病毒巨噬细胞炎性蛋白ⅡN端肽抗脑胶质瘤作用及分子机制

发布时间：2017-06-29 05:19

  本文关键词：病毒巨噬细胞炎性蛋白ⅡN端肽抗脑胶质瘤作用及分子机制，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的：研究病毒巨噬细胞炎性蛋白IIN端肽(NT21MP)对脑胶质瘤的抑制作用及其分子机制。方法： 1.免疫荧光染色检测人脑胶质瘤细胞株U251、SHG-44中CXCR4受体和分化蛋白GFAP的表达情况；2.MTT、划痕和趋化实验检测NT21MP对人脑胶质瘤细胞U251、SHG-44增殖、迁移和侵袭能力；3.流式细胞技术检测NT21MP对人脑胶质瘤细胞U251、SHG-44细胞周期和凋亡的影响；4.实时定量PCR技术(qRT-PCR)检测NT21MP对人脑胶质瘤细胞周期调控分子(CyclinD1、CDK4)和凋亡相关分子(Bak1、Bcl-2、Bax)的表达变化；5.蛋白印迹技术(Western blotting)检测周期调控蛋白(CyclinD1、CDK4)、凋亡相关蛋白(Bak1、Bcl-2、 Bax、Caspase3)的变化；6.通过qRT-PCR筛选高表达CXCR4脑胶质瘤细胞株；7.利用RNA干扰技术下调CXCR4表达,通过体外活性检测确认NT21MP是否通过阻滞CXCR4受体信号发挥抗脑胶质瘤作用：CXCR4干扰后,通过划痕、趋化实验检测NT21MP对细胞迁移侵袭的影响；通过流式细胞技术检测NT21MP对细胞周期和凋亡的影响;通过qRT-PCR和Western blotting检测NT21MP对周期和凋亡相关分子调控的影响；8.构建脑胶质瘤裸鼠原位和皮下模型,检测NT21MP对肿瘤生长的抑制作用；9.HE染色检测肿瘤组织形态变化。结果：1.SHG-44和U251细胞均表达CXCR4; 2.NT21MP抑制SDF-la诱导的细胞增殖,且呈剂量依赖性(P0.05), NT21MP抑制SDF-1a诱导的细胞迁移和侵袭(P0.05); 3. NT21MP阻滞SDF-1a诱导的脑胶质瘤细胞细胞周期于G0/G1期,促进细胞的凋亡(P0.05); 4.NT21MP上调凋亡相关蛋白(Bak1、 Caspase3)的表达,下调Bcl-2/Bax和周期调控分子(CyclinD1、CDK4)的表达(P0.05)；5.干扰SHG44细胞中CXCR4后,NT21MP对SDF-1a诱导的迁移侵袭抑制率明显减弱(P0.05),对细胞周期和细胞凋亡的调控率明显下降(P0.05),对细胞周期和凋亡相关分子和蛋白的调控率均明显下降(P0.05)；6.NT21MP体内可以明显抑制小鼠脑胶质瘤的生长(P0.05),其肿瘤抑癌率为60.7%；7.HE染色进一步说明了NT21MP可以明显抑制脑胶质瘤的生长(P0.05)。结论：1.NT21MP通过阻滞SDF-1a/CXCR4生物轴,抑制脑胶质瘤细胞的增殖、迁移和侵袭,诱导肿瘤细胞向正常星形胶质样细胞分化；2.NT21MP通过上调凋亡蛋白(Bak1、Caspase3)的表达,抑制Bcl-2/Bax和周期调控分子(CyclinD1、 CDK4)的表达,阻滞细胞周期从G1期向S期过渡,抑制脑胶质瘤细胞增殖和促进凋亡,从而发挥抗脑胶质瘤作用。
【关键词】：脑胶质瘤 病毒巨噬细胞炎性蛋白Ⅱ N端肽 CXCR4 SHG-44 U251
【学位授予单位】：蚌埠医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R739.41
【目录】：

• 摘要5-7
• Abstract7-9
• 前言9-13
• 材料和仪器13-16
• 实验方法16-29
• 实验结果29-52
• 讨论52-57
• 结论57-58
• 参考文献58-64
• 致谢64-65
• 附录A 英文缩略词65-66
• 附录B 主要试剂配制66-67
• 附录C 个人简历及发表文章67-68
• 附录D 综述68-78
• 参考文献74-78
• 附件78-81

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 窦长武;;树突状细胞介导的抗脑胶质瘤的免疫治疗进展[J];内蒙古医学院学报;2007年06期

2 周永兴;周舒;;卡氮芥与铜铁制剂联合用于抗脑胶质瘤的动物实验[J];中日友好医院学报;1993年03期

3 史泓浏;陈忠平;;人树突状融合细胞诱导体外抗脑胶质瘤活性的研究[J];中国神经肿瘤杂志;2004年03期

4 缪伟锋;吴一平;喻永涛;姚建社;羊正祥;;载多烯紫杉醇的转铁蛋白修饰脂质体的制备及其体外抗脑胶质瘤的作用[J];上海交通大学学报(医学版);2013年12期

5 吕林林;许丽娜;彭金咏;;抗脑胶质瘤中药的研究进展[J];中国现代应用药学;2014年08期

6 杨天明,黄庆玖,雍延平,丛晓东;苯醋酸抗脑胶质瘤颅内移植实验研究[J];南京铁道医学院学报;1999年02期

7 尉双玲;王晓娟;窦长武;;Dendritoma抗脑胶质瘤的免疫治疗研究进展[J];内蒙古医学杂志;2008年01期

8 崔玉琼;杨海城;;中药活性成分抗脑胶质瘤作用机制研究进展[J];中医药信息;2013年03期

9 杜英;陈绍倩;黄玉敏;孙蕾;王鑫;顾巧丽;杨波;董子明;;树突状细胞及exosomes体外诱导抗脑胶质瘤细胞毒活性的研究[J];免疫学杂志;2006年06期

10 卢旺盛,周晓平,王建军,刘建民,岳志健,洪波;腺病毒介导PTEN基因抗脑胶质瘤作用的实验研究[J];肿瘤防治杂志;2004年05期

中国重要报纸全文数据库 前1条

1 衣晓峰;光动力疗法抗脑胶质瘤机制被揭示[N];健康报;2007年

中国硕士学位论文全文数据库 前1条

1 朱丽华;病毒巨噬细胞炎性蛋白ⅡN端肽抗脑胶质瘤作用及分子机制[D];蚌埠医学院;2015年

  本文关键词：病毒巨噬细胞炎性蛋白ⅡN端肽抗脑胶质瘤作用及分子机制，，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：496723