帕博西尼逆转人乳腺癌MCF-7/DOX细胞对多柔比星的耐药性

发布时间：2024-12-21 23:43

　　 目的:研究细胞周期蛋白依赖性激酶4/6（cyclin-dependent protein kinase4/6,CDK4/6）抑制剂帕博西尼（palbociclib,PAL）对乳腺癌MCF-7/多柔比星（doxorubicin,DOX）细胞耐药性的逆转作用,并探讨药物转运体ATP结合盒蛋白B1（ATP binding cassette protein B1,ABCB1）在其中的作用机制。方法:采用CCK-8法检测PAL对亲本MCF-7及耐药MCF-7/DOX细胞DOX敏感性的影响;FCM法检测PAL对MCF-7及MCF-7/DOX细胞中DOX蓄积浓度的影响。构建稳定转入ABCB 1基因的MDCKⅡ细胞模型,采用药物跨膜转运实验检测PAL对药物转运体ABCB1介导的DOX外排功能的影响。实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测PAL对MCF-7及MCF-7/DOX细胞中ABCB1 mRNA及蛋白表达水平的影响。结果:0.2与0.4μmol/L的PAL可使DOX对MCF-7/DOX细胞的半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC_50<...

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 质粒、试剂和仪器
    1.2 细胞培养及耐药MCF-7/DOX细胞的制备
    1.3 CCK-8法检测PAL单药或联合DOX对MCF-7和MCF-7/DOX细胞增殖的影响
    1.4 FCM法检测PAL对MCF-7和MCF-7/DOX细胞中DOX蓄积浓度的影响
    1.5 MDCKⅡ-ABCB1细胞的制备
    1.6 药物跨膜转运实验检测ABCB1对DOX的外排功能
    1.7 实时荧光定量PCR法检测ABCB1 m RNA的表达水平
    1.8 蛋白质印迹法检测ABCB1蛋白的表达水平
    1.9 统计学方法
2 结果
    2.1 PAL对MCF-7及MCF-7/DOX细胞DOX敏感性的影响
    2.2 PAL对MCF-7及MCF-7/DOX细胞中DOX蓄积浓度的影响
    2.3 PAL对ABCB1介导的DOX外排功能的影响
    2.4 PAL对ABCB1转运体表达水平的影响
3 讨论



本文编号：4019097