游离脂肪酸对前列腺癌细胞生物学行为的影响及机制研究

发布时间：2023-04-28 00:04

　　目的观察游离脂肪酸(FFA)对人前列腺癌细胞PC-3生物学行为的影响,并探讨其可能的分子机制。方法将油酸(OA)和棕榈酸(PA)2:1混合后,作用于体外培养的人前列腺癌细胞PC-3,q RT-PCR、Western Blot及免疫组织化学技术检测前列腺癌细胞FABP4、PPARγ、VEGF-A、m TOR、Vimentin和AMPK的m RNA及蛋白表达水平;流式细胞仪检测对细胞周期的影响,Transwell法检测对PC-3细胞迁移和侵袭能力的影响;运用细胞转染和RNA干扰技术上/下调PPARγ,以及FFA作用于PC-3细胞的同时,下调PPARγ,检测VEGF-A、m TOR和Vimentin的m RNA表达水平,检测对PC-3细胞内脂质含量的影响,检测对细胞周期的影响,检测对细胞迁移和侵袭能力的影响。运用细胞转染和RNA干扰技术上/下调AMPK,以及FFA作用于PC-3细胞的同时,下调AMPK,检测对PC-3细胞生物学行为的影响。结果1.1.5 m M FFA作用于PC-3细胞48小时后,FABP4、PPARγ、VEGF-A的m RNA及蛋白表达水平显著高于空白对照组,差异均有统计学...

【文章页数】：64 页

【学位级别】：硕士

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摘要
abstract
中英文缩略词对照表
前言
实验材料
    1.1 细胞系和质粒
    1.2 相关试剂及仪器
    1.3 各种引物序列表
实验方法
    2.1 细胞培养
    2.2 细胞生物学行为实验
    2.3 细胞生化指标检测
    2.4 细胞系RNA提取
    2.5 cDNA合成及逆转录
    2.6 实时定量PCR
    2.7 细胞系的蛋白提取
    2.8 蛋白浓度测定(BCA法)
    2.9 Western Blot
    2.10 活化菌株
    2.11 质粒提取
    2.12 统计方法
结果
    3.1 FFA对PC-3细胞生物学行为的影响
    3.2 上调PPARγ对PC-3细胞生物学行为的影响
    3.3 下调PPARγ对PC-3细胞生物学行为的影响
    3.4 FFA干预的同时下调PPARγ,对PC-3细胞生物学行为的影响
    3.5 AMPK对PC-3细胞生物学行为的影响
讨论
    4.1 高浓度FFA可导致PC-3细胞增殖、侵袭、迁移能力增加
    4.2 FABP4/PPARγ在高浓度FFA促进PC-3细胞生物学行为改变过程中的作用
    4.3 AMPK对PC-3细胞生物学行为的影响
    4.4 AMPK和PPARγ之间的作用
结论
参考文献
综述
    参考文献
致谢
作者简介
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本文编号：3803339