PEAK1通过ERK1/2和JAK2信号促进非小细胞肺癌转移和EMT

发布时间：2023-04-10 00:28

　　目的:富集于伪足的非典型激酶1(pesudopodium-enriched atypical kinase 1,PEAK1)是一种具有催化活性的非受体型酪氨酸激酶,其广泛表达于多种组织与器官。本课题拟研究PEAK1在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达情况,探讨其在NSCLC发生发展中的生物学作用,初步探索其可能参与的信号通路,从而为其是否能成为肺癌治疗靶点提供理论依据。方法:一、分析NSCLC组织中PEAK1表达水平和临床病理参数之间的相关性获取东南大学附属中大医院心胸外科经手术切除的102例肺癌组织标本(68例石蜡包埋肺癌组织和34例石蜡包埋癌旁正常组织),免疫组织化学染色分析NSCLC组织和癌旁正常组织中PEAK1表达情况,统计分析PEAK1表达情况与临床病理参数之间的关系。二、探讨PEAK1在NSCLC细胞中增殖、迁移和侵袭中的作用1.用qRT-PCR和Western blot测定五种肺癌细胞株中PEAK1表达水平,选择95D及H1299细胞株进行后期实验。2.用慢病毒载体感染95D细胞和H1299细胞,构建PEAK1过表达及敲除的95D和H1299细胞株,以及相应的空载对照组细...

【文章页数】：81 页

【学位级别】：硕士

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中文摘要
Abstract
缩写词表
前言
第一部分 PEAK1在NSCLC中的表达以及与临床病理参数之间的相关性
    1. 材料
        1.1 主要仪器
        1.2 组织标本
        1.3 主要试剂
    2. 方法
        2.1 免疫组化染色实验步骤
        2.2 免疫组化结果判断
        2.3 统计学方法
    3. 结果
        3.1 免疫组化检测肺癌组织中PEAK1的表达水平
        3.2 NSCLC中PEAK1的表达水平与临床病理参数之间的关系
    4 讨论
第二部分 PEAK1在NSCLC增殖、迁移及侵袭中的作用
    1 材料
        1.1 主要仪器
        1.2 实验材料
        1.3 实验试剂
    2. 方法
        2.1 细胞培养
        2.2 细胞冻存和复苏
        2.3 慢病毒感染细胞
        2.4 qRT-PCR步骤
        2.5 Western blot检测
        2.6 CCK-8 实验
        2.7 划痕实验
        2.8 Transwell侵袭实验
        2.9 裸鼠腹腔转移实验
        2.10 统计学方法
    3 结果
        3.1 PEAK1在肺癌细胞株中的表达水平
        3.2 过表达PEAK1后，NSCLC细胞增殖、迁移和侵袭能力的变化
        3.3 敲除PEAK1后，NSCLC细胞增殖、迁移和侵袭能力的变化
        3.4 PEAK1在NSCLC细胞体内腹腔转移中的作用
    4 讨论
第三部分 PEAK1调控NSCLC细胞迁移、侵袭和转移的初步机制研究
    1 材料
        1.1 主要仪器
        1.2 细胞株
        1.3 实验试剂
    2 实验方法
        2.1 光镜下观察形态学变化
        2.2 qRT-PCR检测方法
        2.3 Western blot实验
        2.4 细胞免疫荧光实验
        2.5 HE染色
        2.6 免疫组化染色
        2.7 统计学方法
    3 结果
        3.1 过表达PEAK1诱导NSCLC细胞获得EMT特性
        3.2 敲除PEAK1基因诱导NSCLC细胞发生MET
        3.3 体内实验也发现PEAK1诱导NSCLC细胞获得EMT特性
        3.4 PEAK1通过JAK2和ERK1/2 信号通路调节NSCLC迁移及侵袭
    4 讨论
References
全文总结
综述
    References
致谢
作者简介



本文编号：3788003