表达水平明显低于对照组,同时在胰腺癌MSI2沉默的Capan-2和SW1990细胞中ZEB1的表达量明显减少,ZO-1表达量明显增高,N-Ca,MMP9,Cav-1未见明显变化(图3AB)。免疫共沉淀提示在胰腺癌Capan-2及SW1990细胞系中ZEB1和MSI2存在蛋白相互结合(图3CD),提示MSI2和胰腺癌细胞例EMT关键蛋白作用密切相关。图3蛋白印迹法检测胰腺癌Capan-2(A)及SW1990(B)稳转沉默ShMSI2细胞与对照组细胞中MSI2,ZEB1与ZO-1蛋白水平表达量变化。免疫共沉淀法检测Capan-2(C)及SW1990(D)中MSI2与ZEB1在蛋白水平的相互结合,MSI2为沉淀蛋白,Input与IgG分别为阳性与阴性对照。
【参考文献】:
期刊论文
[1]2015年中国恶性肿瘤流行情况分析[J]. 郑荣寿,孙可欣,张思维,曾红梅,邹小农,陈茹,顾秀瑛,魏文强,赫捷. 中华肿瘤杂志. 2019 (01)
本文编号:3560920
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