AKT通过乳酸调控NMHCⅡ在乳腺癌中作用的研究

发布时间：2024-12-22 03:27

　　乳腺癌是一种严重危害女性健康的恶性肿瘤,其发病率逐年上升,并呈现出年轻化趋势。乳腺癌患者死亡的首要原因是乳腺癌转移和治疗的失败。因此明确乳腺癌的转移机制,对于乳腺癌的防治具有非常重要的意义。肿瘤微环境对肿瘤的转移起到非常重要的作用。肿瘤细胞与正常细胞相比,通过糖酵解途径消耗更多的葡萄糖并产生少量的ATP和大量的乳酸,肿瘤的这种特征被称为“瓦博格效应”(Warburg effect)。乳酸堆积会造成肿瘤微环境的酸化。有报道显示,乳酸作为肿瘤微环境里的一种化学信号,乳酸的含量和远距离转移的发生率之间存在着正相关关系。丝氨酸/苏氨酸激酶AKT,可通过对基因表达和酶活性的调节,充分诱导肿瘤细胞中的Warburg效应,促进糖酵解和乳酸的生成。非肌细胞肌球蛋白II(Nonmuscle Myosin II,NM II)是细胞骨架的重要组成成分。作为分子马达蛋白家族中的一员,它不仅为细胞的运动提供动力,还参与细胞的各种生理活动,如细胞迁移与粘附、胞质分裂、囊泡分泌等。NM II是一个六聚体的结构,由重链(NMHC)和轻链(NMLC)组成的,其中NMLC对NMHC起着稳定和调节作用,NMHC通过磷酸化活化...

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【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
第1章 文献综述
    1.1 非肌细胞肌球蛋白概述
        1.1.1 非肌细胞肌球蛋白Ⅱ（Nonmuscle myosinⅡ, NMⅡ）
        1.1.2 非肌细胞肌球蛋白ⅡA（Nonmuscle myosinⅡA, NMⅡA）与细胞运动
    1.2 肿瘤微环境
        1.2.1 肿瘤细胞代谢
        1.2.2 肿瘤的酸性环境
        1.2.3 肿瘤细胞代谢与肿瘤转移
            1.2.3.1 肿瘤转移
            1.2.3.2 肿瘤的酸性环境与肿瘤转移
        1.2.4 AKT在肿瘤细胞代谢和转移中的作用
    1.3 酸性环境、NMHC与肿瘤转移
第2章 实验材料与方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 细胞株
        2.1.2 标本
        2.1.3 主要试剂
        2.1.4 主要设备与仪器
        2.1.5 主要试剂配制
    2.2 实验方法
        2.2.1 细胞培养与传代
        2.2.2 细胞复苏
        2.2.3 细胞冻存
        2.2.4 免疫组织化学染色
        2.2.5 CCK-8 法绘制细胞生长曲线
        2.2.6 细胞划痕实验
        2.2.7 细胞周期检测
        2.2.8 Western Blot
        2.2.9 细胞铺展实验
        2.2.10 Transwell小室体外侵袭实验
        2.2.11 上清液乳酸含量检测
    2.3 统计学分析
第3章 结果
    3.1 乳腺组织中，pAKT、LDH和NMHCIIA的表达情况
        3.1.1 pAKT在乳腺组织中的表达
        3.1.2 LDH在乳腺组织中的表达
        3.1.3 乳腺组织中NMHCIIA的表达情况
    3.2 乳腺癌MCF-7 细胞中，通过抑制AKT来降低乳酸含量，从而观察酸性环境对NMHCIIA的调节作用及MCF-7 细胞生物学行为的影响
        3.2.1 加入MK2206后，pAKT的变化
        3.2.2 AKT被抑制后，培养液中乳酸变化
        3.2.3 AKT被抑制后，NMHCIIA表达的变化
        3.2.4 各组细胞MK2206处理后生物学行为的变化
            3.2.4.1 抑制AKT表达对细胞的增殖能力的影响
            3.2.4.2 抑制AKT表达对细胞周期的影响
            3.2.4.3 抑制AKT表达对细胞铺展的影响
            3.2.4.4 抑制AKT表达对各组细胞迁移能力的影响
            3.2.4.5 抑制AKT表达后各组细胞侵袭力的变化
第4章 讨论
    4.1 乳腺组织中AKT与乳酸的表达情况
    4.2 抑制AKT影响乳酸代谢对NMHC IIA的作用
    4.3 AKT通过乳酸活化NMHC II影响乳腺癌细胞的生物学行为
        4.3.1 AKT通过乳酸活化NMHC II影响乳腺癌细胞的增殖能力
        4.3.2 AKT通过乳酸活化NMHC II影响乳腺癌细胞迁移和侵袭
第5章 结论
参考文献
作者简介及在读期间取得的科研成果
致谢



本文编号：4019358