1-甲基乙内酰脲抑制INS-1细胞增殖及胰岛素分泌的研究

发布时间：2017-07-08 13:22

  本文关键词：1-甲基乙内酰脲抑制INS-1细胞增殖及胰岛素分泌的研究

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【摘要】：目的:探索1-甲基乙内酰脲能否抑制大鼠胰岛素瘤INS-1细胞增殖及激素分泌的作用,探讨其可能的机制,并与生长抑素类似物奥曲肽进行比较方法:采取体外培养的大鼠胰岛素瘤INS-1细胞株。分别用不同浓度的1-甲基乙内酰脲及奥曲肽处理72小时后,通过CCK-8实验检测各组细胞增殖抑制率,做出生长曲线图,并与空白对照组进行比较。FCM流式细胞仪检测各组细胞凋亡及细胞周期分布;放射免疫分析法测定各组细胞胰岛素分泌水平;Western Blot检测各组细胞内cAMP及PKA的表达。结果:1.CCK-8实验结果显示:不同浓度的1-甲基乙内酰脲以及奥曲肽处理细胞72h后,均能抑制大鼠胰岛素瘤INS-1细胞的增殖,并且抑制效果随着浓度的增大逐渐增强。2.FCM及细胞凋亡检测结果显示:相比于空白对照组,1-甲基乙内酰脲、奥曲肽各个浓度组的INS-1细胞凋亡率明显上升,差异有统计学意义(p0.05);相比于空白对照组,1-甲基乙内酰脲、奥曲肽各个浓度组细胞处于G0/G1期的细胞比率均高于正常对照组。3.放射免疫分析测定结果显示:相比于空白对照组,1-甲基乙内酰脲及奥曲肽各实验组浓度下均能抑制INS-1细胞分泌胰岛素,且其抑制效果呈浓度依赖关系,随着浓度的增加,抑制效果增强。4.Western Blot检测结果显示:与空白对照组相比,1-甲基乙内酰脲及奥曲肽处理INS-1细胞后,其细胞内cAMP及PKA均明显下调,差异具有显著性(p0.05).结论:1.1-甲基乙内酰脲对体外培养的大鼠胰岛素瘤INS-1细胞具有抑制细胞增殖的作用,其机制可能与其诱导细胞凋亡及影响细胞周期有关。2.1-甲基乙内酰脲可以抑制INS-1细胞分泌胰岛素,其抑制激素分泌的作用具有剂量依赖性。1-甲基乙内酰脲抑制胰岛素分泌可能与其抑制了cAMP-PKA通路有关。
【关键词】：1-甲基乙内酰脲 奥曲肽 INS-1细胞 胰岛素分泌
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R736.7
【目录】：

• 摘要4-6
• Abstract6-8
• 主要缩略词中英文对照索引8-10
• 第1章 前言10-12
• 第2章 材料和方法12-24
• 2.1 实验材料12-14
• 2.2 实验方法14-24
• 第3章 数据处理24-26
• 第4章 技术路线图26-28
• 第5章 实验结果28-36
• 5.1 CCK-8 细胞增殖率检测及 FCM 流式细胞仪检测细胞周期分布、细胞凋亡28-33
• 5.2 碘[~(125)I]胰岛素放射免疫法测定胰岛素含量33-34
• 5.3 Western Blot 检测细胞胰岛素分泌相关蛋白的表达情况34-36
• 第6章 讨论36-40
• 第7章 结论40-42
• 参考文献42-46
• 文献综述46-54
• 参考文献51-54
• 致谢54-55

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 李卫;梁庆模;周筱筠;刘龙飞;卢先州;王松;;1-甲基乙内酰脲对SW480细胞作用的研究[J];中国现代医学杂志;2014年09期

2 王顺启,倪虹,王娟,陈力;独角莲对肝癌细胞SMMC-7721细胞增殖抑制作用机理的研究[J];细胞生物学杂志;2003年03期

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本文编号：534759