微RNA-375通过抑制YAP基因表达调控CIK细胞对宫颈癌SiHa细胞的体外杀伤效应

发布时间：2017-05-31 22:11

  本文关键词：微RNA-375通过抑制YAP基因表达调控CIK细胞对宫颈癌SiHa细胞的体外杀伤效应，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:探讨微RNA-375(microRNA-375,miR-375)参与细胞因子诱导杀伤(cytokine-induced killer,CIK)细胞杀伤宫颈癌SiHa细胞过程的调控作用,并确定miR-375发挥功能的靶基因及其分子机制。方法:分离健康者外周血单个核细胞,在体外用多种细胞因子培养14 d后诱导成CIK细胞。收集CIK细胞作为效应细胞,FCM法分析其表型特征,并采用CCK-8法测定CIK细胞对宫颈癌SiHa细胞的杀伤效应。实时荧光定量PCR法检测与CIK细胞共培养前后宫颈癌SiHa细胞中miR-375的表达水平。CCK-8法检测miR-375模拟物转染后SiHa细胞的活性变化,以及CIK细胞共培养对转染miR-375抑制子后SiHa细胞的生长抑制作用。细胞免疫荧光法和蛋白质印迹法检测与CIK细胞共培养后,转染miR-375抑制子的SiHa细胞中Yes相关蛋白(Yes-associated protein,YAP)的表达情况。结果:与CIK细胞共培养24、48和72 h后,SiHa细胞的生长抑制率分别为(22.97±3.54)%、(37.48±3.64)%和(54.32±4.25)%,SiHa细胞中miR-375的相对表达量分别约为共培养前的1.39、1.57和2.68倍。转染miR-375模拟物后,SiHa细胞的活性显著降低(P0.001)。转染miR-375抑制子后,CIK细胞抑制SiHa细胞生长的效应显著降低(P0.001)。YAP蛋白在SiHa细胞中大量表达,且主要集中于细胞核。与CIK细胞共培养后,转染miR-375抑制子的SiHa细胞中YAP蛋白表达显著上调(P0.01)。结论:CIK可有效杀伤宫颈癌SiHa细胞。miR-375作为一种抑癌因子,在CIK细胞杀伤宫颈癌SiHa细胞过程中可能通过下调YAP基因的表达来发挥作用。
【作者单位】： 青岛大学医学院附属青岛市立医院妇科;青岛大学医学院附属青岛市立医院肿瘤干细胞实验室;
【关键词】： 子宫颈肿瘤 细胞因子诱导杀伤细胞 微RNAs 基因表达调控 MiRNA- Yes相关蛋白
【分类号】：R737.33
【正文快照】： 目前,针对宫颈癌主要采用手术和放疗为主、近年来,随着分子生物学及肿瘤免疫学的发化疗为辅的联合治疗方案。其中,根治性手术仅展,肿瘤免疫治疗在控制肿瘤生长及改善患者生局限于ⅡA期及以下的早期患者,而ⅡB期及以存方面具有潜在的优势。最新研究显示,细胞因上的中晚期患者由

【共引文献】

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本文编号：410764