中药芦荟大黄素光动力治疗对人乳腺癌细胞MCF-7增殖、凋亡、侵袭、迁移的体外观测

发布时间：2017-06-29 01:07

  本文关键词：中药芦荟大黄素光动力治疗对人乳腺癌细胞MCF-7增殖、凋亡、侵袭、迁移的体外观测，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的：通过研究芦荟大黄素(aloe emodin, AE)复合光动力对人乳腺癌MCF-7细胞增殖、凋亡、侵袭、迁移的影响,探讨AE-PDT的作用机制。方法：AE-PDT对人乳腺癌MCF-7细胞的毒性作用用WST-8检测；Edu染色和克隆实验检测细胞的增殖状态;细胞的凋亡被Anne-V/PI双染流式和Hoechst染色检测;JC-1染色通过绿色荧光/红色荧光的比值反应线粒体膜电位及凋亡情况;Transwell实验观察细胞迁移、侵袭的情况；活性氧物质(ROS)的水平用DCFH-DA染色检测;Phalloidin-TRITC染色观察细胞骨架F-actin的变化；Western blot检测Caspase-3、Caspase-9、Bcl-2Nrf2、VEGF、MMP2、MMP9、BIP、Chop蛋白表达的变化。结果：WST-8试剂盒检测发现：AE-PDT (AE:10μmol/L,光功率：40mW/cm2,时间：300s)对人乳腺癌MCF-7细胞有明显的毒性作用,其毒性作用呈一定的剂量效应关系(P0.05);Edu和克隆实验发现AE-PDT组细胞的增殖抑制作用较空白对照组、单纯AE组、单纯光照组明显(P0.05)；Anne-V/PI双染流式发现AE -PDT对人乳腺癌MCF7细胞发生死亡的几率明显升高(P0.05);细胞核固缩、碎裂和凋亡小体可在AE-PDT组被Hoechst染色观察;JC-1荧光染色发现AE-PDT组细胞膜电位明显下降(P0.05)；Transwell实验发现AE-PDT对MCF-7细胞迁移、侵袭能力有显著的抑制作用(P0.05)；AE-PDT组ROS水平升高被DCFH-DA荧光染色发现;Phalloidin-TRITC染色观察到AE-PDT可以显著的抑制细胞骨架的重组(P0.05)；Western blot检测发现Caspase-9、BIP、Chop、VEGF、Nrf2 、MMP2 MMP9蛋白表达呈现早期升高晚期恢复原来水平的趋势(P0.05),Caspase-3蛋白表达在晚期到达峰值(P0.05), Bcl-2蛋白表降低(P0.05)。结论：AE-PDT能有效抑制人乳腺癌MCF-7细胞增殖、迁移、侵袭能力被AE-PDT有效抑制并促进其发生凋亡,其作用机制有线粒体和内质网通路参与。
【关键词】：芦荟大黄素 光动力疗法 乳腺癌 线粒体 内质网
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R737.9
【目录】：

• 英汉缩略语名词对照5-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-10
• 前言10-12
• 1 材料与方法12-16
• 1.1 材料12-14
• 1.2 实验方法14-16
• 2 结果16-23
• 2.1 AE-PDT对乳腺癌细胞的细胞毒性作用16-18
• 2.2 AE-PDT通过线粒体途径诱导MCF-7细胞凋亡18-20
• 2.3 线粒体、内质网凋亡相关蛋白检测20
• 2.4 AE-PDT抑制细胞的黏附、侵袭、迁移20-21
• 2.5 细胞骨架21-22
• 2.6 细胞ROS的检测22-23
• 2.7 蛋白Nrf2,VEGF,MMP2和MMP9的表达23
• 3 讨论23-26
• 全文结论26-27
• 参考文献27-30
• 文献综述30-39
• 参考文献34-39
• 致谢39-40
• 硕士期间发表的文章40

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本文编号：495962