TGF-β1/Smad7信号通路在食管鳞癌上皮间质转化中的作用

发布时间：2023-04-16 12:28

　　目的:探索TGF-β1/Smad7信号通路在哈萨克族食管鳞癌上皮间质转化(EMT)中的作用及其具体机制。方法:运用免疫组织化学方法检测72例哈萨克族食管鳞癌组织及远端对应癌旁组织中TGF-β1及Smad7蛋白的表达。进一步在细胞水平,针对食管鳞癌细胞系Ec9706,基于RNA干扰技术,使用LipofectamineTM2000试剂转染TGF-β1 siRNA。采用qRT-PCR技术检测TGF-β1及Smad7 m RNA表达水平;Western blot技术检测转染后各组TGF-β1、Smad7以及EMT相关蛋白表达水平;MTT、划痕及流式细胞术等方法检测各组细胞转染后的增殖、迁移、凋亡及周期的变化。结果:免疫组织化学检测结果显示,哈萨克族食管鳞癌组织中TGF-β1蛋白表达明显高于远端对应癌旁组织(P<0.05);Smad7蛋白在食管鳞癌组织中的表达明显低于远端对应癌旁组织(P<0.05);TGF-β1与Smad7的表达呈负相关关系(P<0.05,r=-0.253)。转染TGF-β1 siRNA后,Ec9706细胞中TGF-β1 mRNA和蛋白表达量均降低,Smad7...

【文章页数】：64 页

【学位级别】：硕士

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摘要
ABSTRACT
前言
研究内容与方法
    1 研究对象
        1.1 组织标本及细胞系来源
        1.2 干扰序列
        1.3 引物设计与合成
        1.4 主要试剂
        1.5 试剂相关溶液配制
        1.6 主要仪器
    2 内容与方法
        2.1 免疫组织化学方法
        2.2 Ec9706细胞培养
        2.3 siRNA转染步骤
        2.4 实时荧光定量聚合酶链反应
        2.5 Western blot法315
        2.6 MTT法
        2.7 划痕实验
        2.8 细胞凋亡和细胞周期
        2.9 实验室质量控制
    3 结果分析
    4 技术路线
结果
讨论
小结
致谢
参考文献
综述
    参考文献
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学位论文导师评阅表



本文编号：3791367