XPD基因对SMMC-7721细胞增殖、迁移及PTEN基因表达的影响

发布时间：2017-06-21 15:14

  本文关键词：XPD基因对SMMC-7721细胞增殖、迁移及PTEN基因表达的影响，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:探讨人剪切修复基因XPD(Xeroderma pigmentosum D)转染至人肝癌SMMC-7721细胞后,对肿瘤细胞增殖、迁移、凋亡以及PTEN基因表达的影响。方法:本实验使用脂质体Lipofectamine TM 2000作为载体介质,用瞬时转染法将空载质粒pEGFP-N2和重组质粒pEGFP-N2-XPD转染入人肝癌细胞株SMMC-7721细胞内。实验分为四个组:空白对照组、脂质体组、pEGFP-N2组、pEGFP-N2-XPD组。通过荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达;蛋白印迹(Western blotting)法检测肿瘤细胞中XPD和PTEN蛋白的表达水平;MTT法检测肿瘤细胞的增殖水平;Transwell实验观测肿瘤细胞迁移能力的改变;流式细胞仪检测肿瘤细胞的凋亡水平。结果:转染空载质粒pEGFP-N2和重组质粒pEGFP-N2-XPD的人肝癌SMMC-7721细胞在荧光显微镜下均可见绿色荧光,表明转染有效。pEGFP-N2-XPD组与其它三组相比:XPD和PTEN蛋白的表达量均明显增加(p0.01);细胞的增殖能力均明显减弱(p0.01);细胞的迁移能力均明显下降(p0.05);细胞的凋亡率均明显上升(p0.01)。结论:XPD能促进PTEN基因的表达,并能抑制肝癌细胞的增殖、迁移,促进其凋亡。
【关键词】：肝癌 XPD PTEN 增殖 迁移 凋亡
【学位授予单位】：南昌大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R735.7
【目录】：

• 摘要3-4
• ABSTRACT4-7
• 中英文缩略词表7-8
• 第1章 前言8-10
• 第2章 材料和方法10-24
• 2.1 材料10-15
• 2.1.1 细胞株、空载及重组质粒10
• 2.1.2 主要材料及试剂10-11
• 2.1.3 主要仪器设备11
• 2.1.4 自配试剂11-15
• 2.2 方法15-24
• 2.2.1 细胞培养相关技术15-16
• 2.2.2 质粒提取16-18
• 2.2.3 分组及质粒的瞬时转染18-19
• 2.2.4 Western blot检测相应蛋白的表达19-21
• 2.2.5 MTT检测细胞的增殖水平变化21-22
• 2.2.6 Transwell小室检测迁移能力22
• 2.2.7 流式细胞仪检测细胞的凋亡情况22-23
• 2.2.8 统计学方法分析23-24
• 第3章 结果24-29
• 3.1 质粒转染结果24
• 3.2 各组细胞XPD、PTEN蛋白表达结果24-25
• 3.3 MTT检测细胞增殖水平25-26
• 3.4 TRANSWELL迁移结果26-27
• 3.5 流式细胞仪检测细胞凋亡水平27-29
• 第4章 讨论29-33
• 第5章 结论33-34
• 致谢34-35
• 参考文献35-39
• 攻读学位期间的研究成果39-40
• 综述40-47
• 参考文献44-47

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