塞来昔布和5-FU联用对人胃癌细胞增殖以及VEGF和Survivin表达的影响

发布时间：2017-06-15 15:10

  本文关键词：塞来昔布和5-FU联用对人胃癌细胞增殖以及VEGF和Survivin表达的影响，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：背景及目的：胃癌在我国为高发性恶性肿瘤,发病率及死亡率都居于前三位,但胃癌的早期无明显的症状,大部分的患者发现时或出现明显的临床症状时,大部分已经是进展期,手术切除为其首选的治疗方式,随着科技的进一步的发展,出现新的治疗方法,如分子靶向治疗,术后的放化疗等等综合治疗,其中化疗占有重要的地位。近年来,发现非甾体抗炎药物(NASIDs)对于消化道肿瘤有抑制的作用,但由于非甾体抗炎药物有增加出血,溃疡等相关胃肠道并发症的发生,因此,一般不作为抗肿瘤的首选药物。在此基础上,选择性环氧合酶-2(COX-2)抑制剂,其缺乏非甾体抗炎药物相关的胃肠道副作用,同时具有抑制肿瘤的作用。塞来昔布(Celecoxib)是选择性环氧合酶-2(COX-2)抑制剂类经典药物之一,目前研究表明,塞来昔布有一定的促进肿瘤细胞的凋亡,抑制肿瘤细胞的增殖的作用。相关的研究集中于结肠肿瘤细胞的研究,然而,对于胃癌方面的研究,相对偏少,其对于胃癌细胞的作用及机理尚不明了。因此,本研究旨在探讨：1、塞来昔布以及与5-FU联合应用时,能否抑制肿瘤细胞的增殖,促进凋亡的作用：2、塞来昔布以及与5-FU联合应用时,对肿瘤生长相关的基因VEGF及Survivin表达的影响。方法：首先对人胃癌BGC-823细胞进行体外培养,运用MTT的方法,检测不同浓度下塞来昔布作用不同时间,对于BGC-823细胞增殖的影响,并计算相应的IC50值；应用普通PCR法检测塞来昔布,5-FU,及塞来昔布联用5-FU对BGC-823细胞VEGF和Survivin基因表达的影响,观察单独用药及联合用药的效果。结果三组及以上计量资料采用方差分析,两样本均数采用t检验,数据以Mean±SD表示,数据处理采用SPSS 19.0统计学软件。以P0.05为有统计学差异。结果：MTT结果显示：塞来昔布及5-FU均具有抑制肿瘤的作用,随着作用时间的延长,对于肿瘤的抑制作用增强,两者具有药物的协同增敏作用。1,塞来昔布的IC50,相同干预浓度塞来昔布抑制BGC-823增殖时,其24 h,48 h,72 h的IC50分别为：(255.36±21.1)umoL/L、(149.12±2.29)umoL/L、(89.95±1.61)umoL/L。2,各组的抑制率：5-FU组的24h,48h,72h的抑制率分别为(52.13±0.5,67.42±0.3,89.26±0.3)；塞来昔布组的24h,48h,72h的抑制率分别为(24.53+0.2,51.87士0.1,71.37±0.2)；塞来昔布与5-FU联合组的24h,48h,72h的抑制率分别为(86.89+0.1,91.39±0.2,95.39+0.3)。普通PCR法检测结果显示,塞来昔布、5-FU均具有抑制VEGF和Survivin基因的表达,在联合应用效果抑制效果最强,三者之间的结果统计学显示有明显的差异。结论：塞来昔布可抑制人胃癌BGC-823细胞的增殖,随着浓度的增加及作用时间的延长,对于肿瘤细胞的抑制作用增强；塞来昔布与5-FU联合应用后,对于肿瘤的细胞的抑制作用明显的强化。塞来昔布可抑制人胃癌BGC-823细胞的VEGF和Survivin的表达,与5-FU联合应用能够对胃癌细胞起到协同抑制增殖的作用。因此,塞来昔布具有一定抗肿瘤作用,可能对胃癌患者具有一定的临床应用价值,其作用机理有待于进一步进行深入的研究。
【关键词】：胃癌细胞 塞来昔布 5-FU 增殖 VEGF Survivin
【学位授予单位】：扬州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R735.2
【目录】：

• 摘要2-4
• Abstract4-7
• 英文缩略词表7-8
• 前言8-11
• 材料与方法11-21
• 1.1 主要相关试剂及仪器11-13
• 1.2 细胞的复苏,传代,冻存13-14
• 1.3 MTT法检查塞来昔布、5-FU对人胃癌BGC-823增殖的影响14-16
• 1.3.1 实验细胞株14
• 1.3.2 细胞计数14
• 1.3.3 浓度设置14-15
• 1.3.4 MTT实验具体的步骤15-16
• 1.4 聚合酶链反应(PCR)16-20
• 1.4.1 细胞培养及加药16-17
• 1.4.2 细胞RNA的提取17-18
• 1.4.3 逆转录反应18
• 1.4.4 聚合酶链反应18-19
• 1.4.5 凝胶电泳及成像19-20
• 1.5 统计学的处理20-21
• 结果21-23
• 2.1 MTT结果21-22
• 2.2 PCR结果22-23
• 讨论23-26
• 结论26-27
• 参考文献27-32
• 附录(主要仪器及试剂)32-33
• 综述33-41
• 参考文献38-41
• 致谢41-42
• 攻读学位期间发表的学术论文目录42-43

【参考文献】

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本文编号：452765