乏氧微环境下BICC1促胰腺癌转移及机制研究

发布时间：2022-12-10 20:57

　　背景BICC1也称双尾C基因（Bicaudal-C）最早是在黑腹果蝇中研究发现,动物实验中破坏该蛋白可以干扰果蝇卵母细胞次级卵泡细胞的正常迁移方向。鼠BICC1基因同源于果蝇BICC1基因,BICC1在小鼠的功能还未明确,目前的研究发现突变小鼠BICC1基因与多囊肾疾病相关。小鼠BICC1蛋白包含3个KH域,其他包含KH域的蛋白和涉及果蝇、爪蟾的BICC1研究说明该结构域与RNA互动很重要。BICC1参与RNA的剪切与降解过程,并对一些器官如肾脏,胰腺等的形态、功能的维持中发挥重要作用。我们前期实验结果说明:相较于正常的人胰腺组织及胰腺组织中的导管细胞,在胰腺导管肿瘤腺癌患者的手术切除标本及胰腺肿瘤细胞系中的BICC1表达量明显上升。我们为进一步探索BICC1在肿瘤中的作用进一步设计了相关实验,我们探索了BICC1在胰腺肿瘤中高表达对患者生存预后意义的影响,以及BICC1高表达与各个临床病理参数的关系,其背后的调控机制,目的是从包括临床水平、细胞功能水平、分子生物学水平及动物实验水平深入探索胰腺导管腺癌中BICC1高表达的功能与意义。方法1.应用天津市肿瘤医院胰腺导管肿瘤腺癌组织石蜡标... 

【文章页数】：129 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
中文摘要
Abstract
缩略语/符号说明
前言
    研究现状、成果
    研究目的、方法
一、BICC1蛋白在胰腺肿瘤组织中的表达及意义
    1.1 对象和方法
        1.1.1 胰腺肿瘤患者标本及所需临床病理资料采集
        1.1.2 主要试剂
        1.1.3 主要抗体
        1.1.4 实验主要需要实验试剂的配置材料和方法
        1.1.5 主要仪器及设备
        1.1.6 实验方法
        1.1.7 数据进行统计学分析
    1.2 结果
        1.2.1 125例胰腺腺癌患者基本信息
        1.2.2 BICC1蛋白在胰腺肿瘤组织标本中的表达情况
        1.2.3 BICC1蛋白在PDAC表达与临床参数之间的关系
        1.2.4 BICC1蛋白表达情况与患者预后的关系
    1.3 讨论
        1.3.1 BICC1在胰腺肿瘤组织中的表达及临床意义
    1.4 小结
二、BICC1蛋白在胰腺肿瘤细胞系中的表达
    2.1 对象和方法
        2.1.1 主要使用的胰腺肿瘤细胞系
        2.1.2 各种抗体及试剂盒
        2.1.3 主要试剂
        2.1.4 主要试剂
        2.1.5 主要仪器及设备
        2.1.6 实验方法
    2.2 结果
        2.2.1 BICC1蛋白在胰腺导管上皮肿瘤细胞系中的表达
        2.2.2 细胞免疫荧光染色检测BICC1蛋白在胰腺导管上皮细胞肿瘤中的定位
    2.3 讨论
    2.4 小结
三、BICC1蛋白增强PDAC侵袭能力
    3.1 实验对象和主要实验方法
        3.1.1 常见胰腺肿瘤细胞系及常用细菌菌株
        3.1.2 感受态质粒
        3.1.3 该实验常用主要试剂
        3.1.4 各主要试剂的配置方法
        3.1.5 仪器及设备
        3.1.6 主要实验方法
    3.2 结果
        3.2.1 BICC1稳定过表达细胞系构建及功能探讨
        3.2.2 BICC1稳定降表达细胞系构建及功能探讨
            3.2.2.1 BICC1稳定降表达细胞系构建
            3.2.2.2 稳定降表达BICC1细胞系的功能探索
        3.2.3 BICC1基因影响胰腺肿瘤细胞转移功能的机制探讨(EMT)
        3.2.4 BICC1通过调节ZEB1 影响胰腺肿瘤细胞侵袭迁移能力
            3.2.4.1 BICC1调控ZEB1的表达
            3.2.4.2 ZEB1在BICC1稳定过表达细胞系中的作用
    3.3 讨论
    3.4 小结
四、乏氧微环境下BICC1在胰腺癌中表达增加
    4.1 对象和方法
        4.1.1 细胞系
        4.1.2 主要试剂
        4.1.3 主要试剂配置
        4.1.4 仪器及设备
        4.1.5 实验方法
    4.2 结果
        4.2.1 在乏氧条件下胰腺肿瘤细胞的BICC1表达增高
        4.2.2 BICC1是HIF1α促转移的重要靶分子
    4.3 讨论
    4.4 小结
五、BICC1与HIF1α的组织相关性
    5.1 对象和方法
    5.2 统计学分析
    5.3 结果
    5.4 讨论
    5.5 小结
六、BICC1促进胰腺肿瘤转移的体内实验
    6.1 实验对象和方法
        6.1.1 细胞系及实验动物
        6.1.2 实验试剂
        6.1.3 主要试剂配置
        6.1.4 实验仪器
        6.1.5 实验方法
    6.2 结果
        6.2.1 构建鼠源BICC稳系及验证
        6.2.2 BICC1在动物体内促进胰腺肿瘤转移
    6.3 讨论
    6.4 小结
全文结论
论文创新点
参考文献
发表论文和参加科研情况说明
综述 RNA结合蛋白的特征、分类及相关研究进展
    综述参考文献
致谢
个人简历


【参考文献】：
期刊论文
[1]RNA结合蛋白HuR通过其RNA识别模体调节hsa-let-7c表达（英文）[J]. 宋峣,冯伟,施国敏,陈超,张幼怡.  生理学报. 2018(01)



本文编号：3717504