黄连素联合顺铂诱导人肺癌顺铂耐药细胞A549/DDP凋亡的实验研究

发布时间：2022-07-11 19:51

　　目的:通过体外细胞实验观察黄连素联合顺铂对人肺癌耐药细胞A549/DDP增殖和凋亡的影响,探讨黄连素联合顺铂诱导人肺癌耐药细胞A549/DDP的凋亡可行性及其相关机制。方法:以A549/DDP细胞为研究对象,分别加入12μg/m L的顺铂、浓度为20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L的黄连素+12μg/m L的顺铂,设置空白对照孔（PBS孔）,分别用药物干预24h、48h、72h,采用MTT法检测细胞增殖活性;各组用药干预48h后,流式细胞仪检测细胞凋亡,Western blot法检测Caspase-3、Caspase-9、Bax、Bcl-2的蛋白表达情况,Real-time PCR法检测Caspase-3、Caspase-9、Bax、Bcl-2的m RNA表达水平。结果:（1）作用24h,与PBS组对比,低中高浓度黄连素联合顺铂组、顺铂组之间的A549/DDP细胞吸光值均有显著统计学差异（P<0.01）;随着黄连素浓度增加,其吸光值逐渐降低,抑制率逐渐增高,但各组之间比较无统计学差异;作用48h、72h,中、高浓度黄连素联合顺铂组与PBS组、顺铂组、低浓度黄连素联... 

【文章页数】：48 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
引言
缩写词对照表
第一部分 实验材料及仪器
    1.1 细胞株
    1.2 主要实验试剂及溶液调配
        1.2.1 主要实验试剂
        1.2.2 溶液调配
    1.3 主要仪器和设备
第二部分 实验方法
    2.1 实验分组
    2.2 细胞培养及传代
    2.3 MTT法检测细胞增殖
    2.4 流式细胞仪检测细胞凋亡
    2.5 Western blot检测蛋白表达
    2.6 RT-PCR法检测Caspase-3、Caspase-9、Bcl-2、Bax的mRNA水平
    2.7 统计学方法
第三部分 实验结果
    3.1 MTT法检测细胞增值
    3.2 流式细胞仪检测细胞凋亡
    3.3 Western blot检测蛋白表达
    3.4 RT-PCR法检测Caspase-3、Caspase-9、Bcl-2、Bax的mRNA水平
第四部分 结论
第五部分 讨论
    5.1 中医对肺癌的认识
        5.1.1 病名
        5.1.2 病因病机
        5.1.3 辨证论治
    5.2 中药逆转肺癌耐药细胞A549/DDP的研究
    5.3 黄连素联合顺铂逆转肿瘤耐药的研究
    5.4 Bcl-2家族调节细胞凋亡的机制
        5.4.1 Bcl-2蛋白抗凋亡机制
        5.4.2 Bax蛋白促凋亡机制
        5.4.3 Bcl-2与Bax在肿瘤耐药细胞中的表达
    5.5 Caspase家族蛋白在细胞凋亡中的影响
    5.6 总结
参考文献
致谢
综述
    参考文献


【参考文献】：
期刊论文
[1]Yangfei Kongliu Formula, a compound Chinese herbal medicine, combined with cisplatin, inhibits growth of lung cancer cells through transforming growth factor-β1 signaling pathway[J]. Shui-jie Shen,Yong-hong Zhang,Xiao-xia Gu,Shui-ju Jiang,Ling-jun Xu.  Journal of Integrative Medicine. 2017(03)
[2]人参皂苷Rh2对人肝癌细胞HepG2/ADM耐药逆转作用及其机制研究[J]. 吴艳林,刘润田.  医学研究生学报. 2017(05)
[3]Berberine displays antitumor activity in esophageal cancer cells in vitro[J]. Shu-Xian Jiang,Bo Qi,Wen-Jian Yao,Cheng-Wei Gu,Xiu-Feng Wei,Yi Zhao,Yu-Zhen Liu,Bao-Sheng Zhao.  World Journal of Gastroenterology. 2017(14)
[4]补中益气汤含药血清干预上皮间质转化对A549/DDP细胞凋亡的影响[J]. 周琳,于丹,刘春英.  中华中医药杂志. 2017(04)
[5]姜黄素联合顺铂对人前列腺癌PC-3细胞株的影响[J]. 郭巍,强亚勇,贺晓龙,汪峰,张斌斌,马亚东.  中国临床保健杂志. 2017(02)
[6]六君子汤含药血清对A549/DDP细胞及E-cadherin和N-cadherin表达的影响[J]. 甄芳,于丹,刘春英.  解剖科学进展. 2017(02)
[7]苦参素逆转结肠癌细胞多药耐药作用及机制研究[J]. 钟自强,黄桂柳,黄赞松,苏建伟,周喜汉.  右江民族医学院学报. 2017(01)
[8]补中益气汤对肺腺癌荷瘤裸鼠移植瘤LRP蛋白表达的影响[J]. 高原,于宁,陈奇,王莹,王哲,井欢,潘茜,于丹,刘春英.  时珍国医国药. 2016(12)
[9]益肺汤对人肺腺癌耐顺铂细胞株移植瘤裸鼠P-gp基因表达和免疫功能影响的实验研究[J]. 凌仕良,栾智宇,张小玲,山广志,刘帆.  新中医. 2016(11)
[10]补中益气汤对A549/DDP与A549荷瘤BALB/c小鼠移植瘤生长的影响[J]. 高原,王莹,陈奇,井欢,于丹,潘茜,王哲,刘春英.  中国老年学杂志. 2016(19)

博士论文
[1]培土生金法对A549/DDP细胞及其荷瘤裸鼠体内P-gp及LRP蛋白影响的研究[D]. 李璐璐.辽宁中医药大学 2015
[2]β-榄香烯逆转人肺腺癌A549/DDP细胞株的耐药性及可能机制的初步探讨[D]. 姚成才.福建医科大学 2014

硕士论文
[1]六君子汤含药血清对A549/DDP细胞E-cadherin和N-cadherin表达的影响[D]. 甄芳.辽宁中医药大学 2017
[2]柚皮苷逆转人卵巢癌耐药细胞SKOV3/DDP耐药性及逆转机制的研究[D]. 王磊.南昌大学 2016
[3]黄连素对人结肠癌细胞凋亡和迁移作用的研究[D]. 陈彬彬.厦门大学 2014
[4]重楼皂苷Ⅶ对耐顺铂人肺腺癌A549/DDP细胞增殖抑制作用的研究[D]. 郝杰.吉林大学 2012



本文编号：3658774