NRSN2活化PI3K/AKT/mTOR通路促进非小细胞肺癌的生长

发布时间：2022-12-10 21:52

　　研究背景与目的:非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）是世界上最常见的恶性肿瘤,总的5年生存率仅15%,已成为恶性肿瘤首位死亡原因。近年来小分子靶向药物的发展,对NSCLC的治疗产生了重大影响。然而,由于靶点局限性及耐药性等问题,大多数NSCLC病人并没有合适靶向药物可选用。为改变NSCLC的治疗现状,迫切需要寻找新的治疗靶点。神经囊泡膜蛋白Neurensin-2（NRSN2）是新近发现的基因,编码一种多通道囊泡膜蛋白,主要参与囊泡运输和神经信号传导。针对NRSN2的以往研究主要集中在神经信号传导。近年研究显示NRSN2表达异常与肿瘤发生有关。有趣的是,在肝癌和恶性黑色素瘤的研究中发现,NRSN2承担着截然相反的功能——抑癌和或促癌。我们在检索Oncomine数据库（基因芯片数据库）中发现NRSN2在NSCLC呈中高表达。研究也表明NSCLC（尤其是肺腺癌）与神经内分泌失调紧密相关。因此,我们推测NRSN2可能与NSCLC密切关联。磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（PI3K/AKT/m TOR）信号转导通路是重要的细胞内... 

【文章页数】：85 页

【学位级别】：博士

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摘要
Abstract
中英文缩略词表
第1章 引言
    1 概述
    2 NRSN2的研究进展
        2.1 NRSN2的特征、表达
        2.2 NRSN2在细胞中的功能
        2.3 NRSN2与肿瘤
    3 本课题的研究背景、研究目的和研究内容
第2章 NRNS2在非小细胞肺癌组织及细胞中的表达
    1 材料与方法
        1.1 组织标本
        1.2 实验细胞
        1.3 主要试剂
        1.4 实验主要仪器和设备
        1.5 实验方法
    2 数据处理
    3 实验结果
        3.1 基因数据库检索结果
        3.2 NRSN2mRNA肺癌组织及癌旁组织中表达
        3.3 NRSN2蛋白在肺癌组织及相应癌旁组织中的表达水平
        3.4 NRSN2蛋白在3种肺癌细胞株中的表达
        3.5 免疫组化检测NRSN2蛋白在肺癌组织及正常肺组织中表达
        3.6 NRSN2表达与肺癌各临床因素的相关性
    4 讨论
    5 本章小结
第3章 NRSN2在非小细胞肺癌中作用及机制
    第1节 NRSN2过表达及沉默的肺癌细胞模型建立
        1 材料与方法
            1.1 实验细胞
            1.2 主要试剂
            1.3 实验主要仪器和设备
            1.4 实验方法
        2 结果
            2.1 重组质粒pCDH-CMV/NRSN2的提取纯化及酶切鉴定
            2.2 重组质粒pCDH-CMV/NRSN2的测序鉴定
            2.3 lenti-NRSN2重组质粒在A549肺癌细胞的表达
            2.4 转染si-RNA后A549肺癌细胞NRSN2的表达水平
        3 讨论
            3.1 基因克隆技术
            3.2 RNA干扰
        4 小结
    第2节 NRSN2在NSCLC中生物学功能及作用机制
        1 材料与方法
            1.1 实验细胞
            1.2 主要试剂
            1.3 实验主要仪器和设备
            1.4 实验方法
        2 数据处理
        3 实验结果
            3.1 外源性增加NRSN2表达对A549肺癌细胞生物学行为的影响
            3.2 沉默NRSN2表达对A549肺癌细胞生物学行为的影响
            3.3 NRSN2促进NSCLC生长的机制
        4 讨论
            4.1 NRSN2在NSCLC中的生物学功能
            4.2 NRSN2促进NSCLC生长的机制
        5 小结
第4章 结论与展望
    4.1 结论
    4.2 进一步工作的方向
致谢
参考文献
攻读学位期间的研究成果
综述
    参考文献
附录


【参考文献】：
期刊论文
[1]囊泡运输的功能与调控机制[J]. 张程,牛洋,刘佳佳.  中国细胞生物学学报. 2014(09)
[2]分子伴侣介导的自噬与肿瘤的关系及前景展望[J]. 解世洋.  山西医药杂志. 2014(16)
[3]信号肽与蛋白质的分选转运[J]. 彭佳师,龚继明.  植物生理学报. 2011(01)
[4]内体—溶酶体运输及其细胞功能[J]. 郝振华,李巍.  生命科学. 2010(11)
[5]Decreased expression of Neurensin-2 correlates with poor prognosis in hepatocellular carcinoma[J]. Hai-Qing Ma, Xiao-Ting Liang, Jing-Jing Zhao, Hui Wang, Jian-Cong Sun, Yi-Bing Chen, Ke Pan, Jian-Chuan Xia, State Key Laboratory of Oncology in Southern China and Department of Experimental Research, Sun Yat-sen University Cancer Center, Guangzhou 510060, Guangdong Province, China.  World Journal of Gastroenterology. 2009(38)
[6]慢病毒载体的设计及应用进展[J]. 王淑艳,张愚.  中国生物工程杂志. 2006(11)
[7]肺癌多阶段发病过程中的分子机制简述[J]. 母新华,陈照丽,赫捷.  中国肺癌杂志. 2006(02)



本文编号：3717581