环状RNA circ-CCDC85A通过调控IL-6R和STAT3影响乳腺癌生物学行为的机制研究

发布时间：2022-02-19 16:40

　　第一部分circ-CCDC85A在乳腺癌组织和细胞中的表达及对其生物学行为的影响目的:研究环状RNA CCDC85A在乳腺癌（Breast Cancer,BC）组织和细胞中的表达及其对乳腺癌细胞增值、迁移和侵袭能力的影响。方法:1.RT-PCR和q RT-PCR法检测circ-CCDC85A在乳腺癌组织和细胞中的表达。2.采用Sanger测序鉴定circ-CCDC85A的环化剪接点序列。3.RNase R实验验证circ-CCDC85A在乳腺癌细胞中的特性。4.采用CCK-8实验、平板克隆形成实验、划痕愈合实验以及Transwell实验检测过表达或敲低circ-CCDC85A对乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。结果:1.RT-PCR结果显示,以乳腺癌组织和细胞的c DNA和g DNA为模板,环状转录本只能通过发散引物在c DNA中扩增出来,而线性转录本可通过聚合引物同时在c DNA和g DNA中扩增出来。q RT-PCR结果显示,与癌旁正常组织相比,乳腺癌组织中circ-CCDC85A表达水平显著下调（P<0.05）。2.PCR产物的Sanger测序结果验证了circ-CCD... 

【文章来源】：河北医科大学河北省

【文章页数】：100 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

circ-CCDC85A在乳腺癌细胞系和组织标本中的鉴定

研究论文26图2PCR产物的Sanger测序验证circ-CCDC85A的环化剪接点Fig.2Verificationofthejunctionsiteofcirc-CCDC85AbySangersequencingofthePCRproduct.3.circ-CCDC85A在乳腺癌细胞中的特性提取MCF-7细胞的总RNA后分成以下两组：一组不经任何处理，另一组使用RNaseR进行消化。然后通过qRT-PCR分别检测circ-CCDC85A相关的环状转录本和线性转录本的表达变化，结果如图3所示，与对照组相比，MCF-7细胞RNaseR处理组中circ-CCDC85A对应线性转录本的表达水平明显降低（1.01±0.04vs0.22±0.00，***P＜0.001），而环状转录本的表达水平无明显改变（1.00±0.12vs0.92±0.13，P＞0.05）。图3circ-CCDC85A在乳腺癌细胞中具有RNaseR抗性Fig.3circ-CCDC85AisresistanttoRNaseRtreatmentinbreastcancercells.***P<0.001vsMCF-7-controllineargroup.

研究论文26图2PCR产物的Sanger测序验证circ-CCDC85A的环化剪接点Fig.2Verificationofthejunctionsiteofcirc-CCDC85AbySangersequencingofthePCRproduct.3.circ-CCDC85A在乳腺癌细胞中的特性提取MCF-7细胞的总RNA后分成以下两组：一组不经任何处理，另一组使用RNaseR进行消化。然后通过qRT-PCR分别检测circ-CCDC85A相关的环状转录本和线性转录本的表达变化，结果如图3所示，与对照组相比，MCF-7细胞RNaseR处理组中circ-CCDC85A对应线性转录本的表达水平明显降低（1.01±0.04vs0.22±0.00，***P＜0.001），而环状转录本的表达水平无明显改变（1.00±0.12vs0.92±0.13，P＞0.05）。图3circ-CCDC85A在乳腺癌细胞中具有RNaseR抗性Fig.3circ-CCDC85AisresistanttoRNaseRtreatmentinbreastcancercells.***P<0.001vsMCF-7-controllineargroup.

【参考文献】：
期刊论文
[1]Noncoding RNAs in gastric cancer: Research progress and prospects[J]. Meng Zhang,Xiang Du.  World Journal of Gastroenterology. 2016(29)



本文编号：3633251