鼻咽癌精确放疗后远处转移分析及分子机制研究

发布时间：2017-06-26 18:21

  本文关键词：鼻咽癌精确放疗后远处转移分析及分子机制研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的回顾我科鼻咽癌患者临床资料,分析鼻咽癌精确放疗后的生存,预后及影响远处转移的因素,探讨鼻咽癌远处转移分子机制及临床危险因素。前期采用高通量全基因组芯片筛选技术发现鼻咽癌转移组织中MAZ高表达。但鼻咽癌患者放疗后转移是否与MAZ高表达有关,目前尚不清楚,为此,我们在扩大鼻咽癌组织标本量基础上通过免疫组化验证MAZ表达与临床结果的相关性;通过Real-time PCR和Western Blot检测MAZ在鼻咽癌高低转移细胞系表达;在细胞系中验证MAZ具有促进鼻咽癌转移的作用,并初步探讨MAZ参与鼻咽癌转移的分子机制,为临床防治鼻咽癌转移提供新的靶点和策略。方法1.收集2006.01--2011.10西京医院放疗科233例来自中国西北地区鼻咽癌患者,所有患者治疗前均行鼻咽颅底全颈CT或MRI扫描,全程接受IMRT放疗或联合以铂类为主的化疗。2.收集80例鼻咽癌患者鼻咽部肿瘤组织标本,利用免疫组织化学法检测MAZ表达,分析MAZ与临床资料和预后的相关性;通过Real-time PCR和Western Blot检测MAZ在鼻咽癌高低转移细胞系表达。3.构建MAZ慢病毒载体,转染鼻咽癌细胞SUNE1-5-8F和SUNE1-6-10B。采用Transwell和划痕实验检测MAZ对鼻咽癌细胞侵袭、转移能力的影响。4.采用免疫共沉淀(Co-IP)、Real-time PCR和Western Blot检测MAZ表达与c-Myc的相互作用及下游转移相关基因的表达。结果1.本组鼻咽癌患者5年的无进展生存率、总生存率、无远处转移生存率及无局部区域复发生存率分别为56.8%、68.2%、68.7%及92.8%。全组病历中死亡74例,肿瘤相关死亡67例,占全部死亡病例的90.5%,其中有14例(20.9%)因鼻咽部位大出血死亡,53例(79.1%)死于远处转移。治疗后局部区域复发26例(11.2%),远处转移64例(27.5%),远处转移是鼻咽癌放疗失败的主要原因,单因素及多因素分析均显示:N分期是影响无远处转移生存率的独立危险因素。2.免疫组织化学染色显示,转移组鼻咽癌组织中MAZ表达明显高于无转移组(P0.01),与芯片筛选结果一致;MAZ表达与临床资料相关性分析显示:在远处转移组鼻咽癌组织中,MAZ表达升高与N分期有关(P0.05)。Real-time PCR和Western Blot检测显示,MAZ在高转移鼻咽癌细胞系呈高表达。3.成功构建MAZ敲除慢病毒载体稳定表达细胞系,敲除MAZ可抑制鼻咽癌的转移及侵袭能力。4.免疫共沉淀(Co-IP)、Real-time PCR和Western Blot提示MAZ可能通过与c-Myc相互作用,促进鼻咽癌转移,其作用与调节MMP9、TGF-β以及COX-2表达有关。结论1.西北地区非高发区鼻咽癌精确放化疗后5年局部区域控制率超过90%,总生存率68.2%,远处转移是其治疗失败主要原因。无远处转移生存率与N分期有关。在高转移的鼻咽癌组织细胞及高转移细胞系中,MAZ的表达显著上调,与鼻咽癌的N分期密切相关。2.MAZ表达促进鼻咽癌细胞的转移及侵袭。3.MAZ可能通过与c-Myc相互作用,并通过调节MMP9、TGF-β以及COX-2促进鼻咽癌的转移过程,是鼻咽癌临床治疗又一新的靶点,具有一定理论指导意义及临床应用价值。
【关键词】：鼻咽癌 调强适形/调强放射治疗 远处转移 MAZ基因
【学位授予单位】：第四军医大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R739.63
【目录】：

• 缩略语表5-7
• 中文摘要7-10
• ABSTRACT10-13
• 前言13-15
• 文献回顾15-20
• 第一部分 临床研究20-34
• 1 材料20-22
• 1.1 研究对象与临床资料20-22
• 2 方法22-23
• 2.1 放疗方法22
• 2.2 化疗22-23
• 2.3 随访23
• 2.4 统计学处理23
• 3 结果23-29
• 3.1 生存结果23-24
• 3.2 单因素分析结果24-26
• 3.3 多因素分析结果26
• 3.4 失败模式26-27
• 3.5 远处转移分析27-28
• 3.6 不良反应28-29
• 4 讨论29-33
• 4.1 鼻咽癌精确放疗后生存及失败模式29-30
• 4.2 预后因素30-31
• 4.3 远处转移是影响生存的主要原因31-33
• 小结33-34
• 第二部分 实验研究34-68
• 1 材料34-35
• 1.1 仪器和设备34
• 1.2 试剂34-35
• 1.3 细胞系35
• 2 方法35-50
• 2.1 组织标本收集35-36
• 2.2 组织脱水36
• 2.3 免疫组织化学法检测MAZ表达36-38
• 2.4 MAZ介导鼻咽癌转移的功能验证38-46
• 2.5 MAZ通过与c-Myc相互作用促进鼻咽癌的转移46-50
• 2.6 统计学方法50
• 3 结果50-63
• 3.1 免疫组化50-51
• 3.2 鼻咽癌细胞系中MAZ的表达51
• 3.3 MAZ对人鼻咽癌细胞转移的影响51-55
• 3.4 MAZ通过与c-Myc相互作用促进鼻咽癌的转移55-63
• 4 讨论63-67
• 4.1 MAZ的表达验证及功能研究63-65
• 4.2 MAZ促进鼻咽癌转移机制65-67
• 小结67-68
• 参考文献68-79
• 个人简历和研究成果79-80
• 致谢80

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 林少俊;陈传本;韩露;郑葳;陈梅;潘建基;;鼻咽癌调强放射治疗230例初步结果[J];福建医科大学学报;2007年01期

2 王双乐,江远仕,黄河澄,杨强;上皮钙黏附蛋白、黏附分子CD44H、基质金属蛋白酶-3、肿瘤转移抑制基因nm23H_1和血管内皮生长因子的表达与鼻咽癌转移的关系[J];临床耳鼻咽喉科杂志;2004年08期

3 张学成;石梅;肖锋;魏立春;孙朝阳;朱勇;陆军;刘晓莉;;局部晚期鼻咽癌73例放化疗综合治疗的临床研究[J];中华肿瘤防治杂志;2007年22期

  本文关键词：鼻咽癌精确放疗后远处转移分析及分子机制研究，，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：487161