FABP6对结肠癌细胞增殖和迁移的影响及分子机制研究
发布时间：2021-12-31 20:24
背景结直肠癌是消化道系统常见肿瘤之一,近几年发展中国家发病率越来越高,50岁以下发病率也越来越高,其发病率和死亡率之高严重威胁人类的健康。结直肠癌发病机制复杂,从肠道环境因素到多种基因突变都参与结直肠癌的发生发展,其中,胆汁酸在结直肠癌发生发展中的作用也越来越明确,特别是次级胆汁酸,能够促使结直肠癌上皮细胞中的DNA发生损伤,进而变异,最后导致癌变。人类回肠脂肪酸结合蛋白（Fatty Acid Binding Protein 6,FABP6）是肠道上皮细胞内唯一结合胆汁酸的蛋白,参与胆汁酸的消化吸收、代谢和肝肠循环,能够减轻胆汁酸对肠道上皮的毒性作用,但人类的脂肪酸结合蛋白有两种同工型蛋白-1型和2型,已往的研究表明2型脂肪酸结合蛋白在结直肠癌中高表达,参与结直肠癌的发生发展,但最近的研究表明在结直肠癌中高表达的是1型脂肪酸结合蛋白,这种蛋白较典型的短亚型在N端多49个氨基酸,因此又称为长片段亚型,在本文中为区分两种亚型蛋白,称长片段为FABP6-L。两者在细胞中的分布,脂质的流动性,还有结构方面有很大不同。本课题针对两种同工型蛋白在结肠癌中的作用及可能的分子机制进行研究,以期为揭示结...
【文章来源】：新乡医学院河南省
【文章页数】：89 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
正常结肠上皮细胞及9种结肠癌细胞系中FABP6的mRNA水平的相对含量，按照顺序依次为NCM460、SW480、Caco2、HCT8、LOVO、HT29、LS174、THCT116、RKO、SW620
图 2 FABP6 在 9 中结肠癌细胞系中蛋白水平的相对表达含量2.3 重组质粒 pEGFP-FABP6 构建结果利用 Primer 5 软件设计能够特异性扩增 FABP6 转录本的引物，并经过 BLAST比对，由上海生工生物工程有限公司合成，培养 HCT116 细胞，用 TRIzol 提取细胞
述步骤进行质粒提取。过表达质粒 pEGFP-FABP6 经上海生工测序鉴定，与 FABP6Transcript2 基因碱基序列比对之后，结果正确，见图 3。图3 质粒构建结果 A为经上海生工测序后的pEGFP-FABP6质粒图谱；B为以HCT116 cDNA为模板扩增的 FABP6 产物，大小为 386bp；C 为双酶切后连接产物 pEGFP-FABP6 质粒 PCR 鉴定结果，大小为 386bp；D 为 pEGFP-FABP6 质粒双酶切鉴定结果。2.4 CCK8 实验检测 FABP6 对结肠癌细胞增殖情况的影响在 HCT116 和 HCT8 结肠癌细胞转染两组质粒，设置空白细胞组，过表达组为实验组，NC 组为对照组。利用倒置荧光显微镜观察荧光蛋白 GFP 的表达情况，转染效率在 80%左右，证明转染成功（见图 4）。利用紫外分光光度计，通过检测细胞在 450nm 处的吸光度值来判断细胞的增殖情况。与对照组相比
【参考文献】：
期刊论文
[1]脂肪酸结合蛋白及与肿瘤的关系研究进展[J]. 田雯英,夏敏. 医学综述. 2017(13)
[2]精准医学模式下结直肠癌研究现状及展望[J]. 王锡山. 中华医学杂志. 2017 (24)
[3]结直肠癌细胞外基质与癌细胞上皮-间质转化和分期的相关性[J]. 李竹林,王振军,赵博,喻学桥,韩加刚,赵宝成. 中华肿瘤防治杂志. 2016(16)
[4]DCA对FXR的作用及结肠癌细胞生物学行为的影响[J]. 张捷,张超峰,龚庆豪,查小应,王小军,朱松明. 结直肠肛门外科. 2016(02)
[5]高脂饮食促进结直肠癌发生机制的研究进展[J]. 陈雪,曹海龙,王斯南,王邦茂. 肿瘤药学. 2016(01)
[6]结直肠癌流行病学趋势[J]. 李道娟,李倩,贺宇彤. 肿瘤防治研究. 2015(03)
[7]法尼酯X受体的激活抑制结肠癌细胞生长[J]. 朱松明,张超峰,张捷,戴刚,黄侠. 中国普外基础与临床杂志. 2014(07)
[8]STAT3:慢性炎症介导肿瘤发生和进展的关键节点[J]. 侯嘉杰,孙倍成. 生物化学与生物物理进展. 2014(01)
[9]脂肪酸结合蛋白研究进展[J]. 邹艳慧,高学文. 内蒙古医学杂志. 2010(08)
[10]Overall expression of beta-catenin outperforms its nuclear accumulation in predicting outcomes of colorectal cancers[J]. Worrawit Wanitsuwan,Samornmas Kanngurn,Teeranut Boonpipattanapong,Rassamee Sangthong,Surasak Sangkhathat. World Journal of Gastroenterology. 2008(39)
硕士论文
[1]FXR及Wnt通路在大肠肿瘤组织中的表达[D]. 李树武.天津医科大学 2012
本文编号：3560916
【文章来源】：新乡医学院河南省
【文章页数】：89 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
正常结肠上皮细胞及9种结肠癌细胞系中FABP6的mRNA水平的相对含量，按照顺序依次为NCM460、SW480、Caco2、HCT8、LOVO、HT29、LS174、THCT116、RKO、SW620
图 2 FABP6 在 9 中结肠癌细胞系中蛋白水平的相对表达含量2.3 重组质粒 pEGFP-FABP6 构建结果利用 Primer 5 软件设计能够特异性扩增 FABP6 转录本的引物，并经过 BLAST比对，由上海生工生物工程有限公司合成，培养 HCT116 细胞，用 TRIzol 提取细胞
述步骤进行质粒提取。过表达质粒 pEGFP-FABP6 经上海生工测序鉴定，与 FABP6Transcript2 基因碱基序列比对之后，结果正确，见图 3。图3 质粒构建结果 A为经上海生工测序后的pEGFP-FABP6质粒图谱；B为以HCT116 cDNA为模板扩增的 FABP6 产物，大小为 386bp；C 为双酶切后连接产物 pEGFP-FABP6 质粒 PCR 鉴定结果，大小为 386bp；D 为 pEGFP-FABP6 质粒双酶切鉴定结果。2.4 CCK8 实验检测 FABP6 对结肠癌细胞增殖情况的影响在 HCT116 和 HCT8 结肠癌细胞转染两组质粒，设置空白细胞组，过表达组为实验组，NC 组为对照组。利用倒置荧光显微镜观察荧光蛋白 GFP 的表达情况，转染效率在 80%左右，证明转染成功（见图 4）。利用紫外分光光度计，通过检测细胞在 450nm 处的吸光度值来判断细胞的增殖情况。与对照组相比
【参考文献】：
期刊论文
[1]脂肪酸结合蛋白及与肿瘤的关系研究进展[J]. 田雯英,夏敏. 医学综述. 2017(13)
[2]精准医学模式下结直肠癌研究现状及展望[J]. 王锡山. 中华医学杂志. 2017 (24)
[3]结直肠癌细胞外基质与癌细胞上皮-间质转化和分期的相关性[J]. 李竹林,王振军,赵博,喻学桥,韩加刚,赵宝成. 中华肿瘤防治杂志. 2016(16)
[4]DCA对FXR的作用及结肠癌细胞生物学行为的影响[J]. 张捷,张超峰,龚庆豪,查小应,王小军,朱松明. 结直肠肛门外科. 2016(02)
[5]高脂饮食促进结直肠癌发生机制的研究进展[J]. 陈雪,曹海龙,王斯南,王邦茂. 肿瘤药学. 2016(01)
[6]结直肠癌流行病学趋势[J]. 李道娟,李倩,贺宇彤. 肿瘤防治研究. 2015(03)
[7]法尼酯X受体的激活抑制结肠癌细胞生长[J]. 朱松明,张超峰,张捷,戴刚,黄侠. 中国普外基础与临床杂志. 2014(07)
[8]STAT3:慢性炎症介导肿瘤发生和进展的关键节点[J]. 侯嘉杰,孙倍成. 生物化学与生物物理进展. 2014(01)
[9]脂肪酸结合蛋白研究进展[J]. 邹艳慧,高学文. 内蒙古医学杂志. 2010(08)
[10]Overall expression of beta-catenin outperforms its nuclear accumulation in predicting outcomes of colorectal cancers[J]. Worrawit Wanitsuwan,Samornmas Kanngurn,Teeranut Boonpipattanapong,Rassamee Sangthong,Surasak Sangkhathat. World Journal of Gastroenterology. 2008(39)
硕士论文
[1]FXR及Wnt通路在大肠肿瘤组织中的表达[D]. 李树武.天津医科大学 2012
本文编号：3560916
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/zlx/3560916.html
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