外周血单个核细胞在Sonic hedgehog信号通路中的活化表达

发布时间：2017-07-03 16:26

  本文关键词：外周血单个核细胞在Sonic hedgehog信号通路中的活化表达

  更多相关文章： Sonic hedgehog蛋白 GES-1细胞 MNNG 淋巴细胞

【摘要】：目的:探讨Sonic hedgehog(Shh)信号通路阻断抗体(Shh Ab)对外周血单个核细胞(PBMCs)抗胃癌MC细胞作用的表达及影响。方法:复苏GES-1细胞,待细胞生长至70~80%进行诱导,加入不含血清和双抗的DMEM5ml及稀释为2×10-1mol/L的MNNG,避光培养24h,更换含血清及双抗的DMEM,7d左右不贴壁细胞大量脱落,残留的贴壁细胞继续培养,长满后消化并传代,此时的细胞为MC细胞,并与Ficoll法对正常人(体检各项指标均正常)PBMCs进行密度梯度分离建立共培养体系;于共培养体系中加入Shh Ab,RT-PCR观察Shh、Gli-1基因的表达并进行半定量数据分析;在共培养体系中加入Shh阻断抗体,流式细胞术检测CD3、CD5、CD69分子表达。结果:GES-1细胞的形态发生显著变化,显微镜下呈大小不一的多角形、多核形细胞,胞体变大,紧密排列并呈团块状生长,RT-PCR:Gli-1m RNA在MC+Shh Ab细胞组值为0.2845±0.0025,低于MC细胞组的0.5167±0.0109(P0.05),GES-1细胞组基因表达阴性;流式细胞:GES-1细胞组CD3+细胞数较少,MNNG诱导组和MC细胞组CD3+细胞数显著增多,GES-1细胞组和MNNG诱导组均未见CD69+细胞,MC细胞组CD69+细胞数显著增多,GES-1细胞组、MNNG诱导组和MC细胞组CD5+细胞数均处于低水平,Shh Ab增强PBMCs对MC细胞的杀伤。结论:Shh Ab可促进PBMCs的活化,并增强PBMCs抗亚硝酰胺类化合物致癌机制的作用。
【关键词】：Sonic hedgehog蛋白 GES-1细胞 MNNG 淋巴细胞
【学位授予单位】：山西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R735.2
【目录】：

• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-9
• 常用缩写词中英文对照表9-10
• 前言10-12
• 1 材料与方法12-18
• 1.1 实验材料12
• 1.2 实验仪器12-13
• 1.3 试剂配置与细胞培养13-15
• 1.4 细胞分组15-16
• 1.5 RT-PCR检测Shh、Gli-1mRNA16
• 1.6 流式细胞检测活化的PBMCs16
• 1.7 统计学分析方法16-18
• 2 结果18-22
• 2.1 RT-PCR检测Shh、Gli-1mRNA18-19
• 2.2 流式细胞检测活化的PBMCs19-22
• 3 讨论22-24
• 4 结论24-25
• 参考文献25-27
• 综述27-39
• 参考文献34-39
• 致谢39-40
• 在学期间承担/参与的科研课题与研究成果40-41
• 个人简历41

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 孙梯业;赵永亮;颜伟;石彦;曾冬竹;余佩武;;CXCR4在VEGF-C介导的胃癌淋巴道转移中的作用[J];第三军医大学学报;2008年02期

2 孙艳;黄莉霞;黄文浩;黄斌;;Sonic hedgehog阻断抗体增强外周血单个核细胞抗宫颈癌HeLa细胞的作用[J];中国病理生理杂志;2011年12期

3 ;CXCR4/SDF-1 axis is involved in lymph node metastasis of gastric carcinoma[J];World Journal of Gastroenterology;2011年19期

  本文关键词：外周血单个核细胞在Sonic hedgehog信号通路中的活化表达

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本文编号：514372