缺氧或肿瘤坏死因子α对全反式维甲酸诱导早幼粒白血病细胞凋亡的影响

发布时间：2017-07-18 22:11

  本文关键词：缺氧或肿瘤坏死因子α对全反式维甲酸诱导早幼粒白血病细胞凋亡的影响

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【摘要】：研究目的:急性早幼粒细胞白血病(acute promyelocytic leukemia,APL)发病急,病情重,出血倾向较明显。而全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)能够特异性诱导APL细胞分化成熟,缓解率较高,出血发生率较低。严重感染、分化综合征、白细胞升高等一些危险因素可诱发APL合并急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征(acute lung injury/acute respiratory distress syndrome,ALI/ARDS),产生低氧血症,造成机体缺氧的环境。肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor,TNF-α)是一种多效应的细胞因子,具有抗肿瘤作用。本课题用早幼粒白血病细胞株NB-4细胞建立体外缺氧模型,通过检测细胞凋亡和细胞膜TNFR1的表达,研究缺氧对ATRA诱导APL细胞凋亡的影响及探讨相关机制;通过检测细胞凋亡和细胞膜CD11b和TNFR1的表达,研究肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor,TNF-α)对ATRA诱导APL细胞凋亡和分化的影响及探讨相关机制。方法:本课题分两部分进行:第一部分包括以下四项实验内容:1.用ATRA诱导NB-4细胞分化并建立缺氧模型。2.细胞计数检测缺氧对分化后的NB-4细胞增殖的影响,Annexin V-FITC/PI染色法检测缺氧对分化后的NB-4细胞凋亡的影响。3.用流式细胞技术检测缺氧对分化后的NB-4细胞表面CD11b表达的影响。4.用免疫荧光技术检测缺氧对分化后的NB-4细胞膜TNFR1表达强度的影响。第二部分包括以下三项实验内容:1.细胞计数检测TNF-α联合ATRA对NB-4细胞增殖的影响,Annexin V-FITC/PI染色法检测TNF-α联合ATRA对NB-4细胞凋亡的影响。2.用流式细胞技术检测TNF-α联合ATRA对NB-4细胞表面CD11b表达的影响。3.用流式细胞技术检测TNF-α联合ATRA对NB-4细胞表面TNFR1表达的影响。结果:第一部分结果显示,与常氧组比较:1.细胞计数结果显示缺氧使分化后的NB-4细胞增殖减缓,缺氧时间越长,增殖速度越慢。2.Annexin V-FITC/PI染色结果显示缺氧使分化后的NB-4细胞凋亡和坏死受到抑制,缺氧时间越长,对分化后的NB-4细胞凋亡和坏死的抑制作用越明显。3.流式细胞术结果显示缺氧使分化后的NB-4细胞CD11b阳性细胞百分率稍有增高,缺氧时间越长,CD11b阳性细胞比例越高。4.免疫荧光染色结果显示缺氧使分化后的NB-4细胞膜TNFR1表达强度变弱。缺氧时间越长,细胞膜TNFR1表达强度越弱。第二部分结果显示,与不加TNF-α组比较:1.细胞计数结果显示TNF-α联合ATRA使NB-4细胞增殖速度更慢。2.Annexin V-FITC/PI染色结果显示TNF-α联合ATRA使NB-4细胞凋亡率更高。3.流式细胞术结果显示TNF-α联合ATRA使NB-4细胞在分化第2天CD11b阳性细胞的比例更高。把ATRA组TNFR1阳性细胞数作为100%对照,相比ATRA组,ATRA联合TNF-α组在整个分化过程中TNFR1阳性细胞比例下降。结论:1.缺氧可抑制ATRA诱导NB-4细胞凋亡,激活一部分已经向成熟中性粒细胞分化的NB-4细胞,使其表达更多的CD11b。其抑制已分化的NB-4细胞凋亡的机制可能为缺氧下调了细胞表面死亡受体TNFR1的数量。2.TNF-α可增强ATRA诱导NB-4细胞的凋亡和分化,其机制可能为TNF-α与细胞表面死亡受体TNFR1结合,启动了TNFR1介导的相关细胞凋亡机制。
【关键词】：全反式维甲酸 NB-4细胞 缺氧 肿瘤坏死因子α 细胞凋亡 细胞分化 TNFR1
【学位授予单位】：天津医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R733.7
【目录】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-10
• 符号说明10-11
• 前言11-16
• 研究现状、成果11-14
• 研究目的、方法14-16
• 一、缺氧对ATRA诱导NB-4 细胞凋亡的影响16-23
• 1.1 对象和方法16-19
• 1.1.1 实验材料16-17
• 1.1.2 方法与流程17-19
• 1.2 结果19-22
• 1.2.1 细胞计数检测缺氧对分化后的NB-4 细胞增殖的影响19-20
• 1.2.2 Annexin V-FITC/PI染色法检测缺氧对分化后的NB-4 细胞凋亡的影响20-21
• 1.2.3 用流式细胞技术检测缺氧对分化后的NB-4 细胞表面CD11b表达的影响21
• 1.2.4 用流式细胞技术检测TNF-α对分化后的NB-4 细胞表面TNFR1表达的影响21-22
• 1.3 小结22-23
• 二、TNF-α对ATRA诱导NB-4 细胞凋亡的影响23-33
• 2.1 对象和方法23-26
• 2.1.1 实验材料23-24
• 2.1.2 方法与流程24-26
• 2.2 结果26-32
• 2.2.1 TNF-α联合 ATRA 对早幼粒白血病细胞增殖的影响26-27
• 2.2.2 TNF-α联合 ATRA 对早幼粒白血病细胞凋亡的影响27-28
• 2.2.3 TNF-α对未分化的 NB4 细胞凋亡的影响28-29
• 2.2.4 TNF-α联合 ATRA 对早幼粒白血病细胞分化的影响29-30
• 2.2.5 TNF-α对早幼粒白血病细胞分化的影响30-31
• 2.2.6 TNF-α联合 ATRA 对早幼粒白血病细胞膜 TNFR1 的影响31-32
• 2.3 小结32-33
• 结论33-34
• 讨论34-38
• 参考文献38-42
• 发表论文和参加科研情况说明42-43
• 综述 TNF-α信号通路43-65
• 综述参考文献56-65
• 致谢65

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9 ;美开发调控细胞凋亡药物[J];中国肿瘤;1999年07期

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本文编号：560005