Twist2在胃癌细胞中的表达及对上皮间质转化的作用

发布时间：2022-11-08 21:03

　　目的:检测Twist2在人胃癌细胞系中mRNA和蛋白的表达情况。通过shRNA编码的质粒转染胃癌细胞系,从而抑制Twist2的表达,分析转染前后胃癌细胞中上皮间质转化相关因子钙黏素E（E-cadherin）、波形蛋白（Vimentin）的表达情况。探讨Twist2在胃癌细胞上皮-间质转化（Epithelial-mesenchymal transition,EMT）中的作用,并观察Twist2对胃癌细胞的侵袭和迁移能力的影响。方法:1、培养胃癌SGC-7901、BGC-823、MGC-803细胞系,提取mRNA和蛋白后,采用q-PCR和Western blot检测表达水平。2、选择Twist2 mRNA和蛋白表达水平最高的BGC-823细胞系进行进一步的研究。用shRNA编码的质粒转染胃癌BGC-823细胞系。将实验分为三组:空白组（Blank）;Twist2阴性对照组（NC-sh）;Twist2沉默组（Twist2-sh）。使用q-PCR、Western blot检测上述三组细胞中Twist2mRNA和蛋白的表达情况,以及各组细胞EMT相关因子E-cadherin、Vimentin蛋白... 

【文章页数】：41 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
英文缩略语
1 前言
2 材料和方法
    2.1 主要试剂和仪器
        2.1.1 主要试剂
        2.1.2 主要仪器
    2.2 研究方法
        2.2.1 人胃癌细胞系的培养
        2.2.2 q-PCR检测不同人胃癌细胞系中Twist2 mRNA的表达水平
        2.2.3 Westernblot检测不同人胃癌细胞系中Twist2蛋白的表达水平
        2.2.4 质粒转染并分组
        2.2.5 q-PCR检测各组细胞中Twist2 mRNA的表达水平
        2.2.6 Westernblot检测各组细胞中Twist2蛋白的表达水平
        2.2.7 Westernblot检测各组细胞中EMT相关分子蛋白的表达水平
        2.2.8 Transwell小室侵袭和迁移实验检测各组细胞的侵袭和迁移能力
        2.2.9 统计学处理与分析
3 结果
    3.1 q-PCR检测各细胞系中Twist2 mRNA的表达水平
    3.2 Westernblot检测各细胞系中Twist2蛋白的表达水平
    3.3 q-PCR检测各组细胞中Twist2 mRNA的表达情况
    3.4 Westernblot检测各组细胞中Twist2蛋白的表达情况
    3.5 Westernblot检测各组细胞EMT相关分子蛋白的表达水平
    3.6 Transwell小室侵袭实验检测各组细胞侵袭能力的变化情况
    3.7 Transwell小室迁移实验检测各组细胞迁移能力的变化情况
4 讨论
5 结论
参考文献
综述
    参考文献
攻读学位期间取得的研究成果
致谢
个人简历


【参考文献】：
期刊论文
[1]Twist2 is a valuable prognostic biomarker for colorectal cancer[J]. Hao Yu,Guang-Zhi Jin,Kai Liu,Hui Dong,Hua Yu,Ji-Cheng Duan,Zhe Li,Wei Dong,Wen-Ming Cong,Jia-He Yang.  World Journal of Gastroenterology. 2013(15)



本文编号：3704558