ECHS1基因在肝癌细胞迁移中的作用及其机制研究

发布时间：2017-07-02 02:14

  本文关键词：ECHS1基因在肝癌细胞迁移中的作用及其机制研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：背景和目的:肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)是一种发病率高、病程短、且生存率极低的恶性肿瘤,占肿瘤致死病因的第二位,仅次于肺癌。大部分肝癌患者就诊时已发现肝癌浸润和转移,严重影响预后和生存,目前尚无有效的治疗肝癌的方法,近年来分子基因靶向治疗恶性肿瘤成为医学研究热点。本课题主要探索烯脂酰辅酶A水合酶短链1(Short chain enoyl-CoA hydratase,ECHS1)对肝癌细胞迁移能力的影响及其相关机制。方法:首先应用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术构建稳定干扰ECHS1基因的肝癌细胞株HepG2和Huh7,Western Blot检测其干扰效果。随后应用细胞划痕实验和Transwell实验检测ECHS1干扰后的两组肝癌细胞迁移情况。为探索其相关机制,RT-PCR检测比较HepG2细胞干扰组和对照组中细胞迁移相关的多种基因mRNA相对表达量,最后利用Western Blot方法研究细胞迁移相关蛋白的表达水平。结果:成功构建了两组干扰ECHS1表达的肝癌细胞株HepG2和Huh7(HepG2-si ECHS1及其对照细胞株HepG2-p U6、Huh7-siECHS1及其对照细胞株Huh7-pLV)),Western Blot验证两组细胞干扰效果显著(P0.05)。细胞划痕实验和Transwell实验结果显示ECHS1干扰后的肝癌细胞迁移能力减弱。RT-PCR和Western Blot提示肝癌细胞干扰ECHS1后β3-Integrin、p-FAK、p-ERK蛋白表达水平降低,差异有统计学意义(P0.05)。结论:综上所述,ECHS1促进肝癌细胞迁移,并可能通过整合素信号通路进行调控。
【关键词】：肝癌 ECHS1 小干扰RNA 迁移
【学位授予单位】：南昌大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R735.7
【目录】：

• 摘要3-4
• ABSTRACT4-8
• 中英文缩略词表8-9
• 第1章 前言9-12
• 第2章 材料与方法12-22
• 2.1 相关稳转细胞株的建立12-18
• 2.1.1 材料12-14
• 2.1.2 方法14-18
• 2.2 稳转细胞迁移能力研究18-19
• 2.2.1 材料18
• 2.2.2 方法18-19
• 2.3 ECHS1参与细胞迁移信号通路调控的研究19-22
• 2.3.1 材料19-20
• 2.3.2 方法20-22
• 第3章 结果与分析22-30
• 3.1 验证HepG2和Huh7细胞株中ECHS1表达及干扰效果22-23
• 3.1.1 结果22-23
• 3.1.2 小结23
• 3.2 干扰ECHS1表达后HepG2和Huh7细胞株迁移能力减弱23-26
• 3.2.1 结果23-26
• 3.2.2 小结26
• 3.3 敲除ECHS1后β3-Integrin表达下降，影响FAK的磷酸化而减弱肝癌细胞的运动性26-30
• 3.3.1 结果26-28
• 3.3.2 小结28-30
• 第4章 讨论30-33
• 第5章 结论与展望33-34
• 5.1 结论33
• 5.2 展望33-34
• 致谢34-35
• 参考文献35-39
• 攻读学位期间的研究成果39-40
• 综述40-45
• 参考文献43-45

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前7条

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本文编号：508254