通过调控PI3K/Akt信号通路增强人肺癌顺铂耐药细胞对顺铂敏感性的研究
发布时间：2023-05-06 05:33
顺铂(Cisplatin)是肺癌临床治疗中较为常用的一种化疗药物,尤其对小细胞肺癌效果明显。然而,在一段时间的治疗后,由于癌细胞的产生的耐药性限制了Cisplatin的应用。本研究利用梯度增加Cisplatin浓度的方式诱导得到了3株肺癌细胞耐药株—-H446/DDP、H460/DDP及A549/DDP细胞。在获得耐药株后,通过MTT法、CCK8法、流式细胞术及Westemblot技术深入的研究了PI3K/Akt信号通路与肺癌细胞Cisplatin间的关系,并从细胞水平上证明抑制PI3K/Akt信号通路能有效的逆转肺癌细胞的Cisplatin耐药。经过研究得到以下结果：1)结果显示,3株细胞均获得了cisplatin耐药的特性。cisplatin对H446/DDP. H460/DDP及A549/DDP等3株耐药细胞的IC50值分别为27.0±1.3 μmol/L、 53.0±5.2 pmol/L及70.7±3.5μmol/L,而cisplatin对其亲本细胞的IC50值分别为2.4μmol/L、8.8±1.5 μmol/L及11.4±2.8μmol/L,耐药指数分别为1I.3、6.1及...
【文章页数】：106 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
Abstracts
缩略词对照表
1 前言
1.1、肺癌的研究概况
1.1.1 肺癌
1.1.2 肺癌治疗的研究现状
1.1.2.1 外科治疗
1.1.2.2 放射治疗
1.1.2.3 化学治疗
1.1.2.4 靶向治疗
1.1.2.5 免疫治疗
1.2 PI3K/Akt信号通路与肺癌
1.2.1 PI3K/Akt信号通路
1.2.2 PI3K/Akt信号通路与肺癌
1.2.3 PI3K/Akt通路和肺癌化疗耐药
1.2.3.1 mTOR的异常激活
1.2.3.2 Bcl-2家族
1.2.3.3 IKK/NF-κB通路
1.2.3.4 PI3K/Akt通路与细胞周期
1.3 肺癌治疗中的联合用药
1.3.1 肺癌的Cisplatin耐药
1.3.2 肺癌的靶向药耐药
1.3.3 为什么要联合用药
1.3.4 PI3K/Akt信号通路在联合用药中的应用
1.4 课题的研究目的和意义
2 材料与方法
2.1 材料
2.1.1 肺癌细胞株
2.1.2 实验试剂
2.1.3 常用培养基及缓冲液的配置
2.1.4 主要仪器
2.2 技术路线及实验方法
2.2.1 技术路线
2.2.2 实验方法
2.2.2.1 肺癌耐药细胞系的诱导
2.2.2.2 Cisplatin耐药指数测定
2.2.2.3 肺癌细生长曲线的测定
2.2.2.4 PI3K/Akt通路活性检测
2.2.2.5 PI3K抑制剂对Akt活性的影响
2.2.2.6 PI3K抑制剂逆转细胞Cisplatin耐药实验
2.2.2.7 caspase-3、caspase-8及caspase-9活性检测
2.2.2.8 PI3K抑制剂对PI3K/Akt信号通路的影响
3 结果与分析
3.1 肺癌耐药细胞系的诱导
3.1.1 肺癌细胞Cisplatin耐药株的诱导
3.1.2 细胞的生长曲线
3.2 肺癌细胞中的PI3K/Akt信号通路
3.2.1 Cisplatin对肺癌细胞中Akt激活的影响
3.2.2 PI3K抑制剂对肺癌耐药细胞中Akt活性的影响
3.3 PI3K抑制剂逆转细胞Cisplatin耐药
3.3.1 MTT检测药物对细胞增殖的抑制率
3.3.2 流式细胞术检测药物对细胞凋亡率的影响
3.3.3 Wortmannin增强caspase家族的活化
3.4 PI3K/Akt信号通路与细胞耐药的分子机制
4 讨论
4.1 肺癌耐药细胞株的诱导
4.2 细胞的生长速率
4.3 Cisplatin激活PI3K/Akt信号通路
4.4 依赖Bcl-2/Bax的线粒体凋亡途径
4.5 展望
5 结论
参考文献
附录
致谢
综述 PI3K/Akt信号通路在肺癌中的研究进展
参考文献
本文编号：3809131
【文章页数】：106 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
Abstracts
缩略词对照表
1 前言
1.1、肺癌的研究概况
1.1.1 肺癌
1.1.2 肺癌治疗的研究现状
1.1.2.1 外科治疗
1.1.2.2 放射治疗
1.1.2.3 化学治疗
1.1.2.4 靶向治疗
1.1.2.5 免疫治疗
1.2 PI3K/Akt信号通路与肺癌
1.2.1 PI3K/Akt信号通路
1.2.2 PI3K/Akt信号通路与肺癌
1.2.3 PI3K/Akt通路和肺癌化疗耐药
1.2.3.1 mTOR的异常激活
1.2.3.2 Bcl-2家族
1.2.3.3 IKK/NF-κB通路
1.2.3.4 PI3K/Akt通路与细胞周期
1.3 肺癌治疗中的联合用药
1.3.1 肺癌的Cisplatin耐药
1.3.2 肺癌的靶向药耐药
1.3.3 为什么要联合用药
1.3.4 PI3K/Akt信号通路在联合用药中的应用
1.4 课题的研究目的和意义
2 材料与方法
2.1 材料
2.1.1 肺癌细胞株
2.1.2 实验试剂
2.1.3 常用培养基及缓冲液的配置
2.1.4 主要仪器
2.2 技术路线及实验方法
2.2.1 技术路线
2.2.2 实验方法
2.2.2.1 肺癌耐药细胞系的诱导
2.2.2.2 Cisplatin耐药指数测定
2.2.2.3 肺癌细生长曲线的测定
2.2.2.4 PI3K/Akt通路活性检测
2.2.2.5 PI3K抑制剂对Akt活性的影响
2.2.2.6 PI3K抑制剂逆转细胞Cisplatin耐药实验
2.2.2.7 caspase-3、caspase-8及caspase-9活性检测
2.2.2.8 PI3K抑制剂对PI3K/Akt信号通路的影响
3 结果与分析
3.1 肺癌耐药细胞系的诱导
3.1.1 肺癌细胞Cisplatin耐药株的诱导
3.1.2 细胞的生长曲线
3.2 肺癌细胞中的PI3K/Akt信号通路
3.2.1 Cisplatin对肺癌细胞中Akt激活的影响
3.2.2 PI3K抑制剂对肺癌耐药细胞中Akt活性的影响
3.3 PI3K抑制剂逆转细胞Cisplatin耐药
3.3.1 MTT检测药物对细胞增殖的抑制率
3.3.2 流式细胞术检测药物对细胞凋亡率的影响
3.3.3 Wortmannin增强caspase家族的活化
3.4 PI3K/Akt信号通路与细胞耐药的分子机制
4 讨论
4.1 肺癌耐药细胞株的诱导
4.2 细胞的生长速率
4.3 Cisplatin激活PI3K/Akt信号通路
4.4 依赖Bcl-2/Bax的线粒体凋亡途径
4.5 展望
5 结论
参考文献
附录
致谢
综述 PI3K/Akt信号通路在肺癌中的研究进展
参考文献
本文编号：3809131
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/zlx/3809131.html
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