NQO1及其抑制剂在胃癌预后评估及靶向治疗中的作用研究

发布时间：2024-05-17 13:50

　　研究背景：胃癌隶属消化道恶性肿瘤范畴,起源于胃黏膜上皮,其发病率在消化道恶性肿瘤中位居首位。NQO1蛋白又称醌氧化还原酶,不仅是一种黄色素酶,也是一种Ⅱ相解毒酶,其发生缺陷后,与肿瘤发生的易感性密切相关。目前研究表明,NQO1蛋白在恶性肿瘤中呈高表达,并与患者的不良预后紧密相连,但其在胃癌组织中的报道较少。p-拉帕醌(β-lapachone)是NQO1蛋白的一种有效抑制剂,提取于中南美洲的天然产物紫檀树的树皮,研究表明,p-拉帕醌可诱导前列腺癌、乳腺癌、白血病等多种肿瘤细胞的凋亡,也可作为一种治疗结肠癌和前列腺癌的放射增敏剂,但其在胃癌中的作用和机制尚不清楚。因此,深入研究NQO1蛋白及其抑制剂p-拉帕醌在胃癌预后评估及靶向治疗中的作用具有重要的临床指导意义。研究目的：探讨NQO1蛋白在胃癌组织中过表达的临床病理学意义,并通过体外分子生物学实验研究NQO1抑制剂β-拉帕醌对SGC-7901和AGS胃癌细胞生物学行为的影响,分析其杀伤胃癌细胞的作用及分子机制,为胃癌的临床靶向治疗及预后评估提供新的靶点。材料和方法：应用免疫组化方法在53例癌旁正常组织、31例胃黏膜不典型增生组织和203例...

【文章页数】：114 页

【学位级别】：博士

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摘要
Abstract
缩略词
1 研究背景
2 材料与方法
    2.1 临床资料
    2.2 实验方法
        2.2.1 细胞复苏与培养
        2.2.2 MTT
            2.2.2.1 原理
            2.2.2.2 MTT检测
            2.2.2.3 MTT筛选药物浓度
        2.2.3 平板克隆实验
        2.2.4 qRT-PCR
            2.2.4.1 总RNA提取
            2.2.4.2 逆转录(RT)
            2.2.4.3 聚合酶链反应(PCR)
            2.2.4.4 电泳
        2.2.5 Western Blot
            2.2.5.1 细胞裂解及蛋白提取
            2.2.5.2 SDS-PAGE电泳
            2.2.5.3 转膜
            2.2.5.4 免疫杂交与ECL化学发光检测
        2.2.6 划痕实验
        2.2.7 细胞免疫荧光
        2.2.8 免疫组化检测胃癌及病变组织中NQO1蛋白的表达
        2.2.9 流式细胞术Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡
        2.2.10 Hoechst 33342实验
        2.2.11 统计学处理
3 结果
    3.1 NQO1蛋白在胃癌组织中明显高表达
    3.2 NQO1蛋白过表达与胃癌的临床生物学行为特点之间的关系
    3.3 NQO1蛋白过表达与胃癌患者生存期的相关性
    3.4 Cox比例风险模型分析胃癌患者生存期的影响因素
    3.5 NQO1蛋白过表达在早期和晚期胃癌患者生存期分析中的相关性
    3.6 β-lapachone抑制胃癌细胞增殖的作用及机制
    3.7 β-lapachone抑制SGC-7901和AGS胃癌细胞中NQO1蛋白的表达
    3.8 β-lapachone通过caspase途径诱导SGC7901和AGS胃癌细胞的凋亡
    3.9 β-lapachone通过抑制EMT降低胃癌细胞的侵袭转移能力
        3.9.1 β-lapachone抑制SGC-7901和AGS细胞的迁移
        3.9.2 β-lapachone抑制SGC-7901和AGS胃癌细胞EMT的形成
    3.10 β-lapachone通过抑制PI3K/Akt/mTOR通路体外杀伤胃癌细胞
4 讨论
    4.1 NQO1高表达与胃癌的预后密切相关,可能成为胃癌不良预后的有效分子标志物
    4.2 β-lapachone通过抑制Skp2和DEK的表达抑制SGC-7901和AGS胃癌细胞的增殖
    4.3 β-lapachone体外抑制胃癌细胞的侵袭与迁移能力
    4.4 β-lapachone体外诱导胃癌细胞的凋亡
    4.5 PI3K/Akt/mTOR通路参与了 β-拉帕醌体外杀伤胃癌细胞的分子机制
5 结论
参考文献
攻读博士学位期间的科研业绩
综述
    1 前言
    2 胃癌的分子靶向治疗
        2.1 细胞表面受体抑制剂
        2.2 细胞周期相关的靶点药物
        2.3 表观遗传变化的抑制剂
        2.4 下游信号抑制剂
        2.5 迁移机制的相关分子靶点
    3 结语与展望
参考文献



本文编号：3975683