HL-60细胞Nucleostemin表达下调对PI3K/AKT/mTOR信号通路相关蛋白的影响

发布时间：2023-03-04 14:20

　　目的:探讨HL-60白血病细胞中核干细胞因子Nucleostemin(NS)表达下调对其非依赖P53通路的候选途径PI3K/AKT/mTOR中相关蛋白表达是否有影响。方法:采用重组慢病毒表达载体NS-RNAi-GV248转染至P53缺失型HL-60细胞中干扰NS的表达。用Western blot技术评价转染后HL-60细胞NS蛋白的表达水平并检测干扰前后PI3K/AKT/mTOR信号通路中相关蛋白水平的表达变化。结果:重组慢病毒载体NS-RNAi-GV248成功感染了HL-60细胞,在荧光显微镜下可见到GFP荧光表达较强(<80%)。Western blot结果显示,NS蛋白表达明显下调,干扰表达有效;干扰HL-60细胞中NS的表达后AKT、p-AKT、p70s6k、p-p70s6k蛋白变化不明显(t₁=2.31,P=0.074;t₂=3.62,P=0.069;t₃=1.60,P=0.251;t₄=2.72,P=0.113),而mTOR复合物中的GβL蛋白表达明显下调(t=15.01,P=0....

【文章页数】：5 页

【文章目录】：
材料和方法
    试剂与仪器
    细胞培养及计数
    重组慢病毒NS-RNAi-GV248感染目的细胞HL-60
    蛋白质印迹 (Western blot) 检测
    统计学分析
结果
    重组慢病毒载体NS-RNAi-GV248转染HL-60细胞
    干扰HL-60细胞中NS表达后所测相关蛋白相对表达量
讨论



本文编号：3754438