缺氧微环境中胰腺星状细胞通过CCL7/CCR5轴促进胰腺癌侵袭

发布时间：2023-01-05 18:26

　　目的:探讨缺氧状态下胰腺星状细胞的单核细胞趋化因子7（C-C motif chemokine ligand 7,CCL7）表达情况及其对胰腺癌侵袭的影响。方法:通过组织块外植法获得人肿瘤相关胰腺星状细胞（pancreatic stellate cells,PSCs）,于常氧（20%O₂）、缺氧（1%O₂）下培养,并通过人趋化因子抗体芯片技术分析其上清液中多种趋化因子的表达差异;通过加入不同浓度外源性人重组蛋白CCL7（0、1、10、100 ng/mL）研究趋化因子CCL7与胰腺癌细胞侵袭之间的浓度依赖关系;使用慢病毒转染、Transwell等技术着重分析缺氧PSCs过表达的CCL7促胰腺癌侵袭的作用。结果:相较于常氧培养PSCs,缺氧培养PSCs的条件培养基可显著增强胰腺癌侵袭能力（P＜0.05）;缺氧培养下PSCs上清液中CCL7相较于常氧培养显著高表达（fold change=2.38）;外源性重组CCL7蛋白（0、1、10、100 ng/mL）可显著增加胰腺癌细胞（Miapaca-2、Colo357）侵袭能力,且呈浓度依赖关系。流式细胞... 

【文章页数】：6 页

【文章目录】：
1 材料和方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 激活态的人PSCs提取
        1.2.2 细胞培养
        1.2.3 CCL7沉默慢病毒转染PSCs(sh-CCL7 PSCs)
        1.2.4 Western blot印迹
        1.2.5 细胞侵袭能力检测
        1.2.6 流式细胞术检测细胞膜蛋白
        1.2.7 RNA提取及实时定量PCR
        1.2.8 外源性人重组蛋白CCL7的复原、存放及使用
    1.3 统计学方法
2 结果
    2.1 缺氧培养PSCs的CCL7表达较常氧培养显著增加
    2.2 CCL7受体(CCR1、CCR2、CCR3、CCR5)在胰腺癌细胞中的表达情况
    2.3 PSCs的CCL7表达对胰腺癌细胞侵袭能力的影响
    2.4 缺氧微环境中PSCs通过CCL7/CCR5轴诱导胰腺癌细胞EMT并促进侵袭
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]CCL7 and CCL21 overexpression in gastric cancer is associated with lymph node metastasis and poor prognosis[J]. Tsann-Long Hwang,Li-Yu Lee,Chee-Chan Wang.  World Journal of Gastroenterology. 2012(11)



本文编号：3727935