NRP-1对结肠癌SW480细胞上皮-间质转化以及对结肠癌的生物学影响

发布时间：2023-03-04 15:52

　　目的 成功沉默结肠癌SW480细胞中神经纤毛蛋白-1(Neuropilin-1,NRP-1)后,对 TGF-β1 诱导的结肠癌上皮-间质转化(Epithlial mesenchymal transition,EMT)以及对结肠癌增殖、迁移的影响。方法 培养结肠癌SW480细胞至对数生长期后,对细胞进行如下处理:1分别用Ong/mL、2ng/mL、5ng/mL、10ng/mL浓度的转化生长因子β1(TGF-β1)刺激结肠癌SW480细胞24h及48h诱导其EMT过程后,采用CCK-8实验观察细胞的增殖情况;并用Western blot检测E-钙粘蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)表达量的变化。2用lip2000将siRNA转染至SW480细胞中,根据转染物质的不同,实验分为了三组,即空白对照组,无意义序列组(转染siRNA-NControl)和转染组(转染siRNA-NRP-1)。转染后常规培养48h,分别通过实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR,RT-qPCR)和 Western blot检测每组细胞中 NRP-1的mRNA和...

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【学位级别】：硕士

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摘要
abstract
引言
第1章 实验研究
    1.1 材料与方法
        1.1.1 相关材料
        1.1.2 实验方法
        1.1.3 统计学处理
    1.2 实验结果
        1.2.1 TGF-β1对细胞增殖情况的影响
        1.2.2 检测E-cadherin、Vimentin的蛋白表达量验证SW480细胞是否发生EMT
        1.2.3 转染SiRNA-NRP-1后,NRP-1的mRNA相对表达量
        1.2.4 转染siRNA-NRP-1后,NRP-1的蛋白含量
        1.2.5 检测NRP-1表达量的不同对TGF-β1诱导EMT的影响
        1.2.6 沉默NRP-1对TGF-β1刺激细胞增殖的影响
        1.2.7 沉默NRP-1对TGF-β1刺激细胞迁移能力的影响
    1.3 讨论
        1.3.1 NRP-1与肿瘤
        1.3.2 siRNA沉默结肠癌SW480细胞株中NRP-1的高表达
        1.3.3 TGF-β1对结肠癌SW480细胞增殖的作用及诱导其发生EMT过程
        1.3.4 沉默NRP-1对TGF-β1诱导的结肠癌SW480细胞的影响。
    1.4 小结
参考文献
结论
第2章 综述 NRPs调控肿瘤上皮-间质转化的研究进展
    2.1 NRPs概述
    2.2 NRPs与TGF-β
        2.2.1 TGF-β概述
        2.2.2 TGF-β与肿瘤
        2.2.3 NRPs对TGF-β通路的调节
    2.3 NRPs与EMT
        2.3.1 EMT概述
        2.3.2 EMT与肿瘤
        2.3.3 NR-Ps对EMT的调节
    2.4 展望
    参考文献
致谢
在学期间研究成果



本文编号：3754564