UPLC-MS/MS分析研究人体血清、尿液中几种代谢物与两种癌症的相关性

发布时间：2023-02-26 20:30

　　本论文采用UPLC-MS/MS方法对人体血清和尿液中的代谢产物进行定量分析,并探讨了它们与两种癌症的相关性,这在医学上对癌症的早期诊断和治疗、减轻患者身体心理上的痛苦和经济压力都具有十分重要的意义。首先,建立了测定人体尿液中DNA氧化损伤标志物8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)的UPLC-MS/MS分析方法。尿样经HLB固相萃取柱净化,以正离子电喷雾离子源和多反应监测模式进行分析。8-OHdG的线性范围在1-300 nmol/L之间。LOD和LOQ分别为0.2和0.6 nmol/L,样品的日内精密度为0.7%-1.1%,日间精密度为0.5%-0.7%。8-OHdG的回收率在99.8-111.4%之间。此外,应用建立的方法检测了65例正常人(吸烟与非吸烟者分别为21和44例)和61例结直肠癌患者(吸烟与非吸烟者分别为17和44例)尿液中8-OHdG含量,发现吸烟者和结直肠癌患者的8-OHdG含量明显高于对照组。其次,对血清样品里的蛋白质进行沉淀处理,利用稳定同位素标记的方法在负离子电离多反应监测模式下检测了甘胆酸(GCA)的含量。GCA的校准曲线覆盖浓度范围从0.2到400 ng/ml;L...

【文章页数】：102 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
缩写
第一章 绪论
    1.1 前言
    1.2 代谢组学研究进展
        1.2.1 代谢组学概念
        1.2.2 代谢组学的分类
        1.2.3 代谢组学与生物标志物
        1.2.4 代谢组学的研究流程
        1.2.5 代谢组学在疾病诊断的应用
    1.3 样品前处理技术
        1.3.1 液液萃取
        1.3.2 液相微萃取
        1.3.3 固相萃取
        1.3.4 固相微萃取
        1.3.5 搅拌棒吸附萃取
        1.3.6 分子印迹固相萃取
        1.3.7 化学衍生化
    1.4 常用检测代谢产物的分析方法
        1.4.1 核磁共振技术
            1.4.1.1 核磁共振氢谱
            1.4.1.2 核磁共振碳谱
        1.4.2 质谱技术
            1.4.2.1 毛细管电泳-质谱联用
            1.4.2.2 气相色谱-质谱联用
            1.4.2.3 液相色谱-质谱联用
    1.5 论文选题目的、意义和研究内容
第二章 UPLC-MS/MS 测定尿液中 8-羟基脱氧鸟苷的含量及与吸烟和结直肠癌的相关性
    2.1 引言
    2.2 实验部分
        2.2.1 材料与试剂
        2.2.2 仪器与设备
        2.2.3 尿液样品收集
        2.2.4 样品前处理
        2.2.5 试验条件
            2.2.5.1 色谱条件
            2.2.5.2 质谱条件
        2.2.6 方法评估
        2.2.7 统计学分析
    2.3 结果与讨论
        2.3.1 色谱条件的优化
        2.3.2 质谱条件的优化
        2.3.3 方法学验证
        2.3.4 方法的应用
            2.3.4.1 人群尿液样本的检测
            2.3.4.2 8-OHdG的定量
    2.4 小结
第三章 UPLC-MS/MS 测定血清中甘胆酸的含量及与肝细胞肝癌的相关性
    3.1 引言
    3.2 实验部分
        3.2.1 材料与试剂
        3.2.2 仪器与设备
        3.2.3 血清样品收集
        3.2.4 样品前处理
        3.2.5 试验条件
            3.2.5.1 色谱条件
            3.2.5.2 质谱条件
        3.2.6 方法评估
        3.2.7 统计学分析
    3.3 结果与讨论
        3.3.1 色谱条件的优化
        3.3.2 质谱参数的优化
        3.3.3 方法学评估
        3.3.4 方法的应用
            3.3.4.1 人群血清样品的检测
            3.3.4.2 GCA的定量
    3.4 小结
第四章 UPLC-MS/MS 测定尿液中胞嘧啶核苷的含量及与结直肠癌的相关性
    4.1 引言
    4.2 实验部分
        4.2.1 材料与试剂
        4.2.2 仪器与设备
        4.2.3 尿液样品收集
        4.2.4 样品前处理
        4.2.5 试验条件
            4.2.5.1 色谱条件
            4.2.5.2 质谱条件
        4.2.6 方法评估
        4.2.7 数据分析
    4.3 结果与讨论
        4.3.1 流动相加入苹果酸后对 5-mdC、5-hmdC、5-mrC 和 5-hmrC 的 MS 检测
        4.3.2 SPE程序的优化
        4.3.3 方法学评估
        4.3.4 方法的应用
            4.3.4.1 同时测定 CRC 患者尿液中的 5-mdC、5-hmdC、5-mrC 和 5-hmrC
            4.3.4.2 5-mdC、5-hmdC、5-mrC 和 5-hmrC 的定量
    4.4 小结
第五章 总结与展望
    5.1 总结
    5.2 展望
参考文献
作者简历
致谢



本文编号：3750844