化疗诱导的衰老细胞胞外囊泡的分离及相关特性研究

发布时间：2022-01-15 22:15

　　目的:探讨化疗诱导的衰老肿瘤细胞分泌的胞外囊泡（EVs）特性及其对肿瘤细胞与巨噬细胞的影响。方法:化疗药物阿霉素、顺铂及极光激酶抑制剂MLN8237作用神经母细胞瘤细胞系,分析细胞衰老及细胞周期阻滞情况,建立化疗诱导的细胞衰老模型。分离衰老细胞培养上清中的EVs,Western blot及Nanosight分析EVs纯度、粒径大小与浓度。分别用肿瘤细胞及巨噬细胞孵育EVs,Western blot与RT-qPCR检测胞内蛋白与细胞因子表达。结果:低浓度MLN8237作用IMR32细胞成功诱导细胞衰老;衰老细胞分泌的EVs（SAEs）数量低于未处理细胞,但大小在30～150 nm的外泌体组分含量偏高;与EVs孵育组相比,SAEs孵育的IMR32细胞BRD4与C-MYC表达水平明显下调;EVs与SAEs孵育的THP-1细胞均发生形态改变:贴壁并伸出伪足,呈现极化状态;但THP-1细胞内细胞因子表达水平明显不同:在EVs与SAEs组,IL-4与TNF-α水平明显比未处理组低;与EVs组相比,SAEs组IL-1β、IL-10与TGF-β水平明显降低。结论:SAEs能够抑制肿瘤细胞BRD4表达并... 

【文章来源】：中国免疫学杂志. 2020,36(15)北大核心CSCD

【文章页数】：5 页

【部分图文】：

SAEs的分离与鉴定

SAEs抑制IMR32细胞BRD4通路

表2 EVs颗粒大小与浓度Tab.2 Particle size distribution and concentration of EVS Samples Untreated control MLN8237-treated Mean particle size(nm) 218.6 213.8 Particle size peak(nm) 187.4 168.7 Total concentration(1×1011particle/ml) 2.935 1.52 Particle size 30-150 nm percentage(%) 5.8 16.1图2 SAEs的分离与鉴定

【参考文献】：
期刊论文
[1]外泌体及其对调节性T细胞作用的研究进展[J]. 张少鹏,倪绪皓,吕凌.  中国免疫学杂志. 2018(03)



本文编号：3591414