HSP70与NF-κB在TNF-α诱导A549细胞凋亡中的作用

发布时间：2022-01-19 16:52

　　背景与目的肺癌在世界范围内是发病率和死亡率较高的恶性肿瘤之一,严重危害着人们的生命健康安全。大量的研究发现肺癌细胞在机体内可通过多种途径拮抗机体对于细胞增殖和凋亡的调控作用,造成肺癌细胞在机体组织内的恶性增殖从而对机体内正常的组织细胞功能产生损害。近来有研究证实肿瘤坏死因子-α（Tumor necrosis factor-α,TNF-α）可引起肿瘤细胞的凋亡,且其作为由免疫细胞分泌的具有多种复杂生物活性的细胞因子,可介导包括增殖、分化、炎症和细胞凋亡在内的多种细胞反应,具有广泛的抗肿瘤作用。而核转录因子-κB（Nuclear factor-κB,NF-κ]B）是TNF-α诱导炎症反应的信号转导核心,能与多种增强子以及启动子结合,抑制NF-κB的活性理论上可以阻断TNF-α启动的炎症反应、细胞凋亡以及氧化应激的水平变化。热休克蛋白-70（heat shock protein-70,HSP70）是热休克蛋白家族（Heat shock proteins,HSPs）中的重要一员可作为分子伴侣参与蛋白质的折叠、组装和降解等生物学过程,有研究发现HSP70在肺癌组织中的过表达与肺癌患者的不良预后有... 

【文章来源】：郑州大学河南省 211工程院校

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【部分图文】：

图３．１不同浓度ＴＮＦ－ａ对Ａ５４９细胞增殖活性的影响??：＊，尸＜０．０５??

????３．１．２不同浓度ＴＮＦ－ｃ［对Ａ５４９细胞内相关蛋白的影响??为进一步验证ＴＮＦ－ａ对Ａ５４９细胞内相关蛋白的影响，使用不同浓度的ＴＮＦ－ａ刺激??Ａ５４９细胞２４ｈ后分别收集各组细胞并提取总蛋白，采用ＢＣＡ法检测各组总蛋白的浓度，??根据不同浓度梯度的蛋白标准品在５６２ｎｍ处的吸光度，绘制出蛋白浓度的标准曲线，如??图３．２所示，接着将各组总蛋白样本在５６２ｎｍ处的吸光度大小带入图３．２中的公式中计??算出各组蛋白样本的浓度大小，结果如表３．２所示，最后加入预先配置好的裂解液将各??组总蛋白样本的浓度统一稀释至２ｐｇ４ｉｌ。??准－］?ｙ－２．７２４１ｘ?？??Ｒｓ＝?０．９＾４０－＇??蛋－ｏ．ｓ??度，２?，，？？??吸光度（ｏｄ５６２）??图３．２蛋白浓度标准曲线??表３．２不同组别提取的总蛋白样本浓度大小??分组?０．００ｎｍｏｌ／Ｌ?组?０．２５ｍｎｏｌ／Ｌ?组?０．５０ｎｍｏｌ／Ｌ?组?１．００ｎｍｏｌ／Ｌ?组??ＯＤ５６２?０．９７?０．８２?０．８５?０．９０??蛋白浓度（ＨｇＶｌ）?２．６５?２．２２?２．３１?２．４５??不同浓度的ＴＮＦ－ａ对Ａ５４９细胞中ＨＳＰ７０蛋白的表达影响如图３．３所示，单因素方??差分析的结果显示：不同浓度ＴＮＦ－ａ刺激Ａ５４９细胞２４ｈ，细胞中ＨＳＰ７０蛋白的表达变??化不存在统计学上的差异（／＾值：６．８２０，尸＝０．５１８＞０．０５）。结合上一步ＣＣＫ－８实验的结??果，选择０．５０?ｎｍｏｌ／Ｌ浓度的ＴＮＦ－ａ进行下一步的实验，以０．５０?ｎｍｏｌ／Ｌ浓度的ＴＮＦ－ａ??刺激Ａ５４９细胞２４ｈ后检测ＮＯＸ１蛋白、ＮＦ－

????差异均具有统计学意义（ｔ值分别为：５．４６９、５．０１４，?Ｐ＜０．０５）。??ＴＮＦ－ａ?０?０．２５?０．５０?１．００?ｎｉｎｏｌ／Ｌ??ＨＳＰ７０?一一》一??ＧＡＰＤＨ?＿?＿?办??１．５－１??０?丁??她??，??图３．３不同浓度ＴＮＦ－ａ对Ａ５４９细胞中ＨＳＰ７０蛋白表达的影响??ＮＦ－ｋＢ??ＧＡＰＤＨ?ＧＡＰＤＨ??？ａ?ｈ?ａ?ｂ??１．５＊１?１．５－，??Ｓ?ｒ＾１?Ｓ?ｒ＾＝－ｉ??泛?１．０－?■?＾?１．０－??＾?Ｉ??２?０?５－?＾?０．５－??ｌｉ?Ｏ??ｚ?ｚ??〇．〇Ｊ??１???１????〇．〇Ｊ—＾一??．／?／?／??图３．４?ＴＮＦ－ａ对Ａ５４９细胞中ＮＯＸ１、ＮＦ－ｋＢ蛋白表达的影响??注：ａ．空白组ｂ．?ＴＮＦ－ａ组；＊表示与空白组相比，＿Ｐ＜０．０５．??１９??


本文编号：3597221