钙网蛋白对鼻咽癌细胞EMT的影响

发布时间：2017-06-26 06:21

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【摘要】：[目的]本课题拟探讨钙网蛋白在鼻咽癌组织中的表达,并进一步研究其对鼻咽癌细胞EMT的影响。[方法]1.采用免疫组化方法检测钙网蛋白(Calreticulin)在鼻咽癌组织中的表达情况,并分析其表达的临床意义;2.构建pcDNA3.1(+)/Calreticulin真核表达载体,采用阳离子脂质体瞬时转染鼻咽癌CNE2细胞(以pcDNA3.1(+)载体为对照),通过Western blot检测CNE2细胞中Calreticulin的表达;3.光镜观察Calreticulin高表达对CNE2细胞形态的影响,利用迁移侵袭实验检测Calreticulin高表达对CNE2细胞迁移侵袭能力的影响;4.选用Western blot检测转染后鼻咽癌CNE2细胞中EMT相关蛋白Vimentin、MMP-9、TGF-β以及E-cad的表达情况。[结果]1.Calreticulin在鼻咽癌组织中的阳性表达率为82.69%(43/52),鼻咽部良性病变组织为19.29%(11/57),Calreticulin在鼻咽癌组织中表达显著增高(P0.05);Calreticulin的表达率与鼻咽癌分期及淋巴结转移呈正相关(r=0.457、r=0.382,P0.05)。2.转染后鼻咽癌CNE2细胞中Calreticulin表达明显升高,CNE2细胞的形态由扁平、鹅卵石样上皮形态,逐渐演变为长梭形、纤维细胞样形态,呈现典型的EMT现象,且CNE2细胞的迁移侵袭能力较对照组明显增强(P0.05)。3.Western blot检测结果显示,Calreticulin在CNE2细胞中表达升高后,细胞中E-cad表达显著降低(P0.05)。而Vimentin、MMP-9、TGF-β三种蛋白的表达则显著升高(P0.05)。结果提示,Calreticulin表达升高能够促进鼻咽癌CNE2细胞发生EMT,增强鼻咽癌CNE2细胞的迁移及侵袭能力。[结论]Calreticulin在鼻咽癌组织中表达显著增高,与鼻咽癌分期及淋巴结转移呈正相关;Calreticulin可促进鼻咽癌CNE2细胞发生EMT,增强鼻咽癌细胞的迁移和侵袭能力。
【关键词】：鼻咽癌 钙网蛋白 上皮-间质转化 迁移和侵袭
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R739.63
【目录】：

• 摘要4-6
• Abstract6-8
• 中英文缩略词对照表8-10
• 第1章 绪论10-14
• 第2章 实验材料与试验方法14-32
• 2.1 实验材料14-17
• 2.2 实验方法17-32
• 第3章 实验结果32-44
• 3.1 Calreticulin 在鼻咽癌组织中的表达意义32-33
• 3.2 Calreticulin 高表达对鼻咽癌 CNE2 细胞 EMT 的影响33-40
• 3.3 Calreticulin 高表达对 CNE2 细胞迁移与侵袭的影响40-44
• 第4章 讨论44-50
• 第5章 结论50-52
• 参考文献52-58
• 文献综述 钙网蛋白与肿瘤的相关研究进展58-70
• 参考文献64-70
• 攻读硕士学位期间研究成果70-72
• 本研究的基金资助项目72-74
• 致谢74

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