IL-7通过P53介导的AMPK/mTOR信号通路抑制非小细胞肺癌自噬

发布时间：2025-01-18 16:11

　　目的:肺癌是威胁人类健康的主要癌症之一,近年来发病率不断升高,这主要由于缺少早期筛查手段,以及有效治疗手段。白细胞介素7主要调节B细胞和T细胞成熟,此外它在肿瘤细胞中还发挥双重作用。IL-7在非小细胞肺癌中发挥促肿瘤细胞增值抗凋亡及促淋巴管生成作用,而在其他肿瘤中扮演抗肿瘤的角色。自噬会影响肿瘤细胞的物质代谢,与凋亡、上皮间质转化存在相互作用,还影响肿瘤细胞对放化疗药物的敏感性。因此,本文旨在探索IL-7对非小细胞肺癌自噬调控的机制。研究方法:1、用蛋白印迹(WB)的方法检测各组蛋白质表达的变化。按照细胞培养的规范方法培养A549细胞,用IL-7 24ng/ml处理A549细胞8小时,12小时,并与对照组做对比,采用核浆分离的蛋白抽提方法提取p53蛋白,用普通蛋白质抽提方法提取总蛋白和磷酸化蛋白,用WB的方法检测各实验组与对照组蛋白变化差异,用SPSS软件分析差异有否统计学意义。使用Anti-IL-7R抗体100ng/ml与IL-7 24ng/ml处理细胞12小时,观察阻断细胞的IL-7受体能否阻断IL-7产生的效应。接下来使用p53抑制剂PFT-α和AMPK抑制剂Compound C刺...

【文章页数】：37 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图3.1.A549细胞接受IL-7处理8小时，12小时以及接受IL-7+A-IL-7R处理后的p53核浆分离A.IL-7作用细胞12小时后，观察到与对照组相比细胞核p53含量没有明显变化，而细胞浆p53

6中国医科大学硕士学位论文3结果3.1IL-7介导P53蛋白从细胞核向细胞浆转移用IL-7对A549细胞进行诱导，培养0小时，8小时，12小时后按照试剂盒的说明书对细胞核与细胞浆蛋白分别抽提。我们观察到在未处理的情况下，A549细胞的p53蛋白在细胞核含量较高，细胞浆中有少量p5....

图3.2IL-7处理细胞12小时后对总蛋白的影响

7中国医科大学硕士学位论文核浆转移效应，右侧柱状图分析了蛋白条带结果。C.IL-7作用细胞8小时和12小时都可以观察到p53mRNA水平增加。*代表P<0.05，**代表P<0.01。3.2IL-7影响AMPK和mTOR的磷酸化蛋白表达对A549细胞采用IL-7以及A-IL-7R....

图3.3使用CompoundC证明AMPK是mTOR的上游图A.CompoundC会导致A549细胞的p-AMPK/AMPK降低，p-mTOR/mTOR升高，这一效应与IL-7

8中国医科大学硕士学位论文图3.3使用CompoundC证明AMPK是mTOR的上游图A.CompoundC会导致A549细胞的p-AMPK/AMPK降低，p-mTOR/mTOR升高，这一效应与IL-7相似，右侧的柱状图表达了这一结果。图B.CompoundC不引起p53细胞核与....

图3.4使用PFT-α证明p53是AMPK,mTOR的上游分子图A.使用PFT-α抑制p53后，观察到细胞p53的核蛋白与浆蛋白都减少，右侧的柱状图表达了这一结果

9中国医科大学硕士学位论文图3.4使用PFT-α证明p53是AMPK,mTOR的上游分子图A.使用PFT-α抑制p53后，观察到细胞p53的核蛋白与浆蛋白都减少，右侧的柱状图表达了这一结果。B.使用PFT-α使总蛋白的p-AMPK/AMPK增加，p-mTOR/mTOR减少，右侧的....

本文编号：4028834