miR-185对胃癌细胞SGC-7901侵袭迁移及CDC42基因表达的影响
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【摘要】:目的:探讨mi R-185对胃癌细胞SGC-7901侵袭迁移所起的作用,进一步阐述mi R-185对CDC42基因的影响。方法:1.采用前期mi RNA微阵列芯片结果,选取目的mi RNA,q RT-PCR技术进一步验证芯片结果。2.采用瞬时转染方法,将mi R-185 mimics和无义序列分别转染至SGC-7901细胞,倒置荧光显微镜观察细胞转染情况,q RT-PCR检测细胞转染效率。胃癌细胞转染后侵袭和迁移能力的变化则通过Trans-well小室法和划痕实验观察。生物信息学软件预测目的mi RNA的靶基因,q RT-PCR检测转染后各组中CDC42基因的m RNA转录水平,Western blot检测其蛋白表达水平。结果:1.q RT-PCR验证备选mi RNA的基因芯片结果。2.选取mi R-185作为研究对象,利用生物信息学筛选出CDC42为其靶基因。胃癌细胞SGC-7901转染24小时后,倒置荧光显微镜观察结果显示细胞的转染效率约为80%。转染mi R-185 mimics后,q RT-PCR检测结果显示SGC-7901细胞中mi R-185表达水平显著升高。Trans-well小室法和划痕试验检测结果显示,转染mi R-185 mimics后细胞侵袭和迁移能力均下降。q RT-PCR、Western blot检测结果显示,mi R-185 mimics组较转染阴性组、转染试剂组及空白对照组CDC42基因的m RNA及蛋白表达水平均降低。结论:1、mi R-185过表达可抑制胃癌细胞SGC-7901侵袭和迁移能力。2、mi R-185过表达能够下调CDC42基因m RNA及蛋白质的表达,mi R-185可能通过CDC42基因在胃癌发生发展中发挥重要作用。3、mi R-185在胃癌中可能扮演着抑癌基因作用。
【关键词】:胃癌 mi R-185 CDC42
【学位授予单位】:南华大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:R735.2
【目录】:
- 主要英文缩略语索4-5
- 摘要5-7
- Abstract7-10
- 第一章 前言10-14
- 第二章 实验材料14-18
- 第三章 实验方法18-27
- 第四章 实验结果27-38
- 第五章 讨论38-42
- 第六章 结论42-44
- 参考文献44-50
- 综述50-60
- 参考文献55-60
- 攻读学位期间的科研成果60-62
- 致谢62
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本文关键词:miR-185对胃癌细胞SGC-7901侵袭迁移及CDC42基因表达的影响,由笔耕文化传播整理发布。
,本文编号:469027
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