hnRNPD在食管癌中表达及生物学功能研究

发布时间：2017-07-03 16:37

  本文关键词：hnRNPD在食管癌中表达及生物学功能研究

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【摘要】：目的探索不均一核核糖核蛋白D(heterogeneous nuclear ribonucleoprotein D,hn RNPD)在人食管癌组织中的表达。通过沉默和过表达方式研究其在细胞水平对食管癌细胞株生长的影响及作用机制。改变细胞表达水平联合X射线对人食管癌细胞辐射敏感性的影响及可能机制。方法用免疫组织化学染色法探索食管癌肿瘤组织及癌旁组织中hn RNPD的蛋白表达差异;转染si RNA-hn RNPD下调和pc DNA3.1-hn RNPD过表达hn RNPD基因表达水平,采用MTT法及克隆形成实验检测改变hn RNPD基因表达后食管癌细胞生长情况的变化;采用Annexin V-PE双染色法检测基因表达改变后细胞凋亡变化;荧光素酶报告基因检测hn RNPD对SOD2-3’UTR的调控作用;JC-1荧光染色检测细胞在X射线照射后线粒体膜电位变化;Western blot法检测相关蛋白表达水平变化。结果hn RNPD在食管癌组织中高表达;hn RNPD在食管癌肿瘤组织中表达水平与肿瘤分期存在相关性。hn RNPD可以作用于SOD2-3’UTR参与SOD2表达调控并影响其蛋白表达;hn RNPD基因表达的改变能明显影响食管癌细胞的生长和克隆形成能力;下调hn RNPD基因表达后,与对照组相比食管癌细胞Eca-109凋亡明显增加。hn RNPD与SOD2蛋白表达量随X线照射剂量增加而增加;改变基因表达水平联合辐射效应影响食管癌细胞生长存活能力;射线照射引起线粒体膜电位降低,而转染组与非转染组未见明显差异。结论hn RNPD在食管癌组织中高表达并且与肿瘤分期相关;下调hn RNPD基因表达可通过增加细胞凋亡抑制食管癌细胞生长及克隆形成能力。
【关键词】：hnRNPD 食管癌 细胞生长 细胞凋亡
【学位授予单位】：苏州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R735.1
【目录】：

• 摘要4-5
• abstract5-9
• 引言9-16
• 参考文献12-16
• 第一部分hnRNPD在食管癌中的表达研究16-24
• 材料与方法16-18
• 一、材料与仪器16-17
• 二、实验方法17-18
• 结果18-20
• 讨论20-22
• 参考文献22-24
• 第二部分 改变hnRNPD表达水平对食管癌细胞生长的影响及机制研究24-49
• 材料与方法25-34
• 一、材料与仪器25-26
• 二、实验试剂的配制26-27
• 三、实验方法27-34
• 结果34-44
• 讨论44-47
• 参考文献47-49
• 第三部分hnRNPD对食管癌细胞放射敏感性的影响及机制研究49-69
• 材料与方法49-51
• 一、材料与仪器49-50
• 二、实验试剂的配制50
• 三、实验方法50-51
• 结果51-63
• 讨论63-66
• 参考文献66-69
• 综述69-92
• 参考文献83-92
• 攻读学位期间本人出版或公开发表的论著、论文92-94
• 英文缩略词表94-96
• 致谢96-98

【参考文献】

中国博士学位论文全文数据库 前2条

1 陈晓瑞;大鼠死后视网膜细胞核酸降解与死亡时间的关系研究[D];华中科技大学;2006年

2 薛景;转录后调控SOD1增加肿瘤细胞放射效应影响的研究[D];苏州大学;2014年

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本文编号：514416