NY-ESO-1作为多发性骨髓瘤治疗靶点实验研究

发布时间：2024-02-21 09:21

　　背景:多发性骨髓瘤(MM)是一种恶性浆细胞肿瘤,其特征是骨髓中浆细胞异常增生,并引起造血抑制和溶骨性病变。随着高剂量化疗和造血干细胞移植的发展,以及蛋白酶体抑制剂和免疫调节剂等新药的应用,治疗缓解率提高、患者生存期延长。而微小残留的骨髓瘤细胞是其逃脱传统化疗、MM复发和进展的重要因素。因而仍需选择有效的高特异性抗原靶点,以减少微残、巩固维持治疗是MM目前的研究重点之一。纽约食管鳞状上皮癌抗原1(New York esophageal squamous cell carcinoma 1,NY-ESO-1)是癌-睾丸抗原(cancer-testis antigens,CTA)家族中的重要一员,是迄今发现的最具免疫原性的肿瘤抗原之一,能诱导细胞和体液免疫应答。NY-ESO-1在MM、神经母细胞瘤、黑色素瘤、卵巢癌等多种类型肿瘤中广泛表达,并且在肿瘤中的表达情况与肿瘤类型、恶性程度及预后有一定的相关性。研究发现,MM患者细胞遗传学异常或预后较差时NY-ESO-1表达增高。在肿瘤进展期和复发期,患者体内NY-ESO-1特异性抗体滴度也显著增高,且这种抗体能介导杀伤MM细胞。由此可见,NY-ESO...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1-1人MM细胞系U266、RPMI8226中NY-ESO-1表达鉴定（A）q-PCR检测NY-ESO-1mRNA的表达；（B）WB检测NY-ESO-1蛋白的表达

的稳定感染LV-shNC的U266细胞和未感染的U266细胞作为对照组，操作方法同本章实验方法4。10．统计学处理实验中所有结果用均值±标准差表示，并通过GraphPadPrism5.0软件进行统计学处理。实验组与对照组组间差异及不同实验组组间差异比较用t....

图1-2重组质粒测序结果图

进行重组质粒DNA基因测序，所得测序结果与插入序列比对，如图1-2所示，可查得完整所需序列，说明重组质粒构建成功。3.慢病毒包装及感染U266细胞将构建成功的慢病毒重组质粒分别与慢病毒辅助包装质粒psPAX2、pMD2.G一起共转染293T细胞，转染后48....

图1-3慢病毒感染U266细胞后72h（上排为普通显微镜，下排为荧光显微镜，放大倍数：200×）

染U266细胞后72h（上排为普通显微镜，下排为荧光显微镜，放染细胞株的筛选及鉴定释法将感染成功的U266细胞接种至96孔板筛选阳性感染获得稳定感染株（图1-4A）。随后通过qPCR和WB分别Y-ESO-1的下调效果，qPCR检测结果显示：与未感染组相....

图1-4慢病毒稳定感染细胞株的筛选及鉴定（A）筛选稳定感染的U266细胞株克隆（分别摄于筛选后第4天、第20天，左侧视野为普通显微镜镜下观，右侧视野为荧光显微镜镜下观，放大倍数：200×）；（B）q-PCR检测NY-ESO-1mRNA

图1-4慢病毒稳定感染细胞株的筛选及鉴定（A）筛选稳定感染的U266细胞株克隆（分别摄于筛选后第4天、第20天，左侧视野为普通显微镜镜下观，右侧视野为荧光显微镜镜下观，放大倍数：200×）；（B）q-PCR检测NY-ESO-1mRNA的表达；（C）WB检测....

本文编号：3905282