卵巢癌腹水与卵巢癌耐药的相关性研究

发布时间：2017-06-25 14:04

  本文关键词：卵巢癌腹水与卵巢癌耐药的相关性研究，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:卵巢癌在妇科恶性肿瘤中的病死率很高。全面的细胞减灭术和术后辅以铂类加紫杉醇为基础的联合化疗是其标准治疗方案。虽然在治疗上有了很大的进步,但最终仍会出现疾病的复发或转移。究其根源,主要是因为化疗耐药的产生。如何预测卵巢癌耐药,指导卵巢癌患者的治疗,在卵巢癌的治疗研究中成为了一个热点问题。晚期卵巢癌患者常伴有恶性腹水的产生,并且腹水中的细胞因子与患者的无进展生存和预后密切相关。此外,卵巢腹水可促进肿瘤细胞的增殖,并可抑制细胞的凋亡。由此我们推测,卵巢癌腹水可能促进卵巢癌耐药的发生。因此,在本研究中我们首先检测卵巢癌腹水对卵巢癌细胞生物学行为的影响,然后探究卵巢癌腹水与卵巢癌化疗耐药的相关性。方法:1.搜集23例卵巢癌腹水上清,用不同的腹水培养卵巢癌SKOV3细胞,并分为实验组(腹水培养组)和对照组。2.采用MTT实验、细胞划痕修复实验和Transwell侵袭实验检测卵巢癌腹水对SKOV3细胞的增殖、迁移和侵袭能力的影响。3.对实验组和对照组的细胞行不同浓度化疗药物的处理,并采用MTT实验检测各组肿瘤细胞对紫杉醇敏感性的变化。4.化疗药物处理24h后,采用流式细胞仪检测不同组内SKOV3细胞的凋亡情况。5.采用Western Blot检测耐药蛋白在对照组、腹水处理组和腹水肿瘤细胞组的表达水平。结果:1.MTT实验和细胞划痕修复实验结果显示,腹水可促进卵巢癌SKOV3细胞的增殖,并可促使细胞向划痕区域明显迁移(P0.05)。Transwell侵袭实验结果显示,腹水培养组穿膜细胞数与SKOV3空白对照组相比,差异无统计学意义(P0.05),腹水没有增加SKOV3细胞的侵袭能力。2.对实验组(腹水肿瘤细胞组与腹水培养组)和对照组的细胞行不同浓度化疗药物处理48h后,采用MTT实验检测各组细胞对紫杉醇的敏感性。结果显示,在相同药物浓度下,腹水肿瘤细胞组和腹水组的细胞抑制率明显低于对照组,而腹水肿瘤细胞组又明显低于腹水组。经腹水处理后SKOV3细胞对紫杉醇的敏感性显著下降(P0.05),与对照组相比,下降了约2.3倍。3.流式细胞仪检测各组细胞的凋亡,结果显示,腹水培养组与对照组相比,细胞凋亡率无明显变化(P0.05);紫杉醇作用24h后,腹水培养组的凋亡率明显低于对照组(P0.05)。4.卵巢癌腹水可以增加肿瘤细胞内耐药蛋白P-gp和MRP1的表达。结论:1.卵巢癌腹水可促进卵巢癌SKOV3细胞的增殖和迁移。2.卵巢癌腹水可增加卵巢癌SKOV3细胞对紫杉醇的耐药性,减少细胞凋亡。3.卵巢癌腹水可增加肿瘤细胞耐药蛋白的表达。
【关键词】：腹水 卵巢肿瘤 耐药 耐药蛋白 紫杉醇
【学位授予单位】：天津医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R737.31
【目录】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-10
• 缩略语/符号说明10-12
• 前言12-14
• 研究现状、成果12-13
• 研究目的、方法13-14
• 对象和方法14-24
• 1.1 材料和方法14-17
• 1.1.1 病例与标本来源14
• 1.1.2 细胞系14
• 1.1.3 主要仪器设备14
• 1.1.4 主要材料与试剂14-15
• 1.1.5 实验配液15-17
• 1.2 实验方法17-23
• 1.2.1 SKOV3细胞培养17
• 1.2.2 卵巢癌腹水的分离17-18
• 1.2.3 卵巢癌腹水肿瘤细胞的分离与纯化18
• 1.2.4 MTT法测细胞增殖18-19
• 1.2.5 MTT法检测腹水作用后肿瘤细胞对紫杉醇敏感性的影响19
• 1.2.6 划痕修复实验19
• 1.2.7 Transwell侵袭实验19-20
• 1.2.8 流式细胞术检测腹水处理后在紫杉醇作用下对SKOV3细胞凋亡的影响20
• 1.2.9 Western Blot20-23
• 1.3 统计分析23-24
• 结果24-33
• 2.1 腹水患者的临床病理特征24-25
• 2.2 卵巢癌腹水对卵巢癌SKOV3细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响25-28
• 2.3 卵巢癌腹水对SKOV3细胞药物敏感性的影响28-29
• 2.4 卵巢癌腹水对SKOV3细胞凋亡的影响29-31
• 2.5 卵巢癌腹水对肿瘤细胞内耐药蛋白表达的影响31-33
• 讨论33-37
• 结论37-38
• 参考文献38-44
• 发表论文和参加科研情况说明44-45
• 综述45-60
• 综述参考文献53-60
• 致谢60-62
• 个人简历62

  本文关键词：卵巢癌腹水与卵巢癌耐药的相关性研究，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：482346