SIRT1沉默对人甲状腺乳头状癌细胞株TPC-1生物学功能的影响

发布时间：2022-02-17 17:34

　　目的观察沉默信息调节因子2相关酶1（silent information regulator2 homolog 1,SIRT1）基因沉默对人甲状腺乳头状癌（thyroid papillary carcinoma,TPC）细胞株TPC-1生物学功能的影响。本研究以人甲状腺乳头状癌细胞株TPC-1为模型,通过SIRT1siRNA干扰SIRT1基因的表达,使SIRT1在TPC-1细胞中表达沉默。同时通过检测细胞增殖、衰老、凋亡及周期的改变,从而研究SIRT1对人甲状腺乳头状癌细胞株TPC-1生物学功能的影响,以进一步探索SIRT1在肿瘤的发生、发展中的作用机制。方法1.首先利用SIRT1siRNA技术下调SIRT1在甲状腺乳头状癌细胞株TPC-1中的表达:分别利用多个不同浓度、不同序列的SIRT1siRNA转染体外培养的人甲状腺乳头状癌细胞株TPC-1中,干扰SIRT1在TPC-1中的表达,同时应用qRT-PCR方法检测SIRT1siRNA的干扰效率,筛选出干扰效率最强的SIRT1siRNA,并用Western blot验证SIRT1蛋白的表达情况。2.各实验分成3组:利用SIRT1siRN... 

【文章来源】：福建医科大学福建省

【文章页数】：46 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

β半乳糖苷酶染色检测细胞衰老

A：TPC-1 组（×400）；B：NCsiRNA 组（×400）；C：SIRT1siRNA 组（×400）；D：SIRT1 沉默对TPC-1 细胞凋亡的影响（×400）。** P＜0.05 vs.空白组或阴性对照组。图 5 Hoechst 染色法检测细胞凋亡Fig.5 Hoechst staining was used to detect apoptosis5 流式细胞仪检测转染组 TPC-1 的细胞凋亡及周期变化5.1 细胞凋亡本实验进一步利用了流式细胞技术检测了细胞凋亡的变化。各组细胞亡比例结果如图 6 所示，SIRT1siRNA 处理组的总凋亡细胞比例（65.22%±0.41%，图 6C）较 TPC-1 组（5.84%±0.16%，图 6A）及 NCsiRNA 组（5.50.05%，图 6B）的总凋亡细胞比例明显升高（P<0.05，图 6D）。

A:TPC-1 组；B:NCsiRNA 组；C:SIRT1siRNA 组；D:SIRT1 沉默对 TPC-1 细胞凋亡的影响。** P＜0.vs.空白组或阴性对照组。图 6 流式细胞技术检测细胞凋亡Fig.6 Flow cytometry was used to detect apoptosis5.2 细胞周期利用了流式细胞技术对细胞周期变化检测后，其结果显示，SIRT1siR处理组的 G1 期细胞比例（67.99%±0.87%，图 7C）较 TPC-1 组（64.39%±0.77%，图 7A）及 NCsiRNA 组（64.08%±0.53%，图 7B）的 G1 期细胞比例显升高（P<0.05，图 7D），提示 SIRT1siRNA 处理组的细胞出现了 G1 期阻滞。

【参考文献】：
期刊论文
[1]沉默信息调节因子2相关酶1在甲状腺乳头状癌组织中的表达及其意义[J]. 吴文艺,张丽婷,傅德强,黄种心,王朝阳,邱建龙.  中华实验外科杂志. 2015 (04)

博士论文
[1]SIRT1表达对大鼠胰岛β细胞凋亡及非酒精性脂肪肝病形成的影响[D]. 邓向群.华中科技大学 2007



本文编号：3629829