虫草素靶向DEK调控Akt及Erk1/2信号通路抑制胆管癌增殖和迁移的机制研究

发布时间：2023-03-22 22:37

　　目的:探讨虫草素(Cordycepin)对胆管癌细胞增殖和迁移的抑制作用及其分子机制。材料和方法:MTT法检测不同浓度虫草素对胆管癌细胞活力的抑制作用;平板克隆形成实验检测虫草素对胆管癌细胞集落形成能力的影响;Hoechst33342染色观察虫草素处理后的细胞内凋亡小体的形成情况;AnnexinV/PI双染流式细胞术检测虫草素用药后的细胞凋亡率;划痕愈合实验和Transwell小室迁移实验检测虫草素对胆管癌细胞迁移能力的影响;免疫荧光染色法检测虫草素处理后胆管癌细胞E-Cadherin和Vimentin的表达情况;蛋白印迹实验检测凋亡相关蛋白、EMT标志物蛋白、Akt信号通路和Erk1/2信号通路相关蛋白及DEK蛋白的表达水平;DEK基因沉默后检测胆管癌细胞增殖活力、克隆形成能力和迁移能力;RT-PCR实验检测正常胆管及多种胆管癌细胞系中DEK的mRNA表达水平;免疫组织化学染色法检测人胆管癌组织中DEK和裸鼠荷瘤中E-Cadherin、Vimentin、p-Akt、p-Erk1/2及DEK的表达水平;裸鼠荷瘤实验检测虫草素在体内对胆管癌的抑制作用。结果:1.MTT实验结果显示:用0μ...

【文章页数】：70 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
英文缩写
第一章 前言
第二章 材料与方法
    2.1 实验材料
    2.2 实验方法
    2.3 统计学方法
第三章 结果
    3.1 虫草素显著抑制胆管癌细胞增殖活力和克隆形成能力
    3.2 虫草素诱导胆管癌细胞凋亡
    3.3 虫草素抑制胆管癌细胞的迁移能力
    3.4 虫草素抑制胆管癌细胞EMT的发生
    3.5 虫草素抑制Akt和Erk1/2信号通路
    3.6 DEK在各肿瘤中的表达及虫草素对DEK蛋白的影响
    3.7 DEK在胆管癌中过表达
    3.8 DEK基因沉默抑制胆管癌细胞增殖和迁移
    3.9 DEK基因沉默抑制Akt和Erk1/2信号通路
    3.10 虫草素对裸鼠荷瘤的影响
    3.11 虫草素对裸鼠荷瘤蛋白表达的影响
    3.12 全文机制图
    附图
第四章 讨论
第五章 结论
参考文献
攻读硕士学位期间取得的科研业绩
致谢



本文编号：3767724